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L'identification et la standardisation d'une méthode qui permettrait l'étude du profil métabolique du blastocèle jette les bases de l'évaluation du profil métabolomique du blastocyste et de sa relation avec la morphologie embryonnaire et l'implantation embryonnaire

8 février 2021 mis à jour par: Palini Simone, Cervesi Hospital, Cattolica, Italy

Alors que le nombre de cycles de procréation assistée augmente dans le monde, l'introduction d'améliorations technologiques réelles dans la capacité d'identifier rapidement et de manière non invasive les meilleurs embryons à transférer représente toujours un objectif essentiel pour la médecine de la reproduction. En effet, l'évaluation des embryons se fait actuellement par l'analyse de la morphologie et du taux de clivage. Des études récentes ont cherché à identifier une corrélation entre les profils qualitatifs-quantitatifs de petites molécules d'intérêt métabolique et le résultat du transfert d'embryons. Certaines de ces molécules semblent les mieux adaptées à cette fin, notamment les taux de glucose, de lactate, de pyruvate ou d'acides aminés. Des approches reposant à la fois sur la spectroscopie optique et non optique ont été proposées pour surveiller de manière non invasive les milieux de culture d'embryons. Cependant, l'approche non invasive n'offre qu'une stratégie indirecte pour surveiller les embryons et une solution de retournement pour contourner les limites de détection de ces techniques analytiques. Dans cet article, les chercheurs ouvrent la voie à une évaluation directe des embryons grâce à l'analyse basée sur la spectrométrie de masse du liquide blastocèle, qui est retiré de la cavité blastocèle avant le cryostockage des blastocystes. Les chercheurs montrent comment il est possible de détecter la plupart des métabolites d'intérêt déjà documentés au cœur même du blastocyste, sans perturber le flux de travail d'un pipeline de laboratoire classique.

Aperçu de l'étude

Statut

Recrutement

Les conditions

Fluide blastocèle

Type d'étude

Observationnel

Inscription (Anticipé)

100

Contacts et emplacements

Cette section fournit les coordonnées de ceux qui mènent l'étude et des informations sur le lieu où cette étude est menée.

Coordonnées de l'étude

Nom: Simone Palini, biology
Numéro de téléphone: +39 339 4572101
E-mail: simonepalini@yahoo.it

Sauvegarde des contacts de l'étude

Nom: Silvia De Stefani, Biotecnology
Numéro de téléphone: +39 320 1111937
E-mail: silvia.destefani83@libero.it

Lieux d'étude

Italie
- Rimini
  - Cattolica, Rimini, Italie, 47841
    - Recrutement
    - Cervesi Hospital
    - Contact:
      
      Simone Palini, biology
      
      Numéro de téléphone: +39 339 4572101
      
      E-mail: simonepalini@yahoo.it
    - Contact:
      
      Silvia De Stefani, Biotecnology
      
      Numéro de téléphone: +39 320 1111937
      
      E-mail: silvia.destefani83@libero.it

Critères de participation

Les chercheurs recherchent des personnes qui correspondent à une certaine description, appelée critères d'éligibilité. Certains exemples de ces critères sont l'état de santé général d'une personne ou des traitements antérieurs.

Critère d'éligibilité

Âges éligibles pour étudier

18 ans à 45 ans (Adulte)

Accepte les volontaires sains

Non

Sexes éligibles pour l'étude

Femelle

Méthode d'échantillonnage

Échantillon de probabilité

Population étudiée

Toutes les patientes qui ne peuvent pas être soumises à un transfert d'embryon en raison de son hyperstimulation ovarienne. Dans ces cas, les embryons seront vitrifiés et au cours de cette procédure, nous effondrerons le blastocyste en aspirant le liquide.

La description

Critère d'intégration:

Maladie d'hyperstimulation ovarienne
Formation de blastocystes

Plan d'étude

Cette section fournit des détails sur le plan d'étude, y compris la façon dont l'étude est conçue et ce que l'étude mesure.

Comment l'étude est-elle conçue ?

Détails de conception

Nombre de groupes / cohortes

Cohortes et interventions

Groupe / Cohorte
Hyper1 Seuls les patients ayant atteint une pathologie d'hyperstimulation après administration externe de gonadotrophine pendant le traitement de FIV

Que mesure l'étude ?

Principaux critères de jugement

Mesure des résultats	Description de la mesure	Délai
standardiser la méthode d'aspiration Délai: 2 mois	La méthode de micro-perforation du blastocyste et d'aspiration du liquide du blastocèle est également conforme à la dernière littérature sur la vitrification du blastocyste. En bref, les blastocystes expansés du jour 5 ont été retirés de la culture et transférés dans une gouttelette de 30 nl de tampon Hepes préchauffé. Une pipette d'injection a été introduite en évitant les contaminations à travers le trophectoderme, et le liquide du blastocèle a été aspiré jusqu'à ce que le blastocyste se soit complètement effondré autour de la pipette. Les fluides récupérés ont été expulsés dans de nouvelles gouttes d'eau purifiée et congelés à -80°C avec des gouttelettes témoins de 0,5 nl d'eau purifiée.	2 mois
détection des métabolites Délai: 6 mois	détection des métabolites par chromatographie liquide haute performance (HPLC) à résolution rapide (RR-RP)-spectrométrie de masse (MS). À partir de volumes d'échantillons aussi faibles que 0,5 nl, nous avons pu détecter et quantifier par rapport à des normes externes un groupe de métabolites, dont les rôles dans le développement des blastocystes et le métabolisme de l'embryon ont longtemps été postulés. La liste comprenait i) ATP adénosine triphosphate ; ii) glucose-6-phosphate; iii) lactate ; iv) NAD+ nicotinamide-adénine dinucléotide+ et v) NADH et vi) NADPH nicotinamide-adénine dinucléotide phosphate; vii) acide 6-phosphogluconique; viii) acide glutamique et ix) α-cétoglutarate.	6 mois

Mesures de résultats secondaires

Mesure des résultats	Description de la mesure	Délai
analyse de la corrélation entre la morphologie du blastocyste et le profil métabolique dans le liquide blastocèle Délai: 1 an	blastocyst classent selon des critères morphologiques dans l'ouvrage "Atlas of Human Blastocyst" de L. Veeck et associent, à chaque classe morphologique un profil métabolique caractéristique, afin de valider scientifiquement les critères observationnels et objectifs jusqu'à présent utilisés dans notre laboratoire	1 an

Collaborateurs et enquêteurs

C'est ici que vous trouverez les personnes et les organisations impliquées dans cette étude.

Parrainer

Cervesi Hospital, Cattolica, Italy

Collaborateurs

Istituto Clinico Humanitas

Università degli Studi La Tuscia

Tecnobios Riproduzione

Les enquêteurs

Directeur d'études: Simone Palini, biology, Cervesi Hospital, Cattolica, Italy

Dates d'enregistrement des études

Ces dates suivent la progression des dossiers d'étude et des soumissions de résultats sommaires à ClinicalTrials.gov. Les dossiers d'étude et les résultats rapportés sont examinés par la Bibliothèque nationale de médecine (NLM) pour s'assurer qu'ils répondent à des normes de contrôle de qualité spécifiques avant d'être publiés sur le site Web public.

Dates principales de l'étude

Début de l'étude

1 septembre 2011

Achèvement primaire (Anticipé)

1 janvier 2022

Achèvement de l'étude (Anticipé)

1 décembre 2023

Dates d'inscription aux études

Première soumission

29 août 2011

Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité

31 août 2011

Première publication (Estimation)