Ocena roli probiotyków u dzieci w wieku 6-36 miesięcy leczonych z powodu zapalenia płuc

To badanie to randomizowane, podwójnie ślepa, kontrolowane placebo badanie kliniczne przeprowadzone w Phu Tho Provincial Obstetrics and Pediatrics Hospital w celu oceny probiotyków Bacillus w postaci zarodników dostarczanych przez aerozol do nosa i gardła (LiveSpo® Navax) z lub bez zawiesiny doustnej probiotyków (LiveSpo® Preg-Mom) jako uzupełnienie standardowego leczenia u dzieci w wieku 6-36 miesięcy hospitalizowanych z powodu zapalenia płuc.

Łącznie 330 kwalifikujących się dzieci zostanie losowo przydzielonych w stosunku 1:1:1 do trzech grup (n = 110 na grupę):

grupa kontrolna otrzymująca 0,9% aerozol do nosa i gardła z chlorkiem sodu i doustną wodę RO, grupa Navax otrzymująca probiotyczny aerozol do nosa i gardła z zarodnikami Bacillus i doustną wodę RO oraz grupa Navax-PregMom otrzymująca probiotyki Bacillus zarówno w postaci aerozolu do nosa, jak i zawiesiny doustnej. Wszyscy uczestnicy otrzymują standardowe leczenie zgodnie z wytycznymi szpitala, a różnice między grupami ograniczają się do przypisanych interwencji badawczych.

Aerozol do nosa i gardła podaje się w dawce trzech rozpyleń na nozdrze i gardło, trzy razy dziennie, a interwencję doustną podaje się w dziennej dawce 5 ml, dwa razy dziennie. Interwencje rozpoczynają się podczas hospitalizacji i są kontynuowane przez okres do dwóch miesięcy od przyjęcia.

Uzasadnienie i potrzeba: Zapalenie płuc u dzieci często poprzedza infekcję górnych dróg oddechowych i charakteryzuje się kolonizacją patogenów i stanem zapalnym w błonie śluzowej nosa i gardła. W związku z tym aerozol do nosa i gardła z zarodnikami Bacillus może służyć jako miejscowe uzupełnienie w celu utrzymania higieny dróg oddechowych i odbudowy błony śluzowej, jednocześnie potencjalnie zmniejszając obciążenie wirusami oddechowymi i bakteryjnymi współpatogenami w miejscu infekcji. Jednoczesne interwencje u hospitalizowanych dzieci z zapaleniem płuc, w tym opieka wspomagająca i podawanie leków (takich jak antybiotyki), mogą zaburzać mikroflorę jelitową i prowadzić do objawów żołądkowo-jelitowych przed lub po leczeniu. Oczekuje się, że doustna zawiesina zarodników Bacillus uzupełni interwencję miejscową, działając poprzez interfejs jelitowo-immunologiczny, wspierając w ten sposób ogólnoustrojową modulację immunologiczną i powrót do zdrowia poza górnymi drogami oddechowymi.

Co ważne, większość dostępnych badań klinicznych bada probiotyki jako monoterapię (np. wyłącznie doustną lub donosową) i nie uwzględniała w wystarczającym stopniu wyników związanych z łączeniem obu dróg podania w tym samym leczeniu. Celem tego badania jest bezpośrednie zbadanie hipotezy, że będzie występować efekt addytywny podawania jednocześnie Bacillus donosowo (B. subtilis ANA4 + B. clausii ANA39) i doustnie (B. subtilis ANA46 + B. clausii ANA39 + B. coagulans ANA40) podawanych probiotyków u hospitalizowanych dzieci z zapaleniem płuc. Oczekiwany mechanizm polega na tym, że połączony schemat może lepiej wspierać leczenie i zapobieganie nawrotom poprzez zmniejszenie obciążenia wirusowego, bakteryjnej ko-infekcji i prozapalnych cytokin, jednocześnie poprawiając profile mikroflory nosa i jelit.

Po uzyskaniu pisemnej świadomej zgody, dane demograficzne i kliniczne wyjściowe są zbierane przy użyciu standaryzowanych kwestionariuszy i dokumentacji medycznej.

Podczas leczenia szpitalnego lekarze i pielęgniarki monitorują i rejestrują codzienne objawy kliniczne, w tym gorączkę, kaszel, tachypnoe, wciąganie klatki piersiowej, świszczący oddech, trzeszczenia oraz objawy żołądkowo-jelitowe, a także długość pobytu w szpitalu i stosowanie leków, takich jak antybiotyki, środki przeciwwirusowe i terapie wspomagające. Próbki z nosogardzieli, krwi i kału są pobierane w określonych punktach czasowych zgodnie z protokołem (obowiązkowo w dniu 0 i dniu 3, oraz opcjonalnie w dniu 30 i dniu 60). Wszystkie te próbki są przetwarzane w celu ilościowego oznaczenia cytokin zapalnych (IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-23, TNF-α) i IgA za pomocą testu ELISA oraz wykrycia wirusów oddechowych, bakteryjnych współpatogenów oraz B. subtilis, B. clausii i B. coagulans za pomocą PCR w czasie rzeczywistym. Warstwowe podpróbki kału i próbek z nosogardzieli (n = 15-20 na grupę x 2 punkty czasowe) poddawane są sekwencjonowaniu genu 16S rRNA w celu oceny zmian w różnorodności i składzie taksonomicznym mikroflory oddechowej (w dniu 30 vs. dzień 0) i jelitowej (w dniu 30 vs. dzień 0). Po wypisie dzieci są obserwowane w dniu 30 i/lub dniu 60 poprzez wizyty ambulatoryjne lub ustrukturyzowane wywiady z rodzicami lub opiekunami w celu udokumentowania nawrotu objawów oddechowych lub żołądkowo-jelitowych, ponownej hospitalizacji oraz stosowania leków po wypisie. Rodzice lub opiekunowie są instruowani, aby nie podawać innych produktów probiotycznych (oprócz jogurtu) ani preparatów donosowych z zarodnikami Bacillus w okresie badania.

Wszystkie dokumentacje medyczne są zbierane, skanowane i przechowywane w formie elektronicznej. Dane pacjentów są systematycznie organizowane w bazach danych do analizy. Redukcja obciążenia patogenem jest oceniana poprzez porównanie wartości progowych cyklu (Ct) PCR w czasie rzeczywistym przy wypisie lub w obserwacji z wartościami wyjściowymi przy użyciu metody 2^-ΔCt. Zmiany stężeń cytokin i IgA są oceniane poprzez porównanie wartości median przed i po interwencji. Obecność B. subtilis, B. clausii i B. coagulans w próbkach jest wyrażana przy użyciu wartości Ct z testów z sondą TaqMan. Analizy statystyczne i prezentacje graficzne są wykonywane przy użyciu GraphPad Prism (wersja 10.2.3), IBM SPSS Statistics (wersja 27) oraz oprogramowania R (wersja 4.4.2), z dwustronnym poziomem istotności ustawionym na p < 0,05. Randomizacja i podwójne ślepienie są stosowane w celu minimalizacji losowych i systematycznych błędów, a kody przydziału leczenia pozostają ukryte do zakończenia analizy danych, z wyjątkiem przypadków poważnych zdarzeń niepożądanych wymagających awaryjnego odślepienia.