Proteomisk mønster i kvindelig stress-urininkontinens: en pilotundersøgelse
Formål: Det primære formål med undersøgelsen er sammenligning af proteinkoncentrationer mellem patienter med stress-urininkontinens (SUI) og raske kontroller.
Formål: Denne pilotundersøgelse har til formål at bestemme en mulig ændret proteinprofil hos kvinder, der lider af SUI, sammenlignet med raske kvinder og derfor at diskriminere en potentiel proteinbiomarkør for SUI.
Hovedresultatmål: massespektrometrisk måling af urinproteomisk sekretom hos syge og raske forsøgspersoner (sekvensdækning og antal identificerede proteiner)
Forsøgsdesign: Prospektiv case-kontrol undersøgelse
Indstilling: Afdelingen for gynækologi og obstetrik ved det medicinske universitet i Wien i samarbejde med kernefaciliteternes proteomik på det medicinske universitet i Wien
Population: 20 kvindelige patienter med SUI og 20 raske patienter, der går i ambulatoriet på afdelingen for obstetrik og gynækologi, Medical University of Vienna (prøvestørrelsesberegning FDR 0,05, effekt på 80 %, antaget andel af sand H0 0,95, antaget standardiseret effekt størrelse 1)
Metoder: Undersøgelser, der skal udføres: patienthistorie, provokerende stresstest, ICIQ-spørgeskema i kort form, resterende urinvolumen (ultralyd) og urinanalyse (dipstick-test). Der udtages en urinprøve fra patienten efter spontan vandladning, hvortil der straks tilsættes proteasehæmmer. To hætteglas med serumblod (hver på 9 ml) tages fra en perifer vene på patienten til rutinelaboratorium og yderligere forskning.
Proteomisk analyse vil blive udført ved hjælp af kromatografisk separation (LC) med massespektrometrisk detektion (MS).
Studieoversigt
Status
Betingelser
Intervention / Behandling
Detaljeret beskrivelse
Metoder:
Prøveforberedelse og analyse vil omfatte:
- Prøveindsamling og øjeblikkelig tilsætning af proteaseinhibitorcocktail (Roche, Complete Protease Inhibitor Cocktail).
- Urincentrifugering og -filtrering til fjernelse af cellerester.
- Proteinudfældning ved at anvende methanol/chloroform-separation til fjernelse af alle mulige ikke-proteinholdige stoffer.
- Proteinfordøjelse ved at anvende trypsin, pepsin og Glu-C i opløsning.
Peptidseparation ved hjælp af nano-HPLC og forskellige kromatografiske tilgange.
- Omvendt fase (RP) separation af peptider og MS-detektion
- Separation af peptider ved hjælp af HILIC (hydrofil interaktionsvæskekromatografi) til skelnen mellem polære peptider.
- Ud over RP og HILIC direkte koblet til MS, vil fordøjede peptider blive adskilt ved hjælp af multidimensionelle tilgange. Svage anionbytterkolonner, der drives under HILIC-betingelser, vil blive brugt til at adskille peptider, der bærer posttranslationelle modifikationer, såsom phosphorylering eller acetylering, og dermed øge det dynamiske detektionsområde. Under denne adskillelse vil fraktioner blive opsamlet og geninjiceret på RP og HILIC med MS-detektion.
- Alle nano HPLC-separationer vil blive udført ved hjælp af biokompatibelt separationssystem.
Massespektrometrisk analyse af fordøjede peptider vil blive udført ved hjælp af to forskellige detektionsmetoder: ion-fælde og time-of-flight (qToF) MS. qToF massespektrometrisk påvisning og analyse vil også blive brugt til mærkefri kvantificering af peptider og proteiner påvist i prøver. Alle målinger vil blive udført i tre eksemplarer for at give korrektioner for teknisk variabilitet af adskillelse og ionisering.
Generel databasesøgning vil blive udført ved hjælp af Human SwissProt-databasen i dens faktiske version på analysetidspunktet. Datasøgning vil blive udført ved hjælp af Mascot (http://www.matrixscience.com/) og X!Tandem (http://www.thegpm.org/tandem/) søgemaskiner, og den endelige dataallokering og filtrering ved hjælp af Scaffold (www.proteomsoftware.com).
Statistisk analyse:
Dataanalyse vil blive udført med biolederpakken limma. Før dataanalyse vil data blive filtreret ved at udelukke proteiner med målinger med et lavt interkvartilområde. Grupper vil blive sammenlignet med modereret parret t-statistik, der justerer for alder. Justering for flere test vil blive udført af Benjamini-Hochberg-korrektion, der kontrollerer FDR ved 0,05.
Undersøgelsestype
Tilmelding (Faktiske)
Kontakter og lokationer
Studiesteder
-
-
-
Vienna, Østrig, 1090
- Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Prøveudtagningsmetode
Studiebefolkning
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- patienter med stress-inkontinens: en historie med symptomer på stress-urininkontinens i mindst 3 måneder (inklusive anamnestiske klager over ufrivillig lækage ved anstrengelse eller anstrengelse eller ved nysen eller hoste) og en positiv provokerende stresstest (defineret som et observeret transurethralt tab af urin, der var samtidig med en hoste eller Valsalva-manøvre ved et blærevolumen på 300 ml eller mindre)
- patienter, der kan arbejde selvstændigt
- patienter, der er i stand til fuldt ud at forstå alle undersøgelsesprocedurer og give skriftligt informeret samtykke til undersøgelsesdeltagelse
- alder ≥ 18
- patienter efter vaginal fødsel
Ekskluderingskriterier:
- patienter, der tidligere er blevet behandlet for SUI (både kirurgisk eller farmakologisk behandling)
- patienter, der har en anamnese med ukontrolleret overaktiv blære (OAB) eller anden urininkontinens end SUI (herunder anamnestiske klager over ufrivillig urinlækage ledsaget af eller umiddelbart forud for uopsættelighed, ikke stressinduceret)
- patienter med veletableret neurologisk lidelse (f. Multipel sklerose, Parkinsons sygdom, Alzheimers sygdom)
- patienter med bækkenorganprolaps stadium ≥ II (ICS-klassifikation)
- patienter med en klinisk signifikant blæreudløbsobstruktion og/eller patienter med et post void residual volume (PVR) > 100 ml
- patienter med en anamnese med akut urinretention eller historie med gentagne kateteriseringer på grund af akut urinretention inden for de sidste 3 måneder forud for dagen for informeret samtykke
- patienter med et indlagt kateter og patienter, der praktiserer intermitterende selvkateterisering
- patienter, der har gennemgået en blærebiopsi eller andre mindre bækkenkirurgiske indgreb mindre end 30 dage før dagen for informeret samtykke
- patienter med en historie med blærekræft
- patienter med akut eller tilbagevendende urinvejsinfektion og/eller uforklarlig hæmaturi
- patienter med sten(e) i blæren eller urinrøret og stensygdom i øvre del af kanalen, der forårsager symptomer
- patienter med tegn på nyreinsufficiens (kreatinin > 1,5x øvre normalgrænse)
- patienter med tegn på leversygdom (total bilirubin >1,5x øvre normalgrænse eller ASAT eller ALAT eller alkalisk fosfatase >2x øvre normalgrænse)
- patienter med en historie med alkohol og/eller andet stofmisbrug
- patienter, der ikke er i stand til og/eller usandsynligt at forstå og følge undersøgelsesprocedurerne og instruktionerne
- patienter, der er gravide eller ammende
- patienter med alvorlige medicinske tilstande, som efter efterforskernes mening ikke bør deltage i denne undersøgelse
Kontrolgruppen er repræsenteret af patienter med samme inklusions- og eksklusionskriterier som casegruppen, bortset fra stressurininkontinens.
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
Kohorter og interventioner
Gruppe / kohorte |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
stressurininkontinens
Patienter med stress-urininkontinens i henhold til inklusions- og eksklusionskriterierne
|
|
|
sunde kontroller
raske kvinder med samme inklusions- og eksklusionskriterier som casegruppen, bortset fra stress-urininkontinens
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
massespektrometrisk måling af urinproteomisk sekretom hos syge og raske forsøgspersoner (sekvensdækning og antal identificerede proteiner)
Tidsramme: Det primære resultatmål vil blive vurderet for hver deltager i en tidsramme på 4-7 dage efter rekruttering
|
Sammenligning af proteinkoncentrationer baseret på antallet af identificerede proteiner og massespektrometrisk spektraltælling for patienter med stressurininkontinens og raske kontroller.
|
Det primære resultatmål vil blive vurderet for hver deltager i en tidsramme på 4-7 dage efter rekruttering
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Sponsor
Efterforskere
- Ledende efterforsker: Heinz Kölbl, Univ.-Prof.Dr.Dr.h.c., Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
Publikationer og nyttige links
Generelle publikationer
- Petricoin EF, Ardekani AM, Hitt BA, Levine PJ, Fusaro VA, Steinberg SM, Mills GB, Simone C, Fishman DA, Kohn EC, Liotta LA. Use of proteomic patterns in serum to identify ovarian cancer. Lancet. 2002 Feb 16;359(9306):572-7. doi: 10.1016/S0140-6736(02)07746-2.
- Chen B, Wen Y, Zhang Z, Guo Y, Warrington JA, Polan ML. Microarray analysis of differentially expressed genes in vaginal tissues from women with stress urinary incontinence compared with asymptomatic women. Hum Reprod. 2006 Jan;21(1):22-9. doi: 10.1093/humrep/dei276. Epub 2005 Aug 26.
- Mushkat Y, Bukovsky I, Langer R. Female urinary stress incontinence--does it have familial prevalence? Am J Obstet Gynecol. 1996 Feb;174(2):617-9. doi: 10.1016/s0002-9378(96)70437-4.
- Elia G, Bergman J, Dye TD. Familial incidence of urinary incontinence. Am J Obstet Gynecol. 2002 Jul;187(1):53-5. doi: 10.1067/mob.2002.124842.
- Hu S, Loo JA, Wong DT. Human body fluid proteome analysis. Proteomics. 2006 Dec;6(23):6326-53. doi: 10.1002/pmic.200600284.
- Ho L, Sharma N, Blackman L, Festa E, Reddy G, Pasinetti GM. From proteomics to biomarker discovery in Alzheimer's disease. Brain Res Brain Res Rev. 2005 Apr;48(2):360-9. doi: 10.1016/j.brainresrev.2004.12.025.
- Semmes OJ, Feng Z, Adam BL, Banez LL, Bigbee WL, Campos D, Cazares LH, Chan DW, Grizzle WE, Izbicka E, Kagan J, Malik G, McLerran D, Moul JW, Partin A, Prasanna P, Rosenzweig J, Sokoll LJ, Srivastava S, Srivastava S, Thompson I, Welsh MJ, White N, Winget M, Yasui Y, Zhang Z, Zhu L. Evaluation of serum protein profiling by surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry for the detection of prostate cancer: I. Assessment of platform reproducibility. Clin Chem. 2005 Jan;51(1):102-12. doi: 10.1373/clinchem.2004.038950.
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart
Primær færdiggørelse (Faktiske)
Studieafslutning (Faktiske)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (Anslået)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Faktiske)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Yderligere relevante MeSH-vilkår
- Adfærdsmæssige symptomer
- Psykiske lidelser
- Urologiske sygdomme
- Nedre urinvejssymptomer
- Urologiske manifestationer
- Vandladningsforstyrrelser
- Eliminationsforstyrrelser
- Urogenitale sygdomme hos kvinder
- Kvinders urogenitale sygdomme og graviditetskomplikationer
- Urogenitale sygdomme
- Mandlige urogenitale sygdomme
- Ufrivillig vandladning
- Enuresis
- Urininkontinens, stress
Andre undersøgelses-id-numre
- EK 1788/2013
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .