Ganzkörperstoffwechsel bei Kindern vor und nach der Behandlung eines ZNS-Tumors

Durch den Vergleich von Kindern mit neu diagnostiziertem ZNS-Tumor mit Kindern, die wegen eines ZNS-Tumors behandelt wurden, möchten die Forscher den Stoffwechselweg während des etwa zweijährigen Behandlungszeitraums beschreiben, den diese Kinder durchlaufen. Diese Ergebnisse werden auch mit Ergebnissen gesunder Kontrollpersonen verglichen.

Studiendesign und Zeitrahmen:

Eine prospektive, nicht randomisierte Querschnittsstudie.

Es werden drei verschiedene Patientengruppen einbezogen:

• Patientengruppe A: Kinder mit neu diagnostiziertem ZNS-Tumor
• Patientengruppe B: Kinder, die wegen eines ZNS-Tumors behandelt wurden
• Gesunde Kontrollen: Kinder, die auf der Epilepsie-Überwachungseinheit (EMU) ins Krankenhaus eingeliefert werden

Die Studie wird über insgesamt zwei Tage durchgeführt und findet in der Abteilung für Pädiatrie und Jugendmedizin des Rigshospitalet und im Copenhagen Neuromuscular Center, Abteilung für Neurologie, Rigshospitalet, statt.

• Studientag 1: Dauer voraussichtlich ca. 2 Stunden.
• Studientag 2: Dauer voraussichtlich ca. 8 Stunden.

Studientag 1: Die Kinder werden DXA-gescannt und füllen Fragebögen zur Lebensqualität und Schmerzbewertungen aus. In einigen Fällen wird Studientag 1 nach Studientag 2 durchgeführt, abhängig vom Krebsbehandlungsplan für jeden Patienten.

Studientag 2: Für Patienten mit neu diagnostiziertem ZNS-Tumor: Die Forscher bemühen sich, den Studientag 2 innerhalb der ersten Woche nach der Krankenhauseinweisung aufgrund eines neu diagnostizierten ZNS-Tumors durchzuführen. Die Forscher akzeptieren jedoch, dass Studientag 2 innerhalb des ersten Monats nach dem Zeitpunkt der Diagnose durchgeführt wird. Die Probanden werden gegen 08.00 Uhr im Copenhagen Neuromuscular Center (CNMC), Rigshospitalet, eintreffen.

Bei der Ankunft wird EMLA (lokale Betäubungscreme) auf die Haut der Kinder aufgetragen, um etwaige Beschwerden während der intravenösen Einführung zu minimieren. Es werden zwei periphere Venenkatheter eingeführt, einer in der medialen Kubitalvene zur Infusion stabiler Isotope und einer in einer dorsalen Handvene zur Blutentnahme. Wenn das Kind einen zentralen Venenkatheter (CVK) hat, führen wir zur Infusion der stabilen Isotope nur einen peripheren Venenkatheter in die mediale Kubitalvene ein.

Nach 1 Stunde und 45 Minuten Basal-Tracer-Infusion werden Basalblutproben entnommen (Zeitpunkt -15 und 0) zur Bestimmung der Basal-Steady-State-Tracer-Anreicherung und der Hormonkonzentrationen. Zum Zeitpunkt = 0 wird eine flüssige Mischmahlzeit bereitgestellt. Blutproben werden regelmäßig 6 Stunden lang relativ zum Beginn der Testmahlzeit entnommen (nach 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 und 360 Minuten)[24]. [25]. Wenn das Kind unruhig wird oder wir aus anderen Gründen früher als 6 Stunden aufhören möchten, verwenden wir die bereits erzielten Ergebnisse.

Die Tracer: In dieser Studie werden die Forscher kleine Mengen von Metaboliten intravenös infundieren, die mit stabilen Isotopen markiert sind, in vorbereiteten kontinuierlichen intravenösen Infusionen von: D8-Phenylalanin, D2-Tyrosin, 13C18-Oleatsäure, D2-Glukose, D5-Glycerin. Diese Methode ist sowohl am CIMT als auch am CNMC gut etabliert und wurde bereits bei der Untersuchung verschiedener Patientenkategorien eingesetzt: Neugeborene (laufende Studie), Schlauchmagen, ältere und neuromuskuläre Patienten.

Die Tracer werden in der Krankenhausapotheke hergestellt. Alle Tracer werden von Cambridge Isotope Laboratories, Andover, MA, USA gekauft und sind für den menschlichen Gebrauch geeignet. Stabile Isotope sind nicht radioaktiv und kommen natürlicherweise in Lebensmitteln vor (z. B. in Mais).

Nahrungsmittelintervention: Zum Zeitpunkt = 0 (120 Minuten nach der Infusion) wird eine flüssige gemischte Mahlzeit, angepasst an das Gewicht, verabreicht. Die Mahlzeit besteht aus: Intrinsisch markiertes D5-Phenylalanin- und D3-Leucin-markiertes Kaseinprotein, 13C16-Palmitat, 13C6-Glukose in einer Mischung aus Glukose, Kaseinprotein und Rapsöl, gelöst in Wasser mit einer Energiedichte von 50 % CHO, 35 % Fett und 15 % Protein. Intrinsisch markiertes Kaseinat wurde durch eine Infusion von [D5]-Phenylalanin und [D3]Leucin in eine laktierende Kuh hergestellt, um angereicherte Milch zu erhalten. Foulumn, Universität Arhus, aus der die Kaseinatfraktion bei Arla Foods gemäß Good Manufacturing Practice (GMP) isoliert wurde. und Sicherheit überprüften ein Geschäft unter geeigneten behördlichen Bedingungen bis zur Verwendung (Nørre Vium, Dänemark) nach einem zuvor beschriebenen Verfahren.

Analysen von Blutproben: Die Proben werden in Spritzen mit 10 μl EDTA/ml gesammelt, um eine Gerinnung zu verhindern. Das Blut wird sofort bei 4 °C zentrifugiert, um das Plasma von den roten Blutkörperchen zu trennen. Die Proben werden in kodierten Röhrchen eingefroren und bis zur Analyse bei -80 °C gelagert.

Routinemäßige Blutproben: Werden sofort in der Abteilung für klinische Biochemie des Rigshospitalet analysiert:

- Zu den Blutproben gehören: Insulin, HbA1C, Cholesterin, HDL, LDL, Triglyceride

Glukose und Laktat: werden sofort bei der Blutentnahme analysiert (ABL 700).

Spezifische Blutproben:

• Freie Fettsäuren: werden mittels Fluorometrie analysiert.
• Hormone (Katecholamine, Insulin, Inkretine und Glucagon): werden mit der RIA- bzw. Elisa-Methode analysiert.
• Stabile Isotopenanreicherungen im Blut: werden mittels Flüssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS) und Gaschromatographie-Verbrennungsisotopenverhältnis-Massenspektrometrie (GC-C-IRMS) analysiert (Thermo Scientific, Palo Alto, CA, USA und). Bremen, Deutschland).

Berechnungen: Die quantitative Kinetik des Ganzkörpermetaboliten wird unter Verwendung der Steele-Gleichung für den instationären Zustand berechnet, die für die Analyse stabiler Isotope unter postabsorptiven Bedingungen angepasst ist.