Profil protéomique de l'incontinence urinaire d'effort chez la femme : une étude pilote
Objectif : L'objectif principal de l'étude est la comparaison des concentrations de protéines entre les patients souffrant d'incontinence urinaire d'effort (IUE) et les témoins sains.
Objectif : Cette étude pilote vise à déterminer un éventuel profil protéique altéré chez les femmes souffrant d'IUE, par rapport aux femmes en bonne santé et donc à discriminer un biomarqueur protéique potentiel de l'IUE.
Principal critère de jugement : mesure par spectrométrie de masse du sécrétome protéomique urinaire chez les sujets malades et sains (couverture de séquence et nombre de protéines identifiées)
Conception de l'essai : étude prospective cas-témoins
Cadre : Département de gynécologie et d'obstétrique de l'Université de médecine de Vienne en coopération avec les installations principales de protéomique de l'Université de médecine de Vienne
Population : Vingt patientes atteintes d'IUE et vingt patientes en bonne santé qui fréquentent la clinique externe du Département d'obstétrique et de gynécologie de l'Université de médecine de Vienne (calcul de la taille de l'échantillon FDR 0,05, puissance de 80 %, proportion supposée de vrai H0 0,95, effet standardisé supposé taille de 1)
Méthodes : Examens à réaliser : histoire du patient, test d'effort provocateur, questionnaire court ICIQ, volume d'urine résiduelle (échographie) et analyse d'urine (test à la bandelette réactive). Un échantillon d'urine est prélevé sur le patient après une miction spontanée, auquel un inhibiteur de protéase sera immédiatement ajouté. Deux flacons de sang sérique (chacun de 9 ml) sont prélevés dans une veine périphérique du patient pour un laboratoire de routine et d'autres recherches.
L'analyse protéomique sera effectuée par séparation chromatographique (LC) avec détection par spectrométrie de masse (MS).
Aperçu de l'étude
Statut
Les conditions
Intervention / Traitement
Description détaillée
Méthodes :
La préparation et l'analyse des échantillons comprendront :
- Prélèvement d'échantillon et ajout immédiat d'un cocktail d'inhibiteurs de protéase (Roche, Complete Protease Inhibitor Cocktail).
- Centrifugation et filtration de l'urine pour l'élimination des débris cellulaires.
- Précipitation des protéines en appliquant une séparation méthanol/chloroforme pour l'élimination de toutes les substances non protéiques possibles.
- Digestion des protéines appliquant de la trypsine, de la pepsine et du Glu-C en solution.
Séparation de peptides par nano HPLC et différentes approches chromatographiques.
- Séparation en phase inverse (RP) des peptides et détection MS
- Séparation des peptides par HILIC (hydrophilic Interaction Liquid Chromatography) pour la discrimination des peptides polaires.
- En plus du RP et du HILIC directement couplés au MS, les peptides digérés seront séparés à l'aide d'approches multidimensionnelles. Des colonnes échangeuses d'anions faibles fonctionnant dans des conditions HILIC seront utilisées pour séparer les peptides portant des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation ou l'acétylation, augmentant ainsi la plage dynamique de détection. Lors de cette séparation, des fractions seront collectées et réinjectées sur le RP et HILIC avec détection MS.
- Toutes les séparations nano HPLC seront effectuées à l'aide d'un système de séparation biocompatible.
L'analyse par spectrométrie de masse des peptides digérés sera effectuée à l'aide de deux méthodes de détection différentes : le piège à ions et la MS à temps de vol (qToF). La détection et l'analyse par spectrométrie de masse qToF seront également utilisées pour la quantification sans étiquette des peptides et des protéines détectés dans les échantillons. Toutes les mesures seront effectuées en triple pour fournir des corrections pour la variabilité technique de la séparation et de l'ionisation.
La recherche générale dans la base de données sera effectuée à l'aide de la base de données Human SwissProt dans sa version actuelle au moment de l'analyse. La recherche de données sera effectuée à l'aide de Mascot (http://www.matrixscience.com/) et X!Tandem (http://www.thegpm.org/tandem/) machines de recherche, et l'attribution et le filtrage finaux des données à l'aide de Scaffold (www.proteomsoftware.com).
Analyses statistiques:
L'analyse des données sera effectuée avec le package bioconducteur limma. Avant l'analyse des données, les données seront filtrées en excluant les protéines avec des mesures avec une faible plage interquartile. Les groupes seront comparés par des statistiques t appariées modérées ajustées en fonction de l'âge. L'ajustement pour les tests multiples sera effectué par la correction de Benjamini-Hochberg contrôlant le FDR à 0,05.
Type d'étude
Inscription (Réel)
Contacts et emplacements
Lieux d'étude
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Vienna, L'Autriche, 1090
- Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
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Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
Accepte les volontaires sains
Méthode d'échantillonnage
Population étudiée
La description
Critère d'intégration:
- patients souffrant d'incontinence urinaire d'effort : antécédents de symptômes d'incontinence urinaire d'effort depuis au moins 3 mois (y compris plaintes anamnestiques de fuites involontaires à l'effort ou à l'effort ou lors d'éternuements ou de toux) et test d'effort provocateur positif (défini comme une perte transurétrale observée de urine qui était simultanée avec une toux ou une manœuvre de Valsalva à un volume de vessie de 300 ml ou moins)
- patients capables de travailler de manière indépendante
- patients capables de comprendre pleinement toutes les procédures de l'étude et de fournir un consentement éclairé écrit à la participation à l'étude
- âge ≥ 18
- patientes après un accouchement vaginal
Critère d'exclusion:
- les patients qui ont déjà été traités pour l'IUE (traitement chirurgical ou pharmacologique)
- les patients qui ont des antécédents médicaux d'hyperactivité vésicale non contrôlée (OAB) ou d'incontinence urinaire autre que SUI (y compris les plaintes anamnestiques sur les fuites d'urine involontaires accompagnées ou immédiatement précédées d'une urgence, non induites par le stress)
- les patients atteints de troubles neurologiques bien établis (par ex. Sclérose en plaques, maladie de Parkinson, maladie d'Alzheimer)
- patients avec prolapsus des organes pelviens stade ≥ II (classification ICS)
- les patients présentant une obstruction cliniquement significative de la sortie de la vessie et/ou les patients présentant un volume résiduel post-mictionnel (PVR) > 100 ml
- patients ayant des antécédents de rétention aiguë d'urine ou des antécédents de cathétérismes répétés en raison d'une rétention aiguë d'urine au cours des 3 derniers mois précédant le jour du consentement éclairé
- les patients porteurs d'une sonde à demeure et les patients pratiquant l'auto-sondage intermittent
- les patients qui ont subi une biopsie de la vessie ou toute autre intervention chirurgicale pelvienne mineure moins de 30 jours avant le jour du consentement éclairé
- patients ayant des antécédents de cancer de la vessie
- patients présentant une infection aiguë ou récurrente des voies urinaires et/ou une hématurie inexpliquée
- patients présentant des calculs dans la vessie ou l'urètre et une maladie des calculs des voies supérieures provoquant des symptômes
- patients présentant des signes d'insuffisance rénale (créatinine > 1,5x la limite supérieure de la normale)
- patients présentant des signes de maladie hépatique (bilirubine totale > 1,5 x la limite supérieure de la normale, ou AST ou ALT ou phosphatase alcaline > 2 x la limite supérieure de la normale)
- patients ayant des antécédents d'abus d'alcool et/ou d'autres drogues
- les patients qui sont incapables et/ou peu susceptibles de comprendre et de suivre les procédures et les instructions de l'étude
- patientes enceintes ou allaitantes
- les patients souffrant de troubles médicaux graves qui, de l'avis des investigateurs, ne devraient pas participer à cette étude
Le groupe témoin est représenté par des patients ayant les mêmes critères d'inclusion et d'exclusion que le groupe cas, à l'exception de l'incontinence urinaire d'effort.
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
Cohortes et interventions
Groupe / Cohorte |
Intervention / Traitement |
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incontinence urinaire d'effort
Patients présentant une incontinence urinaire d'effort selon les critères d'inclusion et d'exclusion
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contrôles sains
femmes en bonne santé avec les mêmes critères d'inclusion et d'exclusion que le groupe de cas, à l'exception de l'incontinence urinaire d'effort
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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mesure par spectrométrie de masse du sécrétome protéomique urinaire chez les sujets malades et sains (couverture des séquences et nombre de protéines identifiées)
Délai: Le critère de jugement principal sera évalué pour chaque participant dans un délai de 4 à 7 jours après le recrutement
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Comparaison des concentrations de protéines en fonction du nombre de protéines identifiées et du comptage spectral par spectrométrie de masse pour les patients souffrant d'incontinence urinaire d'effort et les témoins sains.
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Le critère de jugement principal sera évalué pour chaque participant dans un délai de 4 à 7 jours après le recrutement
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Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Les enquêteurs
- Chercheur principal: Heinz Kölbl, Univ.-Prof.Dr.Dr.h.c., Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
Publications et liens utiles
Publications générales
- Petricoin EF, Ardekani AM, Hitt BA, Levine PJ, Fusaro VA, Steinberg SM, Mills GB, Simone C, Fishman DA, Kohn EC, Liotta LA. Use of proteomic patterns in serum to identify ovarian cancer. Lancet. 2002 Feb 16;359(9306):572-7. doi: 10.1016/S0140-6736(02)07746-2.
- Chen B, Wen Y, Zhang Z, Guo Y, Warrington JA, Polan ML. Microarray analysis of differentially expressed genes in vaginal tissues from women with stress urinary incontinence compared with asymptomatic women. Hum Reprod. 2006 Jan;21(1):22-9. doi: 10.1093/humrep/dei276. Epub 2005 Aug 26.
- Mushkat Y, Bukovsky I, Langer R. Female urinary stress incontinence--does it have familial prevalence? Am J Obstet Gynecol. 1996 Feb;174(2):617-9. doi: 10.1016/s0002-9378(96)70437-4.
- Elia G, Bergman J, Dye TD. Familial incidence of urinary incontinence. Am J Obstet Gynecol. 2002 Jul;187(1):53-5. doi: 10.1067/mob.2002.124842.
- Hu S, Loo JA, Wong DT. Human body fluid proteome analysis. Proteomics. 2006 Dec;6(23):6326-53. doi: 10.1002/pmic.200600284.
- Ho L, Sharma N, Blackman L, Festa E, Reddy G, Pasinetti GM. From proteomics to biomarker discovery in Alzheimer's disease. Brain Res Brain Res Rev. 2005 Apr;48(2):360-9. doi: 10.1016/j.brainresrev.2004.12.025.
- Semmes OJ, Feng Z, Adam BL, Banez LL, Bigbee WL, Campos D, Cazares LH, Chan DW, Grizzle WE, Izbicka E, Kagan J, Malik G, McLerran D, Moul JW, Partin A, Prasanna P, Rosenzweig J, Sokoll LJ, Srivastava S, Srivastava S, Thompson I, Welsh MJ, White N, Winget M, Yasui Y, Zhang Z, Zhu L. Evaluation of serum protein profiling by surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry for the detection of prostate cancer: I. Assessment of platform reproducibility. Clin Chem. 2005 Jan;51(1):102-12. doi: 10.1373/clinchem.2004.038950.
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude
Achèvement primaire (Réel)
Achèvement de l'étude (Réel)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Estimé)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Réel)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Termes MeSH pertinents supplémentaires
- Symptômes comportementaux
- Les troubles mentaux
- Maladies urologiques
- Symptômes des voies urinaires inférieures
- Manifestations urologiques
- Troubles urinaires
- Troubles d'élimination
- Maladies urogénitales féminines
- Maladies urogénitales féminines et complications de la grossesse
- Maladies urogénitales
- Maladies urogénitales masculines
- Incontinence urinaire
- Énurésie
- Incontinence urinaire, Stress
Autres numéros d'identification d'étude
- EK 1788/2013
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