Endometriumin sytologian ja kohdunkaulan metylaatiomääritysten kliiniset tutkimukset kohdun limakalvon syövän seulonnassa ja hedelmällisyyden säilymisen arvioinnissa

Kohdun limakalvosyöpä (EC) on merkittävä kansanterveysongelma naisille maailmanlaajuisesti, ja joka vuosi diagnosoidaan lähes 200 000 uutta tapausta. Se on neljänneksi yleisin naisten terveyttä uhkaava gynekologinen pahanlaatuisuus, ja se on erityisen yleistä kehittyneiden maiden naisten keskuudessa [1,2]. Kiinassa EY:llä on merkittävä asema gynekologisessa onkologiassa, ja tutkimukset osoittavat, että sen ilmaantuvuus on suurempi kuin vain rinta- ja kohdunkaulasyövät [3]. Viime vuosina kohdun limakalvosyövän ilmaantuvuus on lisääntynyt tasaisesti erityisesti perimenopausaalisilla ja postmenopausaalisilla naisilla, ja trendi on noussut nuorempiin ikäryhmiin [4,5].

Perinteisten etiologisten luokittelujen mukaan kohdun limakalvon syöpä voidaan jakaa kahteen tyyppiin: Tyyppi I, joka on estrogeeniriippuvainen, vaikuttaa tyypillisesti nuoremmille naisille, jolle on ominaista pienempi solujen ja kudosten atypia, ja siihen liittyy yleensä parempi ennuste. Sitä vastoin tyyppi II on riippumaton estrogeenialtistuksesta, sillä on usein korkea solu- ja kudosatypia, se vaikuttaa iäkkäisiin naisiin ja se liittyy huonompiin ennusteisiin [6]. Vuoden 2023 FIGO-suosituksissa otettiin käyttöön geeniin perustuva endometriumin syövän molekyyliluokitusjärjestelmä. ilmaisuprofiilit. Tämä järjestelmä tunnistaa neljä molekyylialatyyppiä: POLE-mutantti, epäsopivuuskorjauspuutteellinen (dMMR), ei spesifistä molekyyliprofiilia (NSMP) ja p53-mutantti (p53abn). Nämä luokitukset ovat osoittaneet parempaa ennustetarkkuutta, ja ne on sisällytetty vuoden 2023 FIGO-vaiheen kriteereihin [7-9]. Yleisenä gynekologisena pahanlaatuisena kasvaimena toistuvalla tai metastasoituneella kohdun limakalvosyövällä on huono ennuste, mikä korostaa varhaisen havaitsemisen ja diagnosoinnin kriittistä merkitystä [10].

1.2 Kohdun limakalvosyövän varhaiset seulontamenetelmät Tehokkaiden kohdun limakalvosyövän varhaisten seulontamenetelmien etsiminen on herättänyt kasvavaa huomiota tutkijoilta ja kliinikoilta maailmanlaajuisesti, ja tätä kysymystä käsittelee yhä useampi tutkimus [11,12]. Tällä hetkellä ensisijaisena menetelmänä varhaisessa diagnosoinnissa on edelleen patologinen tutkimus kohdun limakalvon kyretaasin avulla, jota pidetään kliinisenä kultastandardina. Curettagella on kuitenkin useita rajoituksia, mukaan lukien toimenpiteen monimutkaisuus, kustannukset, kohdunsisäisen verenvuodon riski, mahdollinen iatrogeeninen infektio ja potilaan epämukavuus [13]. Kyretaasin lisäksi kuvantamistekniikoita, kuten transvaginaalista ultraääntä (TVU), käytetään laajalti kliiniseen diagnoosiin. TVU on ei-invasiivinen, turvallinen ja kätevä menetelmä. Sen diagnostista tarkkuutta rajoittaa kuitenkin usein kohdun limakalvon näennäinen paksuus, johon voivat vaikuttaa erilaiset tekijät, kuten kohdun yksilöllinen anatomia ja potilaan kuukautiskierron vaihe [14,15]. Verispektrometria voi havaita kohdun limakalvon syövän kaikissa vaiheissa ja auttaa tunnistamaan epätyypillisen kohdun limakalvon liikakasvun. Lisäksi on löydetty useita mahdollisia biomarkkereita, kuten mikroRNA:ita. Verikokeilla on kuitenkin yleensä alhainen spesifisyys ja herkkyys, mikä tekee niistä alttiita muiden patologisten tekijöiden häiriöille, mikä rajoittaa niiden kliinisiä käyttömahdollisuuksia [16,17].

1.3 Endometriumin sytologinen tutkimus Yleisesti käytettyjen seulontamenetelmien tarkastelu paljastaa, että jokaisella on rajoituksensa, eikä niitä voida pitää optimaalisena tai yleisesti sovellettavana lähestymistavana. Näin ollen on olemassa kipeä tarve tehokkaammalle, kustannustehokkaammalle ja vähäriskisemmälle kohdun limakalvosyövän seulontamenetelmälle.

Nestepohjainen endometriumin sytologia on nouseva minimaalisesti invasiivinen seulontatekniikka. Tämä menetelmä sisältää kohdun limakalvon solujen ja kudosten keräämisen kohtusta ja sen alavirran anatomisista rakenteista. Näytteet säilötään ja analysoidaan joko nestepohjaisilla sytologiatekniikoilla tai kudosnäytteiden menetelmillä patologisen diagnoosin saavuttamiseksi. Verrattuna invasiivisiin toimenpiteisiin, kuten fraktiokyretaasiin, nestepohjainen sytologia tarjoaa etuja kohdun limakalvosyövän seulonnassa, mukaan lukien se, että se on minimaalisesti invasiivinen, kätevä ja matalariskinen [18]. Joissakin kliinisissä ohjeissa nestepohjaista kohdun limakalvon sytologiaa on suositeltu ensisijaiseksi kohdun limakalvosyövän seulontamenetelmäksi[19,20].

Tällä hetkellä kohdun limakalvon sytologiseen näytteenottoon käytetään useita instrumentteja, mukaan lukien Tao Brush, Li Brush, pipelle katetri ja SAP-1 endometriumin näytteenottolaite. Tao Brush ja Li Brush ovat pääasiassa käytössä länsimaissa, kun taas SAP-1, kotimaisesti kehitetty laite, käytetään yleisemmin Kiinassa. Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että Tao Brush tarjoaa näytteen riittävyyden välillä 89,9 % - 100 %, ja diagnostinen vastaavuusaste histopatologisten löydösten kanssa on 91 % - 96 %. Epätyypillisen kohdun limakalvon liikakasvun ja kohdun limakalvon syövän diagnosoimiseksi Tao-siveltimen herkkyys vaihtelee 91,7 %:sta 100 %:iin ja spesifisyys 96 %. Vastaavasti Li-harjan herkkyys on 92,73 % ja spesifisyys 98,15 % kohdun limakalvosyövän ja kohdun limakalvon liikakasvun seulonnassa ilman atypiaa. Yksinkertaisuudestaan ​​ja luotettavuudestaan ​​tunnettu pipelle-imumenetelmä osoittaa, että näytteen riittävyys on 73,9-100 %, herkkyys 77,4-94,1 % ja spesifisyys 98,5-100 % kohdun limakalvon syövän diagnosoinnissa. Lisäksi pipelle-aspiraatiomenetelmä osoittaa sekä korkean herkkyyden (99,6 %) että spesifisyyden (98 % - 100 %) kohdun limakalvosyövän ja sen esiastevaurion, epätyypillisen kohdun limakalvon liikakasvun, havaitsemiseksi. SAP-1 endometriumin näytteenottolaite on myös osoittautunut tehokkaaksi kohdun limakalvosyövän diagnosoinnissa herkkyydellä, spesifisyydellä, positiivisella ennustearvolla ja negatiivisella ennustearvolla vastaavasti 91,7 %, 100,0 %, 100,0 % ja 99,3 %. Kohdun limakalvon hyperplasiaan ilman atyppiaa SAP-1-laite tarjoaa herkkyyden, spesifisyyden, positiivisen ennustusarvon ja negatiivisen ennustusarvon 82,0 %, 100,0 %, 100,0 % ja 99,4 % [21]. Näistä menetelmistä Pipelle-imua on tutkittu laajimmin kliinisissä sovelluksissa, ja sillä on etuja näytteiden määrän ja tarkkuuden suhteen. Sitä rajoittaa kuitenkin visuaalisen valvonnan puute näytteenoton aikana, mikä usein rajoittaa näytealuetta. Sivellinnäytteenotto kattaa laajemman alueen ja on tehokas solujen keräämiseen, mutta se ei välttämättä ota riittävästi pieniä kudosnäytteitä. SAP-1-näytteenotin on suunniteltu tasapainottamaan molempien etuja, vaikka laajempia tutkimuksia tarvitaan vielä sen tehokkuuden arvioimiseksi.

Nestepohjainen endometriumin syövän sytologinen testaus sisältää näytteiden keräämisen endometriumista, kohdunkaulasta, emättimestä ja virtsasta. Kohorttitutkimus, jossa tutkittiin emättimen näytteitä, osoitti, että emätinnäytteiden avulla saadut kohdun limakalvosolut analysoitiin käyttämällä fluoresenssi in situ -hybridisaatiota (FISH), jotka kohdistettiin kolmeen kohdun limakalvosyöpään liittyviin geeniin (CTNNB1 kromosomissa 3p22.1, FBXW7 kromosomissa 4q31.3, ja APC kromosomissa 5q22.2), tuotti merkittäviä tuloksia kohdun limakalvon solujen seulonnassa. 65 vahvistetusta kohdun limakalvon syövän tapauksesta vain 2 potilaalla (3 %) ei esiintynyt poikkeavuuksia näiden kolmen geneettisen lokuksen ilmentymistasoissa, mikä johti 97 %:n herkkyyteen. 70 koehenkilön tutkimuksessa optimaalisen kynnyksen asettaminen määrittämällä positiiviseksi tulokseksi, että > 33,60 % emättimen sivelynäytteessä olevista soluista osoitti ilmeisiä patologisia piirteitä, tuotti herkkyyden 0,91, spesifisyyden 0,83 ja ROC-käyrän alla olevan alueen (AUC). ) 0,94 (95 % CI: 0,88-0,99) [22]. Lisäksi monikeskustutkimuksessa koehenkilöt jaettiin viiteen kohorttiin sairauden taustan perusteella ja käytettiin kolmea menetelmää kohdun limakalvosolujen keräämiseen: kohdunkaulan sivelynäytteet, emättimen pyyhkäisynäytteet ja itsekeräys. Nämä näytteet analysoitiin sitten käyttämällä naisten syövän riskintunnistuksen kvantitatiivista polymeraasiketjureaktiota (WID-qEC). WID-qEC-tekniikka käyttää polymeraasiketjureaktiota (PCR) CpG-saarekkeen metylaation arvioimiseen ZSCAN12-geenin ja GYPC-geenin tietyillä alueilla kohdun limakalvosyövän sytologisessa seulonnassa. Optimaalisella kynnysarvolla herkkyys kohdunkaulan syövän (EC) havaitsemiseksi oireellisten potilaiden kohdunkaulan, itse otetuista ja emättimen vanupuikkonäytteistä oli 97,2 % (95 % CI, 90,2-99,7), 90,1 % (83,6-94,6) ja 100 % (63,1-100), kun taas spesifisyys oli 75,8 % (63,6-85,5), 86,7 % (79,3-92,2), ja 89,1 % (77,8-95,9), vastaavasti. Tämä monikeskustutkimus sisälsi myös prospektiivisen tutkimuksen, jossa kohdunkaulannäytteitä käytettiin endometriumin syövän esiintymisen ennustamiseen tietyn ajanjakson aikana. WID-qEC tunnisti onnistuneesti 90,9 % (95 % CI, 70,8-98,9) kohdun limakalvon syöpätapauksista vuosi ennen kuin koehenkilöt lopulta diagnosoitiin. Tämän monikeskustutkimuksen tulokset osoittivat yhdenmukaista suorituskykyä eri väestöryhmissä, mukaan lukien vaihdevuodet, ikä, syövän vaihe, luokka ja etnisyys [23].

Eräässä toisessa tutkimuksessa, jossa käytettiin kohdunkaulan sivelynäytteitä, kohdun limakalvosyövän WID-qEC-seulonnalla saavutettiin 86 %:n herkkyys ja 90 %:n herkkyys 64 varmistetussa kohdun limakalvon syöpätapauksessa ja 225 vertailuhenkilössä, joiden käyrän alla oleva pinta-ala (AUC) oli 0,92 (95). % CI: 0,88-0,97). 150 terveen ruotsalaisen naisen prospektiivitutkimuksessa WID-qEC-seulonta vahvisti 54 kohdun limakalvon syöpätapausta kolmen vuoden kuluttua. Herkkyys ja spesifisyys olivat 52 % ja 98 %, ja AUC oli 0,82 (95 % CI: 0,74-0,89). [24]. Kohdun limakalvon näytteenotossa pipelle-katetri on ensisijainen kansainvälisesti käytetty menetelmä. Meta-analyysissa 12 tutkimusta, jotka julkaistiin vuosina 1986–2022 ja joihin osallistui 1 607 osallistujaa, arvioitiin pipelen käyttöä kohdun limakalvon syövän seulonnassa. Tulokset osoittivat, että pipelle-testin herkkyys, spesifisyys, positiivinen todennäköisyyssuhde ja negatiivinen todennäköisyyssuhde olivat 0,774 (95 % CI: 0,565-0,900), 0,985 (95 % CI: 0,927-0,997), 97 000 (95 % CI: 14 000-349 000), ja 0,241 (95 % CI: 0,101-0,442), vastaavasti. Nämä tulokset olivat verrattavissa diagnostisen kuretaasin tuloksiin. Perinteisen diagnostisen kuretaasin herkkyys, spesifisyys, positiivinen todennäköisyyssuhde ja negatiivinen todennäköisyyssuhde olivat 0,880 (95 % CI: 0,281-0,993), 0,984 (95 % CI: 0,956-0,995), 59 300 (95 % CI: 14 200-153 000), ja 0,194 (95 % CI: 0,007-0,732), vastaavasti [25]. Samanlainen prospektiivinen tutkimus Kiinasta tutki kohdun limakalvon sytologiaa SAP-1 endometriumin näytteenottimella. Tässä tutkimuksessa verrattiin tuloksia hysteroskooppisella tutkimuksella saatuihin tuloksiin ja havaittiin, että herkkyys oli 87,5 % ja spesifisyys 100 %. Tämän tutkimuksen otoskoko oli kuitenkin suhteellisen pieni, mikä vaati lisävalidointia suuremmilla tutkimuksilla [26].

1.4 Kohdunkaulan solumetylaatiotestaus Kohdunkaulan solumetylaatiotestaus on toinen lupaava menetelmä kohdun limakalvosyövän metylaatioon perustuvassa seulonnassa. Tämä lähestymistapa kohdistuu tiettyihin geeneihin, jotka läpikäyvät metylaation kohdun limakalvosyövän alkuvaiheessa. Neljän geenin (CD01, BHLHE22, ACTB ja SEPTIN9) yhdistetty metylaatioanalyysi käyttää kuukautisveren tai emättimen eritteitä näytteinä, mikä tarjoaa etuja, kuten turvallisuuden, ei-invasiivisuuden ja itsekeräyksen. Tämä menetelmä on osoittanut korkean herkkyyden ja spesifisyyden kohdun limakalvosyövän varhaisessa havaitsemisessa. Meneillään olevat tutkimukset viittaavat siihen, että kohdunkaulan solujen metylaatiotestien herkkyys ja spesifisyys voivat olla 93,2 % ja 96 %, vaikka näitä tietoja ei ole vielä julkaistu [27-29].

1. Niu S, Molberg K et ai. Molekyyliominaisuudet, ehdokas-immunohistokemialliset markkerit ja lupaavat tulokset kolmen markkerin paneelista: nykyinen tila ja tulevaisuuden ohjeet. Syövät (Basel). 2024, 15. maaliskuuta; 16(6):1159. doi: 10,3390/syöpä16061159.
2. Otsuka I. Systemaattisen lymfadenektomian terapeuttinen hyöty solmunegatiivisessa kohdun rajatussa endometrioidisessa kohdun limakalvon karsinoomassa: Adjuvanttihoidon laiminlyönti. Syövät (Basel). 2022 syyskuuta 17;14(18):4516. doi: 10,3390/syöpä14184516.
3. Hao C, Lin S et ai. Mahdolliset seerumin metaboliitit ja pitkäketjuiset ei-koodaavat RNA-biomarkkerit kohdun limakalvon syöpäkudokselle. J Obstet Gynaecol Res. 2023 helmikuu;49(2):725-743. doi: 10.1111/jog.15494. Epub 2022 12. joulukuuta.
4. Hu Z, Wu Z, et ai. Proteogenominen näkemys varhain alkavasta endometrioidisesta kohdun limakalvon karsinoomasta: hedelmällisyyttä säästävän hoitovasteen ennustajat. Nat Genet. 2024 huhtikuu;56(4):637-651. doi: 10.1038/s41588-024-01703-z. Epub 2024 huhtikuu 2.
5. Di Cristofano A, Ellenson LH. Endometriumin karsinooma. Annu Rev Pathol. 2007;2:57-85. doi: 10.1146/annurev.pathol.2.010506.091905.
6. Rammohan P, Thummar V et ai. Nab-paklitakselipohjainen systeeminen lähestymistapa täydellisen remission saavuttamiseksi uusiutuneen vaiheen III kohdun limakalvon karsinoomassa: näkemyksiä Intian niemimaalta. Cureus. 2024 28. maaliskuuta 16(3):e57111. doi: 10.7759/cureus.57111.
7. Raffone A, Travaglino A et ai. Kohdun limakalvosyövän TCGA-molekyyliryhmät: yhdistetyt tiedot ennusteesta. Gynecol Oncol. 2019 marraskuu;155(2):374-383. doi: 10.1016/j.ygyno.2019.08.019. Epub 2019 29. elokuuta.
8. Kohdun limakalvon syövän FIGO-vaihe: 2023
9. Bassetty KC, Begum D et ai. FIGO 2023 kohdun limakalvon lavastus: uskon harppaus uuteen "ennusteperusteiseen" pikemminkin kuin "anatomiseen" lavastukseen - liian nopeasti liian raivoissaan? J Cancer Res Clin Oncol. 2024, 11. toukokuuta; 150(5):251. doi: 10.1007/s00432-024-05739-w.
10. Morrow CP, Bundy BN et ai. Suhde kirurgis-patologisten riskitekijöiden ja lopputuloksen välillä kohdun limakalvon kliinisen vaiheen I ja II karsinoomassa: Gynecologic Oncology Group -tutkimus. Gynecol Oncol. 1991 tammikuu;40(1):55-65. doi: 10.1016/0090-8258(91)90086-k.
11. Crosbie EJ, Kitson SJ et ai. Endometriumin syöpä. Lansetti. 2022 huhtikuu 9;399(10333):1412-1428. doi: 10.1016/S0140-6736(22)00323-3.
12. Lu KH, Broaddus RR. Endometriumin syöpä. N Engl J Med. 2020 19. marraskuuta; 383(21):2053-2064. doi: 10.1056/NEJMra1514010.
13. JIANG Bo, LIU Lu et ai. Nestepohjaisen sytologisen testin käyttö kohdun limakalvon syövän seulonnassa, maailman viimeisin lääketiede (sähköinen versio) 2016 Vo1.16 No.18
14. Tabor A, Watt HC et ai. Endometriumin paksuus kohdun limakalvosyövän testissä naisilla, joilla on postmenopausaalinen emättimen verenvuoto. Obstet Gynecol. 2002 huhtikuu;99(4):663-70. doi: 10.1016/s0029-7844(01)01771-9.
15. Pertl B, Lahousen M et ai. Stellenwert der Sonographie bei der Früherkennung des Endometriumkarzinoms [Ultraäänen arvo kohdun limakalvon karsinooman varhaisessa havaitsemisessa]. Gynakol Geburtshilfliche Rundsch. 1996;36(1):14-20. saksaksi. doi: 10.1159/000272606.
16. Fan X, Zou X et ai. MikroRNA:n ilmentymisprofiili seerumissa paljastaa uusia diagnostisia biomarkkereita endometriumin syövälle. Biosci Rep. 2021 Jun 25;41(6):BSR20210111. doi: 10.1042/BSR20210111.
17. Paraskevaidi M, Morais CLM et ai. Endometriumin syövän havaitseminen verispektroskopialla: Diagnostinen poikkileikkaustutkimus. Syövät (Basel). 2020, 16. toukokuuta;12(5):1256. doi: 10,3390/syöpä12051256.
18. Hong Yu, Xie Xin et ai. Endometriumnäytteenottimen SAP-1 käyttö kohdun limakalvon syövän seulomiseen postmenopausaalisilla naisilla: diagnostinen testitutkimus, International Journal of Clinical Obstetrics and Gynecology 2021; 5(5): 147-151 .doi:10.33545/gynae.2021.v5.i5c.1032
19. ACOG-komitean lausunto nro 734: Transvag inaalisen ultraäänitutkimuksen rooli postmenopausaalista verenvuotoa sairastavien naisten endometriumin arvioinnissa. Obstet Gynecol 2018;131(5):e124-e129.
20. Yu Mei, Xiang Yang, et ai. Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology, 2020, 55(5):307-311.
21. LI Yingtao, HUANG Xiaowu. Kohdun limakalvon näytteenottomenetelmien kehitys ja edistyminen [J]. International Journal of Obstetrics and Gynecology, 2024, 51 (01): 105-109.
22. Weimer J, Hüttmann M et ai. Fluoresenssi in situ -hybridisaatiotesti endometriumin karsinoomasolujen havaitsemiseksi ei-invasiivisella emättimen vanupuikolla. J Cell Mol Med. 2023 helmikuu;27(3):379-391. doi: 10.1111/jcmm.17658. Epub 2023 10. tammikuuta.
23. Herzog C, Marín F et ai. Yksinkertainen kohdunkaulan epigeneettinen testi sellaisten naisten seulomiseen ja nopeaan tutkimiseen, joilla epäillään kohdun limakalvon syöpää: validointi useissa kohortissa ja tapaus-/kontrollisarjoissa. J Clin Oncol. 20.11.2022;40(33):3828-3838. doi: 10.1200/JCO.22.00266. Epub 2022 24. elokuuta.
24. Barrett JE, Jones A et ai. WID-EC-testi kohdun limakalvosyövän havaitsemiseen ja riskin ennustamiseen. Int J Cancer. 2023, 1. toukokuuta; 152(9):1977-1988. doi: 10.1002/ijc.34406. Epub 2023 17. tammikuuta.
25. Sakna NA, Elgendi M et ai. Kohdun limakalvon näytteenottotestien diagnostinen tarkkuus kohdun limakalvon syövän havaitsemiseksi: systemaattinen katsaus ja meta-analyysi. BMJ auki. 2023 kesäkuu 23;13(6):e072124. doi: 10.1136/bmjopen-2023-072124.
26. Hong Yu, Xie Xin et ai. Endometriumnäytteenottimen SAP-1 käyttö kohdun limakalvon syövän seulomiseen postmenopausaalisilla naisilla: diagnostinen testitutkimus, International Journal of Clinical Obstetrics and Gynecology 2021; 5(5): 147-151. doi:10.33545/gynae.2021.v5.i5c.1032
27. Crosbie EJ, Kitson SJ et ai. Endometriumin syöpä. Lansetti. 2022 huhtikuu 9;399(10333):1412-1428. doi: 10.1016/S0140-6736(22)00323-3.
28. Sung H, Ferlay J et ai. Globaalit syöpätilastot 2020: GLOBOCAN-arviot maailmanlaajuisesta ilmaantumisesta ja kuolleisuudesta 36 syövälle 185 maassa. CA Cancer J Clin. 2021 toukokuu;71(3):209-249. doi: 10.3322/caac.21660. Epub 2021 4. helmikuuta.
29. Zheng Rongshou, Sun Kexin et ai. Analyysi pahanlaatuisten kasvainten esiintyvyydestä Kiinassa vuonna 2015[J].Chinese Journal of Oncology, 2019,41(1):19-28.