Probioottien roolin arviointi 6–36 kuukauden ikäisillä lapsilla, joita hoidetaan keuhkokuumeesta

Tämä tutkimus on satunnaistettu, kaksoissokko, lumekontrolloitu kliininen tutkimus, joka suoritetaan Phu Thon maakunnan synnytys- ja lastensairaalassa arvioidakseen nenä-nielun suihkuna (LiveSpo® Navax) annettua Bacillus-itiosiirtoja sisältävää probioottia sekä mahdollista suun kautta annettavaa probioottisuspensiota (LiveSpo® Preg-Mom) standardilääkinnällisen hoidon lisänä 6–36 kuukauden ikäisillä keuhkokuumeeseen sairaalaan otetuilla lapsilla.

Kaikkiaan 330 kelvollista lasta satunnaistetaan suhteessa 1:1:1 kolmeen ryhmään (n = 110 per ryhmä):

kontrolliryhmä, joka saa 0,9 % natriumkloridin nenä-nielusuihketta ja suun kautta RO-vettä, Navax-ryhmä, joka saa Bacillus-itiosiirtoja sisältävää probioottia nenä-nielusuihkettana ja suun kautta RO-vettä, sekä Navax-PregMom-ryhmä, joka saa Bacillus-itiosiirtoja sisältävää probioottia sekä nenäsuihkeena että suun kautta annettavana suspensioina. Kaikki osallistujat saavat sairaalan ohjeiden mukaisen standardihoidon, ja ryhmien väliset erot rajoittuvat määrättyihin tutkimushoitoihin.

Nenä-nielusuihketta annetaan kolmen suihkun verran per sierain ja kurkku per annos, kolme kertaa päivässä, ja suun kautta annettava hoito annetaan päivittäisannoksena 5 ml, kahdesti päivässä. Hoidot aloitetaan sairaalajakson aikana ja jatketaan jopa kahden kuukauden ajan sairaalaan oton jälkeen.

Perustelut ja tarve: Lasten keuhkokuumetta edeltää usein ylähengitystieinfektio, ja sen piirteitä ovat patogeenien kolonisaatio sekä tulehdus nenä-/nielun limakalvolla. Näin ollen nenä-kurkun Bacillus-itiosiirtosuihke voi toimia paikallisena lisähoitona ylläpitämään hengitysteiden hygieniaa ja limakalvon palautumista samalla vähentäen mahdollisesti hengitystievirusten ja bakteerien kumppanipatogeenien määrää infektioalueella. Keuhkokuumetta sairastaville sairaalaan otetuille lapsille annetut samanaikaiset hoidot, kuten tukitoimenpiteet ja lääkkeiden (kuten antibioottien) antaminen, voivat häiritä suoliston mikrobistoa ja johtaa ruoansulatuskanavan oireisiin ennen hoitoa tai sen jälkeen. Suun kautta annettava Bacillus-itiosiirtosuspensio odotetaan täydentävän paikallista hoitoa vaikuttaen suoli-immuunirajan kautta, tukien siten systeemistä immunomodulaatiota ja toipumista ylähengitysteiden ulkopuolella.

Ratkaisevasti, suurin osa saatavilla olevista kliinisistä tutkimuksista tutkii probiootteja monoterapiana (esim. pelkästään suun tai nenän kautta), eikä ole riittävästi käsitellyt tuloksia, jotka liittyvät molempien reittien yhdistämiseen samassa hoidossa. Tämän kokeen tarkoitus on suoraan tarkastella hypoteesia, että samanaikaisesti nenän kautta (B. subtilis ANA4 + B. clausii ANA39) ja suun kautta (B. subtilis ANA46 + B. clausii ANA39 + B. coagulans ANA40) annettavien Bacillus-probioottien tarjoamisella on additiivinen vaikutus keuhkokuumetta sairastavilla sairaalaan otetuilla lapsilla. Odotettu mekanismi on, että yhdistetty hoito voi paremmin tukea hoitoa ja uusiutumisen ehkäisyä vähentämällä virusta kuormitusta, bakteerien koinfektiota ja proinflammatorisia sytokiineja samalla parantaen nenän ja suoliston mikrobistoprofiileja.

Kirjallisen tietoisen suostumuksen saamisen jälkeen perustiedot väestötietoihin ja kliiniseen dataan kerätään standardoiduilla kyselylomakkeilla ja sairauskertomuksilla.

Sisäpotilashoidon aikana lääkärit ja sairaanhoitajat seuraavat ja tallentavat päivittäin kliinisiä oireita, mukaan lukien kuume, yskä, tachypnea, rintakehän sisäänveto, korina, rätinä ja ruoansulatuskanavan ilmenemät, sekä sairaalassaoloaikaa ja lääkkeiden, kuten antibioottien, antiviraalisten aineiden ja tukiterapioiden, käyttöä. Nenänielu-, veri- ja ulostenäytteet kerätään ennalta määritetyissä ajanjaksoissa tutkimussuunnitelman mukaisesti (pakolliset päivinä 0 ja 3, valinnaiset päivinä 30 ja 60). Kaikkia näitä näytteitä käsitellään määrittämään tulehdussytokiinit (IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-23, TNF-α) ja IgA ELISA-menetelmällä sekä havaitakseen hengitystievirukset, bakteerien kumppanipatogeenit ja B. subtilis, B. clausii ja B. coagulans reaaliaikaisella PCR:llä. Kerrostetut alinäytteet ulosten ja nenänielunäytteistä (n = 15–20 per ryhmä x 2 ajanjaksoa) käyvät läpi 16S rRNA-geenisekvensoinnin arvioidakseen muutoksia hengitystie- (päivänä 30 vs. päivänä 0) ja suoliston mikrobiston (päivänä 30 vs. päivänä 0) monimuotoisuudessa ja taksonomisessa koostumuksessa. Sairaalasta kotiuttamisen jälkeen lapsia seurataan päivänä 30 ja/tai päivänä 60 poliklinikkakäyntien tai strukturoitujen haastattelujen kautta vanhempien tai hoitajien kanssa dokumentoidakseen hengitystie- tai ruoansulatuskanavan oireiden uusiutumista, uudelleen sairaalaanottoa ja sairaalasta kotiuttamisen jälkeistä lääkekäyttöä. Vanhempia tai hoitajia ohjeistetaan olemaan antamatta muita probioottituotteita (paitsi jugurttia) tai Bacillus-itiosiirtojen nenävalmisteita tutkimusjakson aikana.

Kaikki sairauskertomukset kerätään, skannataan ja tallennetaan sähköiseen muotoon. Potilastiedot järjestelmällisesti organisoidaan tietokantoihin analyysiä varten. Patogeenikuormituksen vähenemistä arvioidaan vertaamalla reaaliaikaisen PCR:n syklikynnysarvoja (Ct) kotiuttamisen tai seurannan aikana perusarvoon käyttäen 2^-ΔCt-menetelmää. Sytokiini- ja IgA-pitoisuuksien muutoksia arvioidaan vertaamalla mediaaniarvoja ennen ja jälkeen hoidon. B. subtilis-, B. clausii- ja B. coagulans -bakteerien esiintymistä näytteissä ilmaistaan käyttäen TaqMan-koemenetelmän Ct-arvoja. Tilastolliset analyysit ja graafiset esitykset suoritetaan käyttäen GraphPad Prism -ohjelmaa (versio 10.2.3), IBM SPSS Statistics -ohjelmaa (versio 27) ja R-ohjelmistoa (versio 4.4.2), kaksisuuntaisella merkitsevyystasolla asetettuna p < 0,05. Satunnaistamista ja kaksoissokkoa sovelletaan vähentämään satunnaisia ja systemaattisia harhoja, ja hoitokohdistuskoodit pidetään salassa datan analyysin valmistumiseen asti, paitsi vakavien haittatapahtumien tapauksissa, jotka edellyttävät hätäpaljastamista.