Proteomisch patroon bij stress-urine-incontinentie bij vrouwen: een pilotstudie
Doelstelling: Het primaire doel van de studie is de vergelijking van eiwitconcentraties tussen patiënten met stress-urine-incontinentie (SUI) en gezonde controles.
Doel: Deze pilootstudie heeft tot doel een mogelijk veranderd eiwitprofiel vast te stellen bij vrouwen die lijden aan SUI, in vergelijking met gezonde vrouwen en daarom een potentiële eiwitbiomarker voor SUI te onderscheiden.
Belangrijkste uitkomstmaat: massaspectrometrische meting van urinair proteomisch secretoom bij zieke en gezonde proefpersonen (sequentiedekking en aantal geïdentificeerde eiwitten)
Proefopzet: prospectief patiënt-controleonderzoek
Omgeving: Afdeling Gynaecologie en Verloskunde van de Medische Universiteit van Wenen in samenwerking met de Core Facilities Proteomics van de Medische Universiteit van Wenen
Populatie: Twintig vrouwelijke patiënten met SUI en twintig gezonde patiënten die de polikliniek van de afdeling Obstetrie en Gynaecologie van de Medische Universiteit van Wenen bezoeken (steekproefgrootteberekening FDR 0,05, power van 80%, verondersteld aandeel van echte H0 0,95, verondersteld gestandaardiseerd effect grootte van 1)
Methoden: Uit te voeren onderzoeken: anamnese van de patiënt, provocatieve stresstest, korte ICIQ-vragenlijst, resterend urinevolume (echografie) en urine-analyse (dipstick-test). Na spontane mictie wordt bij de patiënt urine afgenomen, waaraan direct een proteaseremmer wordt toegevoegd. Twee serumbloedflesjes (elk 9 ml) worden uit een perifere ader van de patiënt genomen voor routinelaboratorium en verder onderzoek.
Proteomics-analyse zal worden uitgevoerd met behulp van chromatografische scheiding (LC) met massaspectrometrische detectie (MS).
Studie Overzicht
Toestand
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
methoden:
Monstervoorbereiding en -analyse omvatten:
- Monsterverzameling en onmiddellijke toevoeging van proteaseremmercocktail (Roche, complete proteaseremmercocktail).
- Urine centrifugeren en filteren voor het verwijderen van celresten.
- Eiwitprecipitatie door toepassing van methanol/chloroform-scheiding voor verwijdering van alle mogelijke niet-eiwitachtige stoffen.
- Eiwitvertering met in-oplossing trypsine, pepsine en Glu-C.
Peptidenscheiding met behulp van nano-HPLC en verschillende chromatografische benaderingen.
- Omgekeerde fase (RP) scheiding van peptiden en MS-detectie
- Scheiding van peptiden met behulp van HILIC (hydrofiele interactievloeistofchromatografie) voor het onderscheiden van polaire peptiden.
- Naast RP en HILIC direct gekoppeld aan MS, zullen gedigereerde peptiden worden gescheiden met behulp van multidimensionale benaderingen. Zwakke anionenuitwisselingskolommen die werken onder HILIC-omstandigheden zullen worden gebruikt om peptiden te scheiden die posttranslationele modificaties dragen, zoals fosforylering of acetylering, waardoor het dynamische detectiebereik wordt vergroot. Tijdens deze scheiding worden fracties verzameld en opnieuw geïnjecteerd op de RP en HILIC met MS-detectie.
- Alle nano-HPLC-scheidingen worden uitgevoerd met behulp van een biocompatibel scheidingssysteem.
Massaspectrometrische analyse van verteerde peptiden zal uitgevoerd worden met behulp van twee verschillende detectiemethodes: ion-trap en time-of-flight (qToF) MS. qToF-massaspectrometrische detectie en analyse zullen ook worden gebruikt voor de labelvrije kwantificering van peptiden en eiwitten die in monsters worden gedetecteerd. Alle metingen worden in drievoud uitgevoerd om correcties te bieden voor technische variabiliteit van scheiding en ionisatie.
Algemeen zoeken in de database zal worden uitgevoerd met behulp van de Human SwissProt Database in de huidige versie op het moment van analyse. Het zoeken naar gegevens zal worden uitgevoerd met behulp van Mascot (http://www.matrixscience.com/) en X!Tandem (http://www.thegpm.org/tandem/) zoekmachines en de uiteindelijke toewijzing en filtering van gegevens met behulp van Scaffold (www.proteomsoftware.com).
Statistische analyse:
Data-analyse zal worden uitgevoerd met het bioconductor-pakket limma. Voorafgaand aan de data-analyse worden de data gefilterd door eiwitten uit te sluiten met metingen met een laag interkwartielbereik. Groepen zullen worden vergeleken door middel van gemodereerde gepaarde t-statistieken, aangepast voor leeftijd. Aanpassing voor meervoudige testen wordt gedaan door Benjamini-Hochberg-correctie die de FDR op 0,05 regelt.
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
-
Vienna, Oostenrijk, 1090
- Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- patiënten met stress-urine-incontinentie: een voorgeschiedenis van symptomen van stress-urine-incontinentie gedurende ten minste 3 maanden (inclusief anamnestische klachten van onwillekeurig urineverlies bij inspanning of inspanning of bij niezen of hoesten) en een positieve provocatieve stresstest (gedefinieerd als een waargenomen transurethraal verlies van urine gelijktijdig met hoesten of Valsalva-manoeuvre bij een blaasvolume van 300 ml of minder)
- patiënten die zelfstandig kunnen werken
- patiënten die in staat zijn om alle onderzoeksprocedures volledig te begrijpen en om schriftelijke geïnformeerde toestemming te geven voor deelname aan het onderzoek
- leeftijd ≥ 18 jaar
- patiënten na vaginale bevalling
Uitsluitingscriteria:
- patiënten die eerder zijn behandeld voor SUI (zowel chirurgische als medicamenteuze behandeling)
- patiënten met een medische voorgeschiedenis van ongecontroleerde overactieve blaas (OAB) of urine-incontinentie anders dan SUI (inclusief anamnestische klachten over onvrijwillig urineverlies vergezeld van of onmiddellijk voorafgegaan door aandrang, niet door stress veroorzaakt)
- patiënten met een gevestigde neurologische aandoening (bijv. Multiple sclerose, ziekte van Parkinson, ziekte van Alzheimer)
- patiënten met bekkenorgaanverzakking stadium ≥ II (ICS-classificatie)
- patiënten met een klinisch significante obstructie van de blaasuitgang en/of patiënten met een restvolume na de mictie (PVR) > 100 ml
- patiënten met een voorgeschiedenis van acute urineretentie of voorgeschiedenis van herhaalde katheterisaties als gevolg van acute urineretentie in de laatste 3 maanden voorafgaand aan de dag van geïnformeerde toestemming
- patiënten met een verblijfskatheter en patiënten die intermitterende zelfkatheterisatie toepassen
- patiënten die een blaasbiopsie of een andere kleine bekkenchirurgische ingreep hebben ondergaan minder dan 30 dagen voorafgaand aan de dag van geïnformeerde toestemming
- patiënten met een voorgeschiedenis van blaaskanker
- patiënten met een acute of terugkerende urineweginfectie en/of onverklaarde hematurie
- patiënten met steen(en) in de blaas of urethra en steenziekte in het bovenste kanaal die symptomen veroorzaakt
- patiënten met tekenen van nierinsufficiëntie (creatinine > 1,5x bovengrens van normaal)
- patiënten met tekenen van leverziekte (totaal bilirubine >1,5x bovengrens van normaal, of ASAT of ALAT of alkalische fosfatase >2x bovengrens van normaal)
- patiënten met een voorgeschiedenis van alcohol- en/of ander drugsmisbruik
- patiënten die de onderzoeksprocedures en -instructies niet kunnen en/of waarschijnlijk niet begrijpen en volgen
- patiënten die zwanger zijn of borstvoeding geven
- patiënten met ernstige medische aandoeningen die volgens de onderzoekers niet aan dit onderzoek zouden moeten deelnemen
De controlegroep wordt vertegenwoordigd door patiënten met dezelfde in- en exclusiecriteria als de casusgroep, met uitzondering van stress-urine-incontinentie.
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
stress urine-incontinentie
Patiënten die zich presenteren met stress-urine-incontinentie volgens de inclusie- en exclusiecriteria
|
|
|
gezonde controles
gezonde vrouwen met dezelfde in- en exclusiecriteria als de casusgroep, met uitzondering van stress-urine-incontinentie
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
massaspectrometrische meting van urinair proteomisch secretoom bij zieke en gezonde proefpersonen (sequentiedekking en aantal geïdentificeerde eiwitten)
Tijdsspanne: De primaire uitkomstmaat wordt voor elke deelnemer beoordeeld in een tijdsbestek van 4-7 dagen na werving
|
Vergelijking van eiwitconcentraties op basis van het aantal geïdentificeerde eiwitten en massaspectrometrische spectrale telling voor patiënten met stress-urine-incontinentie en gezonde controles.
|
De primaire uitkomstmaat wordt voor elke deelnemer beoordeeld in een tijdsbestek van 4-7 dagen na werving
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Onderzoekers
- Hoofdonderzoeker: Heinz Kölbl, Univ.-Prof.Dr.Dr.h.c., Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
Publicaties en nuttige links
Algemene publicaties
- Petricoin EF, Ardekani AM, Hitt BA, Levine PJ, Fusaro VA, Steinberg SM, Mills GB, Simone C, Fishman DA, Kohn EC, Liotta LA. Use of proteomic patterns in serum to identify ovarian cancer. Lancet. 2002 Feb 16;359(9306):572-7. doi: 10.1016/S0140-6736(02)07746-2.
- Chen B, Wen Y, Zhang Z, Guo Y, Warrington JA, Polan ML. Microarray analysis of differentially expressed genes in vaginal tissues from women with stress urinary incontinence compared with asymptomatic women. Hum Reprod. 2006 Jan;21(1):22-9. doi: 10.1093/humrep/dei276. Epub 2005 Aug 26.
- Mushkat Y, Bukovsky I, Langer R. Female urinary stress incontinence--does it have familial prevalence? Am J Obstet Gynecol. 1996 Feb;174(2):617-9. doi: 10.1016/s0002-9378(96)70437-4.
- Elia G, Bergman J, Dye TD. Familial incidence of urinary incontinence. Am J Obstet Gynecol. 2002 Jul;187(1):53-5. doi: 10.1067/mob.2002.124842.
- Hu S, Loo JA, Wong DT. Human body fluid proteome analysis. Proteomics. 2006 Dec;6(23):6326-53. doi: 10.1002/pmic.200600284.
- Ho L, Sharma N, Blackman L, Festa E, Reddy G, Pasinetti GM. From proteomics to biomarker discovery in Alzheimer's disease. Brain Res Brain Res Rev. 2005 Apr;48(2):360-9. doi: 10.1016/j.brainresrev.2004.12.025.
- Semmes OJ, Feng Z, Adam BL, Banez LL, Bigbee WL, Campos D, Cazares LH, Chan DW, Grizzle WE, Izbicka E, Kagan J, Malik G, McLerran D, Moul JW, Partin A, Prasanna P, Rosenzweig J, Sokoll LJ, Srivastava S, Srivastava S, Thompson I, Welsh MJ, White N, Winget M, Yasui Y, Zhang Z, Zhu L. Evaluation of serum protein profiling by surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry for the detection of prostate cancer: I. Assessment of platform reproducibility. Clin Chem. 2005 Jan;51(1):102-12. doi: 10.1373/clinchem.2004.038950.
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Geschat)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
- Gedragssymptomen
- Psychische aandoening
- Urologische ziekten
- Lagere urinewegsymptomen
- Urologische manifestaties
- Plasstoornissen
- Eliminatiestoornissen
- Vrouwelijke urogenitale ziekten
- Vrouwelijke urogenitale ziekten en zwangerschapscomplicaties
- Urogenitale ziekten
- Mannelijke urogenitale ziekten
- Urine-incontinentie
- Bedplassen
- Urine-incontinentie, stress
Andere studie-ID-nummers
- EK 1788/2013
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .