Спиронолактон и целостность XPB-1 в комплексе TFIIH (SPIRIT-XPB)

Подробное описание

Данное исследование представляет собой разведочное интервенционное клиническое исследование, предназначенное для характеристики биологических и фармакокинетических эффектов спиронолактона у взрослых участников, с особым акцентом на его способность индуцировать протеолитическую деградацию белка XPB (ERCC3) и его потенциальные последствия для персистенции ВИЧ.

Научное обоснование

Транскрипционный фактор IIH (TFIIH) играет центральную роль в инициации транскрипции, опосредованной РНК-полимеразой II, и в эксцизионной репарации нуклеотидов. XPB (ERCC3), АТФ-зависимая 3'-5' ДНК-хеликаза и основная субъединица TFIIH, необходима для расплетания ДНК во время транскрипции, а также требуется для эффективной репликации нескольких вирусов, включая ВИЧ. Доклинические исследования продемонстрировали, что спиронолактон и его активные метаболиты индуцируют быструю, обратимую протеасомную деградацию XPB, не вызывая генерализованной цитотоксичности или нарушения жизнеспособности клеток.

В моделях ВИЧ-инфекции было показано, что истощение XPB ингибирует Tat-зависимую вирусную транскрипцию, подавляет вирусную репликацию и предотвращает реактивацию латентных провирусов в CD4+ Т-клетках. Эти данные позволяют предположить, что фармакологическое воздействие на XPB может представлять собой новую стратегию, направленную на хозяина, для подавления транскрипции ВИЧ и стабилизации вирусной латентности, что согласуется с подходом «блокировки и запирания» в исследованиях по излечению ВИЧ. Однако клиническая воспроизводимость деградации XPB и её связь с системной экспозицией препарата у людей остаются недостаточно охарактеризованными.

Дизайн исследования

Участники будут получать пероральный спиронолактон один раз в день с использованием ступенчатой стратегии повышения дозы на основе индивидуальной переносимости. Период вмешательства будет сопровождаться фазой постлечебного наблюдения для оценки обратимости биологических эффектов и параметров безопасности. Корректировка дозы, временное прерывание или прекращение приёма исследуемого препарата будут разрешены в соответствии с предопределёнными критериями безопасности.

Исследование включает как ВИЧ-отрицательных лиц, так и людей, живущих с ВИЧ, получающих супрессивную антиретровирусную терапию с устойчивой супрессией плазменной вирусной нагрузки. Такой дизайн позволяет оценить деградацию XPB в отсутствие вирусной инфекции, а также оценить последующие эффекты на вирусную персистенцию у лиц, живущих с ВИЧ.

Фармакокинетические и фармакодинамические оценки

Системная экспозиция спиронолактону и его основным метаболитам, включая канренон и тиометилированные производные, будет количественно определена с использованием валидированных методов жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией. Будут рассчитаны фармакокинетические параметры для характеристики абсорбции, метаболизма и элиминации препарата в условиях повышения дозы и стационарного состояния.

Фармакодинамические эффекты будут оценены путём измерения уровней белка XPB в выделенных CD4+ Т-клетках, полученных из образцов периферической крови. Профили деградации XPB будут соотнесены с циркулирующими концентрациями спиронолактона и его метаболитов для изучения зависимостей «экспозиция-ответ».

Оценка резервуара ВИЧ

У участников, живущих с ВИЧ, влияние экспозиции спиронолактона на вирусную персистенцию будет оценено с использованием дополнительных молекулярных и функциональных методов. К ним относятся количественное определение клеточно-ассоциированной ДНК и РНК ВИЧ в качестве маркеров частоты инфицированных клеток и транскрипционной активности, а также функциональная оценка репликационно-компетентного вируса с использованием методологий вирусного роста. Эти анализы направлены на определение, связана ли деградация XPB с модуляцией размера или транскрипционной активности латентного резервуара ВИЧ.

Мониторинг безопасности

Оценка безопасности будет включать регулярные клинические обследования, показатели жизненно важных функций, лабораторные исследования с особым вниманием к балансу электролитов, функции почек и печени, а также электрокардиографический мониторинг. Нежелательные явления будут классифицированы и управляемы в соответствии с предопределёнными критериями, а безопасность участников будет постоянно пересматриваться на протяжении всего исследования.

Разведочные цели

Разведочные анализы изучат взаимосвязи между экспозицией препарата, деградацией XPB и вирусологическими параметрами, а также обратимость наблюдаемых биологических эффектов после прекращения лечения. Результаты данного исследования предназначены для информирования о дизайне последующих клинических исследований, оценивающих спиронолактон или родственные соединения в качестве агентов, направленных на хозяина, в рамках стратегий излечения ВИЧ.