Métabolisme du corps entier chez les enfants avant et après le traitement d'une tumeur du SNC

En comparant les enfants atteints d'une tumeur du SNC nouvellement diagnostiquée avec des enfants ayant terminé leur traitement pour une tumeur du SNC, les enquêteurs souhaitent décrire le cheminement métabolique au cours de la période de traitement d'environ deux ans que ces enfants subissent. Ces résultats seront également comparés aux résultats de contrôles sains.

Conception et calendrier de l’essai :

Une étude transversale prospective, non randomisée.

Trois groupes de patients différents seront inclus :

• Groupe de patients A : enfants atteints d'une tumeur du SNC nouvellement diagnostiquée
• Groupe de patients B : enfants ayant terminé leur traitement pour une tumeur du SNC
• Témoins sains : enfants admis à l'hôpital à l'unité de surveillance de l'épilepsie (UEM)

L'essai se déroulera sur une durée totale de deux jours et se déroulera au Département de pédiatrie et de médecine de l'adolescence, Rigshospitalet et au Centre neuromusculaire de Copenhague, Département de neurologie, Rigshospitalet.

• Jour d'étude 1 : devrait durer environ 2 heures.
• Jour d'étude 2 : devrait durer environ 8 heures.

Jour d'étude 1 : Les enfants seront scannés par DXA et rempliront des questionnaires sur la qualité de vie et des scores de douleur. Dans certains cas, le jour d'étude 1 sera effectué après le jour d'étude 2, en fonction du plan de traitement du cancer de chaque patient.

Jour d'étude 2 : Pour les patients nouvellement diagnostiqués avec une tumeur du SNC : les enquêteurs s'efforcent de mener l'étude le jour 2 au cours de la première semaine suivant l'admission à l'hôpital en raison d'une tumeur du SNC nouvellement diagnostiquée. Cependant, les enquêteurs acceptent que le jour 2 de l'étude soit mené dans le premier mois suivant le diagnostic. Les sujets arriveront vers 8h00 au Centre neuromusculaire de Copenhague (CNMC), Rigshospitalet.

A l'arrivée, EMLA (crème anesthésique locale) sera appliquée sur la peau des enfants afin de minimiser tout inconfort pouvant survenir lors de l'insertion intraveineuse. Deux cathéters veineux périphériques sont insérés, un dans la veine cubitale médiale pour la perfusion d'isotopes stables et un dans une veine dorsale de la main pour un prélèvement sanguin. Si l'enfant porte un cathéter veineux central (CVK), nous n'insérerons qu'un seul cathéter veineux périphérique, dans la veine cubitale médiale pour la perfusion des isotopes stables.

Après 1 heure et 45 minutes de perfusion basale de traceur, des échantillons de sang basal sont prélevés (temps -15 et 0) pour la détermination des enrichissements basaux en traceurs à l'état d'équilibre et des concentrations d'hormones. Au temps = 0, un repas liquide mélangé est fourni. Des prélèvements sanguins sont effectués fréquemment pendant 6 heures par rapport au début du repas test (à 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 et 360 minutes)[24], [25]. Si l'enfant s'énerve ou si, pour d'autres raisons, nous souhaitons arrêter avant 6 heures, nous utiliserons les résultats déjà obtenus.

Les traceurs : dans cette étude, les enquêteurs perfuseront par voie intraveineuse de petites quantités de métabolites marqués avec des isotopes stables dans des perfusions intraveineuses continues amorcées de : D8-phénylalanine, D2-Tyrosine, acide 13C18-oléate, D2-glucose, D5-glycérol. Cette méthode est bien établie au CIMT et au CNMC et a déjà été utilisée pour étudier plusieurs catégories de patients : nouveau-nés (étude en cours), manchon gastrique, patients âgés et neuromusculaires.

Les traceurs sont préparés à la pharmacie hospitalière. Tous les traceurs sont achetés auprès de Cambridge Isotope Laboratories, Andover, MA, USA et conviennent à un usage humain. Les isotopes stables ne sont pas radioactifs et sont présents naturellement dans les aliments (par exemple dans le maïs).

Intervention alimentaire : Au temps = 0 (120 minutes après la perfusion), un repas liquide mélangé ajusté en fonction du poids est administré. Le repas se compose de : Protéine de caséine marquée à la D5-phénylalanine et à la D3-Leucine intrinsèquement marquées, 13C16palmitate, 13C6-Glucose dans un mélange de glucose, de protéine de caséine et d'huile de colza dissous dans l'eau dans une densité énergétique de 50 % de CHO, 35 % de matières grasses. et 15% de protéines. Du caséinate intrinsèquement marqué a été produit via une infusion de [D5]-phénylalanine et de [D3]leucine dans une vache en lactation pour obtenir du lait enrichi Foulumn, Université d'Arhus, à partir duquel la fraction caséinate a été isolée chez Arla Foods conformément aux bonnes pratiques de fabrication (BPF) et la sécurité a vérifié un magasin dans des conditions réglementaires appropriées jusqu'à son utilisation (Nørre Vium, Danemark) en suivant une procédure décrite précédemment.

Analyses d'échantillons de sang : Les échantillons seront collectés dans des seringues contenant 10 μL d'EDTA/mL pour éviter la coagulation. Le sang est immédiatement centrifugé à 4°C pour séparer le plasma des globules rouges. Les échantillons seront congelés dans des tubes codés et conservés à -80°C jusqu'à analyse.

Échantillons sanguins de routine : seront analysés immédiatement au Département de biochimie clinique, Rigshospitalet :

- Les échantillons de sang comprennent : insuline, HbA1C, cholestérol, HDL, LDL, triglycérides

Glucose et lactate : seront analysés (ABL 700) immédiatement au moment du prélèvement sanguin.

Échantillons de sang spécifiques :

• Acides gras libres : seront analysés par fluorométrie.
• Hormones (catécholamines, insuline, incrétines et glucagon) : seront analysées respectivement à l'aide des méthodes RIA et Elisa.
• Les enrichissements en isotopes stables dans le sang : seront analysés par spectrométrie de masse par chromatographie liquide en tandem (LC-MS/MS) et par spectrométrie de masse du rapport isotopique de combustion par chromatographie en phase gazeuse (GC-C-IRMS) (Thermo Scientific, Palo Alto, CA, USA et Brême, Allemagne).

Calculs : La cinétique quantitative des métabolites du corps entier sera calculée à l'aide de l'équation de Steele pour l'état non stationnaire adaptée pour l'analyse des isotopes stables dans les conditions post-absorption.