Spironolakton i integralność XPB-1 w kompleksie TFIIH (SPIRIT-XPB)

Szczegółowy opis

Niniejsze badanie jest eksploracyjnym, interwencyjnym badaniem klinicznym zaprojektowanym w celu scharakteryzowania biologicznych i farmakokinetycznych efektów spironolaktonu u dorosłych uczestników, ze szczególnym uwzględnieniem jego zdolności do indukowania proteolitycznej degradacji białka XPB (ERCC3) oraz jego potencjalnych implikacji dla utrzymywania się HIV.

Uzasadnienie naukowe

Kompleks czynnika transkrypcyjnego IIH (TFIIH) odgrywa kluczową rolę w inicjacji transkrypcji mediowanej przez polimerazę RNA II oraz w naprawie przez wycinanie nukleotydów. XPB (ERCC3), ATP-zależna helikaza DNA 3'-5' i rdzeniowa podjednostka TFIIH, jest niezbędna do rozwijania DNA podczas transkrypcji, a także jest wymagana do efektywnej replikacji kilku wirusów, w tym HIV. Badania przedkliniczne wykazały, że spironolakton i jego aktywne metabolity indukują szybką, odwracalną proteasomalną degradację XPB bez powodowania uogólnionej cytotoksyczności lub upośledzania żywotności komórek.

W modelach zakażenia HIV wykazano, że wyczerpanie XPB hamuje zależną od Tat transkrypcję wirusa, tłumi replikację wirusa i zapobiega reaktywacji latentnych prowirusów w komórkach CD4+ T. Te odkrycia sugerują, że farmakologiczne ukierunkowanie na XPB może stanowić nową strategię skierowaną na gospodarza w celu tłumienia transkrypcji HIV i stabilizacji latencji wirusa, zgodnie z podejściem "blokuj i zablokuj" w badaniach nad wyleczeniem HIV. Jednakże kliniczna powtarzalność degradacji XPB i jej związek z ogólnoustrojową ekspozycją na lek u ludzi pozostają niewystarczająco scharakteryzowane.

Projekt badania

Uczestnicy będą otrzymywać spironolakton doustnie raz dziennie, stosując strategię stopniowego zwiększania dawki w oparciu o indywidualną tolerancję. Okres interwencji będzie poprzedzony fazą obserwacji po leczeniu w celu oceny odwracalności efektów biologicznych i parametrów bezpieczeństwa. Dostosowania dawki, tymczasowe przerwy lub przerwanie podawania badanego leku będą dozwolone zgodnie z wcześniej ustalonymi kryteriami bezpieczeństwa.

Badanie obejmuje zarówno osoby HIV-ujemne, jak i osoby żyjące z HIV otrzymujące supresyjną terapię antyretrowirusową z utrzymującą się supresją wiremii w osoczu. Ten projekt pozwala na ocenę degradacji XPB w przypadku braku infekcji wirusowej, a także na ocenę skutków dla utrzymywania się wirusa u osób żyjących z HIV.

Oceny farmakokinetyczne i farmakodynamiczne

Ogólnoustrojowa ekspozycja na spironolakton i jego główne metabolity, w tym kanrenon i pochodne tiometylowe, będzie ilościowo oznaczana przy użyciu zwalidowanych metod chromatografii cieczowej sprzężonej ze spektrometrią mas. Parametry farmakokinetyczne zostaną wyprowadzone w celu scharakteryzowania wchłaniania, metabolizmu i eliminacji leku podczas eskalacji dawki i w warunkach stanu ustalonego.

Efekty farmakodynamiczne będą oceniane poprzez pomiar poziomów białka XPB w wyizolowanych komórkach CD4+ T pobranych z próbek krwi obwodowej. Profile degradacji XPB będą korelowane z krążącymi stężeniami spironolaktonu i jego metabolitów w celu zbadania zależności między ekspozycją a odpowiedzią.

Ocena rezerwuaru HIV

U uczestników żyjących z HIV wpływ ekspozycji na spironolakton na utrzymywanie się wirusa będzie oceniany przy użyciu komplementarnych testów molekularnych i funkcjonalnych. Obejmują one ilościowe oznaczanie DNA i RNA HIV związanego z komórkami jako markerów częstotliwości zakażonych komórek i aktywności transkrypcyjnej, a także funkcjonalną ocenę wirusa zdolnego do replikacji przy użyciu metodologii wzrostu wirusa. Analizy te mają na celu ustalenie, czy degradacja XPB jest związana z modulacją wielkości lub aktywności transkrypcyjnej latentnego rezerwuaru HIV.

Monitorowanie bezpieczeństwa

Oceny bezpieczeństwa będą obejmować regularne badania kliniczne, parametry życiowe, badania laboratoryjne ze szczególnym uwzględnieniem równowagi elektrolitowej, funkcji nerek i wątroby oraz monitorowanie elektrokardiograficzne. Zdarzenia niepożądane będą klasyfikowane i zarządzane zgodnie z wcześniej ustalonymi kryteriami, a bezpieczeństwo uczestników będzie stale monitorowane w trakcie badania.

Cele eksploracyjne

Analizy eksploracyjne będą badać zależności między ekspozycją na lek, degradacją XPB i parametrami wirusologicznymi, a także odwracalność zaobserwowanych efektów biologicznych po zaprzestaniu leczenia. Wyniki tego badania mają na celu dostarczenie informacji do projektowania kolejnych badań klinicznych oceniających spironolakton lub pokrewne związki jako środki skierowane na gospodarza w strategiach leczenia HIV.