Spironolakton a integrita XPB-1 v komplexu TFIIH (SPIRIT-XPB)

Podrobný popis

Tato studie je průzkumné intervenční klinické vyšetření navržené k charakterizaci biologických a farmakokinetických účinků spironolaktonu u dospělých účastníků, se zvláštním zaměřením na jeho schopnost indukovat proteolytickou degradaci proteinu XPB (ERCC3) a jeho potenciální důsledky pro perzistenci HIV.

Vědecké zdůvodnění

Transkripční faktor IIH (TFIIH) komplex hraje klíčovou roli při iniciaci transkripce zprostředkované RNA polymerázou II a opravě vyštěpením nukleotidu. XPB (ERCC3), ATP-dependentní 3'-5' DNA helikáza a jádrová podjednotka TFIIH, je nezbytná pro rozvinutí DNA během transkripce a je také vyžadována pro efektivní replikaci několika virů, včetně HIV. Preklinické studie prokázaly, že spironolakton a jeho aktivní metabolity indukují rychlou, reverzibilní proteasomální degradaci XPB, aniž by způsobovaly generalizovanou cytotoxicitu nebo narušovaly buněčnou životaschopnost.

V modelech infekce HIV bylo prokázáno, že deplece XPB inhibuje Tat-dependentní virovou transkripci, potlačuje virovou replikaci a zabraňuje reaktivaci latentních provirů v CD4+ T buňkách. Tato zjištění naznačují, že farmakologické zaměření na XPB může představovat novou strategii zaměřenou na hostitele k potlačení transkripce HIV a stabilizaci virové latence, což je v souladu s přístupem "block-and-lock" ve výzkumu léčby HIV. Klinická reprodukovatelnost degradace XPB a její vztah se systémovou expozicí léku u lidí však zůstávají nedostatečně charakterizovány.

Design studie

Účastníci budou dostávat perorální spironolakton podávaný jednou denně pomocí postupné strategie eskalace dávky na základě individuální tolerance. Intervenční období bude následovat po léčebná pozorovací fáze k posouzení reverzibility biologických účinků a bezpečnostních parametrů. Úpravy dávky, dočasné přerušení nebo ukončení podávání studijního léku budou povoleny podle předem stanovených bezpečnostních kritérií.

Studie zahrnuje jak jedince HIV-negativní, tak osoby žijící s HIV, které dostávají supresivní antiretrovirovou terapii s trvalou supresí plazmatické virové zátěže. Tento design umožňuje vyhodnocení degradace XPB v nepřítomnosti virové infekce, stejně jako posouzení následných účinků na virovou perzistenci u jedinců žijících s HIV.

Farmakokinetická a farmakodynamická hodnocení

Systémová expozice spironolaktonu a jeho hlavním metabolitům, včetně kanrenonu a thiomethylovaných derivátů, bude kvantifikována pomocí validovaných metod kapalinové chromatografie-tandemové hmotnostní spektrometrie. Farmakokinetické parametry budou odvozeny k charakterizaci absorpce, metabolismu a eliminace léku během eskalace dávky a za podmínek ustáleného stavu.

Farmakodynamické účinky budou hodnoceny měřením hladin proteinu XPB v izolovaných CD4+ T buňkách získaných z periferních vzorků krve. Profily degradace XPB budou korelovány s cirkulujícími koncentracemi spironolaktonu a jeho metabolitů, aby se prozkoumaly vztahy mezi expozicí a odpovědí.

Hodnocení rezervoáru HIV

U účastníků žijících s HIV bude dopad expozice spironolaktonu na virovou perzistenci vyhodnocen pomocí doplňkových molekulárních a funkčních testů. Ty zahrnují kvantifikaci buněčně asociované DNA a RNA HIV jako markerů frekvence infikovaných buněk a transkripční aktivity, stejně jako funkční hodnocení replikačně kompetentního viru pomocí metodik virového růstu. Tyto analýzy mají za cíl určit, zda je degradace XPB spojena s modulací velikosti nebo transkripční aktivity latentního rezervoáru HIV.

Monitorování bezpečnosti

Bezpečnostní hodnocení budou zahrnovat pravidelné klinické vyšetření, vitální funkce, laboratorní testování se zvláštní pozorností věnovanou rovnováze elektrolytů, renální a jaterní funkci a elektrokardiografickému monitorování. Nežádoucí příhody budou klasifikovány a řízeny podle předem stanovených kritérií a bezpečnost účastníků bude po celou dobu studie kontinuálně přezkoumávána.

Průzkumné cíle

Průzkumné analýzy prozkoumají vztahy mezi expozicí léku, degradací XPB a virologickými parametry, stejně jako reverzibilitu pozorovaných biologických účinků po ukončení léčby. Výsledky této studie mají sloužit k informování o designu následných klinických vyšetření hodnotících spironolakton nebo příbuzné sloučeniny jako látky zaměřené na hostitele v rámci strategií léčby HIV.