Spironolaktoni ja XPB-1:n eheys TFIIH-kompleksissa (SPIRIT-XPB)

Yksityiskohtainen kuvaus

Tämä tutkimus on selvittävä, interventiivinen kliininen tutkimus, joka on suunniteltu kuvaamaan spironolaktonin biologisia ja farmakokineettisiä vaikutuksia aikuisilla osallistujilla, erityisesti keskittyen sen kykyyn aiheuttaa XPB (ERCC3) -proteiinin proteolyyttistä hajoamista ja sen mahdollisiin seurauksiin HIV-pysyvyydelle.

Tieteellinen perustelu

Transkriptiotekijä IIH (TFIIH) -kompleksilla on keskeinen rooli RNA-polymeraasi II:n välittämässä transkription aloituksessa ja nukleotidipoistokorjauksessa. XPB (ERCC3), ATP-riippuvainen 3'-5' DNA-helicaasi ja TFIIH:n ydinosa, on välttämätön DNA:n avautumiselle transkription aikana ja se on myös tarpeen useiden virusten, mukaan lukien HIV:n, tehokkaalle replikaatiolle. Kliinistä edeltävät tutkimukset ovat osoittaneet, että spironolaktoni ja sen aktiiviset metaboliitit aiheuttavat nopean, palautuvan proteasomin hajoamisen XPB:lle aiheuttamatta yleistynyttä sytotoksisuutta tai heikentämällä solujen elinkelpoisuutta.

HIV-infektion malleissa on osoitettu, että XPB:n vähentäminen estää Tat-riippuvaista virustranskriptiota, tukahduttaa viruksen replikaatiota ja estää latenttien provirusten reaktivaatiota CD4+ T-soluissa. Nämä havainnot viittaavat siihen, että XPB:n farmakologinen kohdentaminen voi edustaa uutta isäntäsuuntautunutta strategiaa HIV-transkription tukahduttamiseksi ja viruksen latenssin vakauttamiseksi, mikä on linjassa "estä ja lukitse" -lähestymistavan kanssa HIV-parantumistutkimuksessa. XPB:n hajoamisen kliininen toistettavuus ja sen suhde systemaattiseen lääkealtistukseen ihmisillä eivät kuitenkaan ole riittävästi karakterisoitu.

Tutkimuksen suunnittelu

Osallistujat saavat suun kautta annettavaa spironolaktonia kerran päivässä käyttäen askelittaista annoksen nostostrategiaa, joka perustuu yksilölliseen siedettävyyteen. Interventiojaksoa seuraa hoidon jälkeinen tarkkailuvaihe biologisten vaikutusten palautuvuuden ja turvallisuusparametrien arvioimiseksi. Annoksen säätöjä, väliaikaisia keskeytyksiä tai tutkimuslääkkeen lopettamista sallitaan ennalta määritettyjen turvallisuuskriteerien mukaisesti.

Tutkimukseen kuuluu sekä HIV-negatiivisia henkilöitä että HIV:ää sairastavia henkilöitä, jotka saavat tukahduttavaa antiretroviraalista hoitoa pysyvällä plasman virustukahduksella. Tämä suunnittelu mahdollistaa XPB:n hajoamisen arvioinnin ilman virustartuntaa sekä alavirran vaikutusten arvioinnin viruksen pysyvyyteen HIV:ää sairastavilla henkilöillä.

Farmakokineettiset ja farmakodynaamiset arvioinnit

Systemaattinen altistus spironolaktonille ja sen pääasiallisille metaboliiteille, mukaan lukien kanrenoni ja tiometyylatut johdannaiset, kvantifioidaan validoitujen nestekromatografia-tandem-massaspektrometria -menetelmien avulla. Farmakokineettiset parametrit johdetaan karakterisoimaan lääkkeen imeytymistä, aineenvaihduntaa ja poistumista annoksen nosto- ja tasapainotiloissa.

Farmakodynaamisia vaikutuksia arvioidaan mittaamalla XPB-proteiinitasot eristetyissä CD4+ T-soluissa, jotka on saatu perifeerisistä verinäytteistä. XPB:n hajoamisprofiilit korreloidaan spironolaktonin ja sen metaboliittien kiertävien pitoisuuksien kanssa altistus-vaste -suhteiden tutkimiseksi.

HIV-reservuaarin arviointi

HIV:ää sairastavilla osallistujilla spironolaktonialtistuksen vaikutusta viruksen pysyvyyteen arvioidaan käyttäen täydentäviä molekyylibiologisia ja funktionaalisia testejä. Näihin kuuluu solujen yhteydessä olevan HIV-DNA:n ja -RNA:n kvantifiointi tartunnan saaneiden solujen taajuuden ja transkriptioaktiivisuuden merkkeinä sekä replikaatiokyvyn omaavan viruksen funktionaalinen arviointi käyttäen viruksen kasvatusmenetelmiä. Näiden analyysien tavoitteena on määrittää, onko XPB:n hajoaminen yhteydessä latentin HIV-reservuaarin koon tai transkriptioaktiivisuuden säätelyyn.

Turvallisuuden seuranta

Turvallisuusarviointeihin kuuluu säännölliset kliiniset arvioinnit, elintoimintojen mittaukset, laboratoriotestit erityisesti kiinnittäen huomiota elektrolyyttitasapainoon, munuais- ja maksatoimintaan sekä elektrokardiografinen seuranta. Haittatapahtumat luokitellaan ja hoidetaan ennalta määritettyjen kriteerien mukaisesti, ja osallistujan turvallisuutta tarkastellaan jatkuvasti koko tutkimuksen ajan.

Selvittävät tavoitteet

Selvittävissä analyyseissä tarkastellaan suhteita lääkealtistuksen, XPB:n hajoamisen ja virologisten parametrien välillä sekä havaittujen biologisten vaikutusten palautuvuutta hoidon lopettamisen jälkeen. Tämän tutkimuksen tulosten on tarkoitus ohjata myöhempien kliinisten tutkimusten suunnittelua, jotka arvioivat spironolaktonia tai siihen liittyviä yhdisteitä isäntäsuuntautuneina aineina HIV-parantumisstrategioiden sisällä.