Метаболизм всего тела у детей до и после лечения опухоли ЦНС

Сравнивая детей с впервые диагностированной опухолью ЦНС с детьми, закончившими лечение от опухоли ЦНС, исследователи хотят описать метаболический путь в течение примерно двухлетнего периода лечения, который проходят эти дети. Эти результаты также будут сравниваться с результатами здорового контроля.

Схема и сроки испытания:

Проспективное нерандомизированное перекрестное исследование.

Будут включены три различные группы пациентов:

• Группа пациентов А: Дети с впервые диагностированной опухолью ЦНС.
• Группа пациентов Б: Дети, закончившие лечение опухоли ЦНС.
• Здоровый контроль: дети, поступившие в больницу в отделение эпилепсии (EMU)

Исследование продлится в общей сложности два дня и пройдет на базе отделения педиатрии и подростковой медицины Rigshospitalet и Копенгагенского нервно-мышечного центра отделения неврологии Rigshospitalet.

• Учебный день 1: Предполагается, что он продлится около 2 часов.
• День исследования 2: Предполагается, что он продлится около 8 часов.

День исследования 1: Дети пройдут DXA-сканирование и заполнят анкеты по качеству жизни и оценке боли. В некоторых случаях первый день исследования будет проводиться после второго дня исследования, в зависимости от плана лечения рака для каждого пациента.

День исследования 2: Для пациентов, у которых впервые диагностирована опухоль ЦНС: Исследователи стремятся провести день исследования 2 в течение первой недели после госпитализации в связи с впервые выявленной опухолью ЦНС. Тем не менее, исследователи согласны с тем, что второй день исследования будет проведен в течение первого месяца после постановки диагноза. Субъекты прибудут около 08:00 в Копенгагенский нервно-мышечный центр (CNMC), Rigshospitalet.

По прибытии на кожу детей будет нанесен EMLA (крем с местным анестетиком), чтобы свести к минимуму любой дискомфорт, который может возникнуть во время внутривенного введения. Вводят два периферических венозных катетера: один в медиальную локтевую вену для введения стабильных изотопов и один в дорсальную вену руки для забора крови. Если у ребенка установлен центральный венозный катетер (ЦВК), мы введем только один периферический венозный катетер в медиальную кубитальную вену для введения стабильных изотопов.

Через 1 час 45 минут после базальной инфузии индикатора берут базальные образцы крови (время -15 и 0) для определения базального стационарного обогащения индикатора и концентрации гормонов. В момент времени = 0 предоставляется жидкая смешанная еда. Пробы крови берутся часто в течение 6 часов относительно начала тестового приема пищи (в 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 и 360 минут) [24]. [25]. Если ребенок расстроится или мы по другим причинам захотим остановиться раньше 6 часов, воспользуемся уже полученными результатами.

Трейсеры: в этом исследовании исследователи будут внутривенно вводить небольшие количества метаболитов, меченных стабильными изотопами, в виде непрерывных внутривенных инфузий: D8-фенилаланин, D2-тирозин, 13C18-олеатовая кислота, D2-глюкоза, D5-глицерин. Этот метод хорошо зарекомендовал себя как в CIMT, так и в CNMC и ранее использовался при обследовании нескольких категорий пациентов: новорожденных (продолжающееся исследование), пациентов с желудочным рукавом, пожилых людей и пациентов с нервно-мышечными заболеваниями.

Трейсеры готовятся в больничной аптеке. Все трассеры приобретены в компании Cambridge Isotope Laboratories, Андовер, Массачусетс, США и подходят для использования человеком. Стабильные изотопы нерадиоактивны и встречаются в продуктах питания (например, в кукурузе).

Пищевое вмешательство: во время = 0 (через 120 минут после инфузии) дают жидкую смешанную пищу, скорректированную по весу. Еда состоит из: казеинового белка, меченного D5-фенилаланином и меченного D3-лейцином, 13C16пальмитата, 13C6-глюкозы в смеси глюкозы, казеинового белка и рапсового масла, растворенных в воде с энергетической плотностью 50% CHO, 35% жира. и 15% белка. Казеинат с внутренней маркировкой был получен путем введения [D5]-фенилаланина и [D3] лейцина лактирующей корове для получения обогащенного молока. Фулумн, Университет Орхуса, из которого в Arla Foods была выделена фракция казеината в соответствии с надлежащей производственной практикой (GMP). и безопасность проверяли магазин при соблюдении соответствующих нормативных условий до момента использования (Nørre Vium, Дания) в соответствии с ранее описанной процедурой.

Анализы образцов крови: Образцы будут собираться в шприцы, содержащие 10 мкл ЭДТА/мл для предотвращения коагуляции. Кровь немедленно центрифугируют при температуре 4°C для отделения плазмы от эритроцитов. Образцы будут заморожены в пробирках с кодировкой и сохранены при температуре -80°С до проведения анализа.

Обычные пробы крови: Анализы проводятся немедленно в отделении клинической биохимии Rigshospitalet:

- Образцы крови включают: инсулин, HbA1C, холестерин, ЛПВП, ЛПНП, триглицериды.

Глюкоза и лактат: анализируются (ABL 700) сразу после взятия крови.

Конкретные образцы крови:

• Свободные жирные кислоты: будут анализироваться с помощью флуорометрии.
• Гормоны (катехоламины, инсулин, инкретины и глюкагон): будут анализироваться с использованием методов РИА и Элиза соответственно.
• Концентрация стабильных изотопов в крови: будет анализироваться с использованием жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) и газовой хроматографии масс-спектрометрии соотношения изотопов горения (GC-C-IRMS) (Thermo Scientific, Пало-Альто, Калифорния, США и Бремен, Германия).

Расчеты: Количественная кинетика метаболитов всего тела будет рассчитана с использованием уравнения Стила для нестационарного состояния, адаптированного для анализа стабильных изотопов в постабсорбционных условиях.