Valutazione del Ruolo dei Probiotici nei Bambini di Età Compresa tra 6 e 36 Mesi Trattati per Polmonite

Questo studio è uno studio clinico randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo condotto presso l'Ospedale Provinciale di Ostetricia e Pediatria di Phu Tho per valutare i probiotici a base di spore di Bacillus somministrati mediante spray naso-orofaringeo (LiveSpo® Navax) con o senza una sospensione probiotica orale (LiveSpo® Preg-Mom) come adiuvante al trattamento medico standard in bambini di età compresa tra 6 e 36 mesi ospedalizzati per polmonite.

Un totale di 330 bambini idonei saranno assegnati casualmente in un rapporto 1:1:1 in tre gruppi (n = 110 per gruppo):

il gruppo di controllo che riceve spray naso-orofaringeo di cloruro di sodio allo 0,9% e acqua RO orale, il gruppo Navax che riceve spray naso-orofaringeo probiotico a base di spore di Bacillus e acqua RO orale, e il gruppo Navax-PregMom che riceve probiotici a base di spore di Bacillus sia come spray nasale che come sospensione orale. Tutti i partecipanti ricevono il trattamento standard secondo le linee guida ospedaliere, con differenze tra i gruppi limitate agli interventi di studio assegnati.

Lo spray naso-orofaringeo viene somministrato come tre spruzzi per narice e gola per dose, tre volte al giorno, e l'intervento orale viene somministrato a una dose giornaliera di 5 mL, due volte al giorno. Gli interventi vengono avviati durante il ricovero e continuati fino a due mesi dall'ammissione.

Razionale e necessità: La polmonite pediatrica spesso segue un'infezione delle vie aeree superiori ed è caratterizzata dalla colonizzazione di patogeni e dall'infiammazione della mucosa naso-/orofaringea. Di conseguenza, uno spray naso-faringeo a base di spore di Bacillus potrebbe servire come adiuvante locale per mantenere l'igiene delle vie aeree e la restituzione della mucosa, potenzialmente mitigando il carico di virus respiratori e co-patogeni batterici nel sito di infezione. Gli interventi concomitanti per i bambini ospedalizzati con polmonite, comprese le cure di supporto e la somministrazione di farmaci (come antibiotici), potrebbero perturbare il microbiota intestinale e portare a sintomi gastrointestinali prima o dopo il trattamento. Si prevede che una sospensione orale di spore di Bacillus integri l'intervento locale agendo attraverso l'interfaccia intestino-immunitario, supportando così la modulazione immunitaria sistemica e il recupero al di là delle vie aeree superiori.

È cruciale notare che la maggior parte degli studi clinici disponibili esamina i probiotici come monoterapia (ad esempio, solo per via orale o nasale) e non ha affrontato adeguatamente i risultati relativi alla combinazione di entrambe le vie nello stesso trattamento. Lo scopo di questo studio è esaminare direttamente l'ipotesi che ci sarà un effetto additivo nel fornire contemporaneamente Bacillus per via nasale (B. subtilis ANA4 + B. clausii ANA39) e per via orale (B. subtilis ANA46 + B. clausii ANA39 + B. coagulans ANA40) come probiotici in bambini ospedalizzati con polmonite. Il meccanismo atteso è che il regime combinato possa supportare meglio il trattamento e la prevenzione delle recidive riducendo il carico virale, la co-infezione batterica e le citochine pro-infiammatorie, migliorando al contempo i profili del microbiota nasale e intestinale.

Dopo aver ottenuto il consenso informato scritto, i dati demografici e clinici basali vengono raccolti utilizzando questionari standardizzati e cartelle cliniche.

Durante il trattamento ospedaliero, medici e infermieri monitorano e registrano quotidianamente i sintomi clinici, tra cui febbre, tosse, tachipnea, rientramenti toracici, sibili, crepitii e manifestazioni gastrointestinali, nonché la durata della degenza ospedaliera e l'uso di farmaci come antibiotici, agenti antivirali e terapie di supporto. Campioni nasofaringei, di sangue e di feci vengono raccolti in momenti predeterminati secondo il protocollo (obbligatori al giorno 0 e al giorno 3, e opzionali al giorno 30 e al giorno 60). Tutti questi campioni vengono processati per quantificare le citochine infiammatorie (IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-23, TNF-α) e l'IgA utilizzando ELISA, e per rilevare virus respiratori, co-patogeni batterici, e B. subtilis, B. clausii e B. coagulans mediante PCR in tempo reale. Sottocampioni stratificati di feci e campioni nasofaringei (n = 15-20 per gruppo x 2 momenti) vengono sottoposti a sequenziamento del gene 16S rRNA per valutare i cambiamenti nella diversità e nella composizione tassonomica del microbiota respiratorio (al giorno 30 vs. giorno 0) e intestinale (al giorno 30 vs. giorno 0). Dopo la dimissione, i bambini vengono seguiti al giorno 30 e/o al giorno 60 attraverso visite ambulatoriali o interviste strutturate con i genitori o i caregiver per documentare la recidiva di sintomi respiratori o gastrointestinali, il ricovero e l'uso di farmaci post-dimissione. Ai genitori o ai caregiver viene istruito di non somministrare altri prodotti probiotici (eccetto lo yogurt) o preparati nasali a base di spore di Bacillus durante il periodo di studio.

Tutte le cartelle cliniche vengono raccolte, scansionate e archiviate in formato elettronico. I dati dei pazienti vengono organizzati sistematicamente in database per l'analisi. La riduzione del carico patogeno viene valutata confrontando i valori di soglia del ciclo (Ct) della PCR in tempo reale alla dimissione o al follow-up con i valori basali utilizzando il metodo 2^-ΔCt. I cambiamenti nelle concentrazioni di citochine e IgA vengono valutati confrontando i valori mediani prima e dopo l'intervento. La presenza di B. subtilis, B. clausii e B. coagulans nei campioni viene espressa utilizzando i valori Ct da saggi con sonda TaqMan. Le analisi statistiche e le presentazioni grafiche vengono eseguite utilizzando GraphPad Prism (versione 10.2.3), IBM SPSS Statistics (versione 27) e software R (versione 4.4.2), con un livello di significatività a due code impostato a p < 0,05. La randomizzazione e il doppio cieco vengono applicati per minimizzare i bias casuali e sistematici, e i codici di assegnazione del trattamento rimangono nascosti fino al completamento dell'analisi dei dati, tranne nei casi di eventi avversi gravi che richiedono l'emergente svelamento del cieco.