Оценка роли пробиотиков у детей в возрасте 6-36 месяцев, получающих лечение от пневмонии

Это исследование представляет собой рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое испытание, проводимое в провинциальной больнице акушерства и педиатрии Футхо, для оценки пробиотиков на основе спор Bacillus, доставляемых с помощью назально-орофарингеального спрея (LiveSpo® Navax), с использованием или без использования пероральной пробиотической суспензии (LiveSpo® Preg-Mom) в качестве дополнения к стандартному медицинскому лечению у детей в возрасте от 6 до 36 месяцев, госпитализированных с пневмонией.

Всего 330 подходящих детей будут случайным образом распределены в соотношении 1:1:1 в три группы (n = 110 на группу):

контрольная группа, получающая назально-орофарингеальный спрей с 0,9% хлоридом натрия и перорально воду RO; группа Navax, получающая назально-орофарингеальный спрей с пробиотиком на основе спор Bacillus и перорально воду RO; и группа Navax-PregMom, получающая пробиотики на основе спор Bacillus как в виде назального спрея, так и в виде пероральной суспензии. Все участники получают стандартное лечение в соответствии с больничными протоколами, при этом различия между группами ограничиваются назначенными исследуемыми вмешательствами.

Назально-орофарингеальный спрей вводится в виде трёх впрыскиваний в каждую ноздрю и горло на дозу три раза в день, а пероральное вмешательство вводится в суточной дозе 5 мл два раза в день. Вмешательства начинаются во время госпитализации и продолжаются до двух месяцев с момента поступления.

Обоснование и необходимость: Детская пневмония часто следует за инфекцией верхних дыхательных путей и характеризуется колонизацией патогенов и воспалением в слизистой оболочке носоглотки/ротоглотки. Соответственно, назально-глоточный спрей со спорами Bacillus может служить локальным дополнением для поддержания гигиены дыхательных путей и восстановления слизистой оболочки, потенциально снижая нагрузку респираторных вирусов и бактериальных ко-патогенов в месте инфекции. Сопутствующие вмешательства для госпитализированных детей с пневмонией, включая поддерживающую терапию и введение лекарств (таких как антибиотики), могут нарушить микробиоту кишечника и привести к желудочно-кишечным симптомам до или после лечения. Ожидается, что пероральная суспензия со спорами Bacillus дополнит локальное вмешательство, действуя через кишечно-иммунный интерфейс, тем самым поддерживая системную иммунную модуляцию и восстановление за пределами верхних дыхательных путей.

Крайне важно, что большинство доступных клинических испытаний исследуют пробиотики в качестве монотерапии (например, только перорально или только назально) и недостаточно рассматривают результаты, связанные с комбинированием обоих путей в одном лечении. Цель данного испытания — непосредственно проверить гипотезу о том, что будет наблюдаться аддитивный эффект от одновременного предоставления назальных (B. subtilis ANA4 + B. clausii ANA39) и пероральных (B. subtilis ANA46 + B. clausii ANA39 + B. coagulans ANA40) пробиотиков на основе Bacillus госпитализированным детям с пневмонией. Ожидаемый механизм заключается в том, что комбинированный режим может лучше поддерживать лечение и предотвращение рецидивов за счёт снижения вирусной нагрузки, бактериальной ко-инфекции и провоспалительных цитокинов, одновременно улучшая профили микробиоты носа и кишечника.

После получения письменного информированного согласия базовые демографические и клинические данные собираются с использованием стандартизированных анкет и медицинских записей.

Во время стационарного лечения врачи и медсёстры ежедневно контролируют и регистрируют клинические симптомы, включая лихорадку, кашель, тахипноэ, втяжение грудной клетки, хрипы, крепитацию и желудочно-кишечные проявления, а также длительность пребывания в больнице и использование лекарств, таких как антибиотики, противовирусные средства и поддерживающая терапия. Назофарингеальные, кровь и образцы стула собираются в заранее определённые моменты времени в соответствии с протоколом (обязательно на 0-й и 3-й день, опционально на 30-й и 60-й день). Все эти образцы обрабатываются для количественного определения воспалительных цитокинов (IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-23, TNF-α) и IgA с помощью ELISA, а также для обнаружения респираторных вирусов, бактериальных ко-патогенов, B. subtilis, B. clausii и B. coagulans с помощью ПЦР в реальном времени. Стратифицированные подвыборки образцов стула и назофарингеальных образцов (n = 15–20 на группу × 2 временные точки) подвергаются секвенированию гена 16S рРНК для оценки изменений в разнообразии и таксономическом составе респираторной (на 30-й день по сравнению с 0-м днём) и кишечной микробиоты (на 30-й день по сравнению с 0-м днём). После выписки дети наблюдаются на 30-й и/или 60-й день через амбулаторные визиты или структурированные интервью с родителями или опекунами для документирования рецидива респираторных или желудочно-кишечных симптомов, повторной госпитализации и использования лекарств после выписки. Родителям или опекунам предписывается не давать другие пробиотические продукты (кроме йогурта) или назальные препараты со спорами Bacillus в течение периода исследования.

Все медицинские записи собираются, сканируются и хранятся в электронном формате. Данные пациентов систематически организуются в базы данных для анализа. Снижение патогенной нагрузки оценивается путём сравнения значений порога цикла (Ct) ПЦР в реальном времени при выписке или последующем наблюдении с исходными значениями с использованием метода 2^-ΔCt. Изменения концентраций цитокинов и IgA оцениваются путём сравнения медианных значений до и после вмешательства. Наличие B. subtilis, B. clausii и B. coagulans в образцах выражается с использованием значений Ct из анализов с зондами TaqMan. Статистический анализ и графическое представление выполняются с использованием GraphPad Prism (версия 10.2.3), IBM SPSS Statistics (версия 27) и программного обеспечения R (версия 4.4.2) с двусторонним уровнем значимости, установленным на p < 0,05. Рандомизация и двойное ослепление применяются для минимизации случайной и систематической погрешности, а коды распределения лечения остаются скрытыми до завершения анализа данных, за исключением случаев серьёзных нежелательных явлений, требующих экстренного раскрытия.