Proteomický vzorec u ženské stresové močové inkontinence: pilotní studie
Cíl: Primárním cílem studie je srovnání koncentrací bílkovin mezi pacientkami se stresovou inkontinencí moči (SUI) a zdravými kontrolami.
Cíl: Tato pilotní studie si klade za cíl zjistit možný pozměněný proteinový profil u žen trpících SUI ve srovnání se zdravými ženami, a proto rozlišit potenciální proteinový biomarker pro SUI.
Hlavní výstupní měření: hmotnostní spektrometrické měření močového proteomického sekretomu u nemocných a zdravých jedinců (pokrytí sekvence a počet identifikovaných proteinů)
Design studie: Prospektivní případ-kontrolní studie
Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnická klinika Lékařské univerzity ve Vídni ve spolupráci s Core Facilities Proteomics Lékařské univerzity ve Vídni
Populace: Dvacet pacientek se SUI a dvacet zdravých pacientek, které navštěvují ambulanci Porodnicko-gynekologické kliniky Lékařské univerzity ve Vídni (výpočet velikosti vzorku FDR 0,05, síla 80 %, předpokládaný podíl skutečné H0 0,95, předpokládaný standardizovaný efekt velikost 1)
Metody: Vyšetření, která je třeba provést: anamnéza pacienta, provokativní zátěžový test, krátký dotazník ICIQ, reziduální objem moči (ultrazvuk) a analýza moči (test proužkem). Po spontánní mikci se pacientovi odebere vzorek moči, ke kterému se okamžitě přidá inhibitor proteázy. Z periferní žíly pacienta se odeberou dvě lahvičky s krví séra (každá o objemu 9 ml) pro rutinní laboratorní a další výzkum.
Proteomická analýza bude provedena pomocí chromatografické separace (LC) s hmotnostní spektrometrickou detekcí (MS).
Přehled studie
Postavení
Podmínky
Intervence / Léčba
Detailní popis
Metody:
Příprava a analýza vzorků bude zahrnovat:
- Odběr vzorků a okamžité přidání koktejlu inhibitoru proteázy (Roche, Complete Protease Inhibitor Cocktail).
- Centrifugace a filtrace moči pro odstranění buněčných zbytků.
- Precipitace proteinů použitím separace methanol/chloroform pro odstranění všech možných neproteinových látek.
- Štěpení proteinů za použití trypsinu, pepsinu a Glu-C v roztoku.
Separace peptidů pomocí nano HPLC a různých chromatografických přístupů.
- Separace peptidů na reverzní fázi (RP) a MS detekce
- Separace peptidů pomocí HILIC (hydrophilic Interaction Liquid Chromatography) pro rozlišení polárních peptidů.
- Kromě RP a HILIC přímo spojených s MS budou štěpené peptidy separovány pomocí vícerozměrných přístupů. Slabé aniontoměničové kolony provozované za podmínek HILIC budou použity k separaci peptidů nesoucích posttranslační modifikace, jako je fosforylace nebo acetylace, čímž se zvýší dynamický rozsah detekce. Během této separace budou frakce shromažďovány a znovu injikovány na RP a HILIC s MS detekcí.
- Všechny separace nano HPLC budou prováděny pomocí biokompatibilního separačního systému.
Hmotnostní spektrometrická analýza štěpených peptidů bude provedena za použití dvou různých metod detekce: iontové pasti a doby letu (qToF) MS. Hmotnostní spektrometrická detekce a analýza qToF bude také použita pro bezznačkovou kvantifikaci peptidů a proteinů detekovaných ve vzorcích. Všechna měření budou provedena trojmo, aby byly poskytnuty korekce na technickou variabilitu separace a ionizace.
Obecné vyhledávání v databázi bude provedeno pomocí Human SwissProt Database v její aktuální verzi v době analýzy. Vyhledávání dat bude provedeno pomocí Mascot (http://www.matrixscience.com/) a X!Tandem (http://www.thegpm.org/tandem/) vyhledávací stroje a konečnou alokaci a filtrování dat pomocí Scaffold (www.proteomsoftware.com).
Statistická analýza:
Analýza dat bude provedena s biovodičovým balíčkem limma. Před analýzou dat budou data filtrována vyloučením proteinů s měřením s nízkým mezikvartilním rozsahem. Skupiny budou porovnány pomocí moderovaných párových t-statistik upravených podle věku. Úprava pro vícenásobné testování bude provedena pomocí Benjamini-Hochbergovy korekce, která řídí FDR na 0,05.
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Vienna, Rakousko, 1090
- Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Popis
Kritéria pro zařazení:
- pacienti se stresovou inkontinencí moči: anamnéza příznaků stresové inkontinence moči po dobu nejméně 3 měsíců (včetně anamnestických stížností na mimovolní únik moči při námaze nebo námaze nebo při kýchání nebo kašlání) a pozitivní provokativní zátěžový test (definovaný jako pozorovaná transuretrální ztráta moči moč, která byla současně s kašlem nebo Valsalvovým manévrem při objemu močového měchýře 300 ml nebo méně)
- pacienty schopné samostatné práce
- pacientů, kteří jsou schopni plně porozumět všem postupům studie a poskytnout písemný informovaný souhlas s účastí ve studii
- věk ≥ 18
- pacientky po vaginálním porodu
Kritéria vyloučení:
- pacienti, kteří byli dříve léčeni pro SUI (jak chirurgická, tak farmakologická léčba)
- pacienti, kteří mají v anamnéze nekontrolovaný hyperaktivní močový měchýř (OAB) nebo inkontinenci moči jinou než SUI (včetně anamnestických stížností na mimovolní únik moči doprovázený nebo bezprostředně předcházený naléhavostí, nikoli vyvolanou stresem)
- pacienti s dobře prokázanou neurologickou poruchou (např. Roztroušená skleróza, Parkinsonova choroba, Alzheimerova choroba)
- pacienti s prolapsem pánevních orgánů stadia ≥ II (klasifikace ICS)
- pacienti s klinicky významnou obstrukcí výstupu z močového měchýře a/nebo pacienti s postmikčním reziduálním objemem (PVR) > 100 ml
- pacienti s anamnézou akutní retence moči nebo anamnézou opakovaných katetrizací v důsledku akutní retence moči během posledních 3 měsíců přede dnem informovaného souhlasu
- pacienti se zavedeným katetrem a pacienti praktikující intermitentní autokatetrizaci
- pacienti, kteří podstoupili biopsii močového měchýře nebo jakýkoli jiný menší chirurgický zákrok na pánvi méně než 30 dnů přede dnem informovaného souhlasu
- pacientů s rakovinou močového měchýře v anamnéze
- pacientů s akutní nebo recidivující infekcí močových cest a/nebo nevysvětlitelnou hematurií
- pacienti s kameny v močovém měchýři nebo močové trubici a kameny horního traktu způsobující příznaky
- pacienti s prokázanou renální insuficiencí (kreatinin > 1,5x horní hranice normy)
- pacienti s prokázaným onemocněním jater (celkový bilirubin >1,5x horní hranice normy nebo AST nebo ALT nebo alkalická fosfatáza >2x horní hranice normy)
- pacienti s anamnézou zneužívání alkoholu a/nebo jiných drog
- pacienti, kteří nejsou schopni a/nebo je nepravděpodobné, že porozumí a budou dodržovat postupy a pokyny studie
- pacientky, které jsou těhotné nebo kojící
- pacientů se závažným zdravotním stavem, kteří by se podle názoru zkoušejících neměli této studie účastnit
Kontrolní skupinu představují pacienti se stejnými zařazovacími a vylučovacími kritérii jako skupina případů, s výjimkou stresové inkontinence moči.
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
Kohorty a intervence
Skupina / kohorta |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
stresová inkontinence moči
Pacienti se stresovou inkontinencí moči podle kritérií pro zařazení a vyloučení
|
|
|
zdravé kontroly
zdravé ženy se stejnými zařazovacími a vylučovacími kritérii jako skupina případů, s výjimkou stresové inkontinence moči
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
hmotnostní spektrometrické měření močového proteomického sekretomu u nemocných a zdravých jedinců (pokrytí sekvence a počet identifikovaných proteinů)
Časové okno: Měření primárního výsledku bude posouzeno u každého účastníka v časovém rámci 4–7 dnů po náboru
|
Porovnání koncentrací proteinů na základě počtu identifikovaných proteinů a hmotnostního spektrálního počtu u pacientů se stresovou inkontinencí moči a zdravých kontrol.
|
Měření primárního výsledku bude posouzeno u každého účastníka v časovém rámci 4–7 dnů po náboru
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Vyšetřovatelé
- Vrchní vyšetřovatel: Heinz Kölbl, Univ.-Prof.Dr.Dr.h.c., Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
Publikace a užitečné odkazy
Obecné publikace
- Petricoin EF, Ardekani AM, Hitt BA, Levine PJ, Fusaro VA, Steinberg SM, Mills GB, Simone C, Fishman DA, Kohn EC, Liotta LA. Use of proteomic patterns in serum to identify ovarian cancer. Lancet. 2002 Feb 16;359(9306):572-7. doi: 10.1016/S0140-6736(02)07746-2.
- Chen B, Wen Y, Zhang Z, Guo Y, Warrington JA, Polan ML. Microarray analysis of differentially expressed genes in vaginal tissues from women with stress urinary incontinence compared with asymptomatic women. Hum Reprod. 2006 Jan;21(1):22-9. doi: 10.1093/humrep/dei276. Epub 2005 Aug 26.
- Mushkat Y, Bukovsky I, Langer R. Female urinary stress incontinence--does it have familial prevalence? Am J Obstet Gynecol. 1996 Feb;174(2):617-9. doi: 10.1016/s0002-9378(96)70437-4.
- Elia G, Bergman J, Dye TD. Familial incidence of urinary incontinence. Am J Obstet Gynecol. 2002 Jul;187(1):53-5. doi: 10.1067/mob.2002.124842.
- Hu S, Loo JA, Wong DT. Human body fluid proteome analysis. Proteomics. 2006 Dec;6(23):6326-53. doi: 10.1002/pmic.200600284.
- Ho L, Sharma N, Blackman L, Festa E, Reddy G, Pasinetti GM. From proteomics to biomarker discovery in Alzheimer's disease. Brain Res Brain Res Rev. 2005 Apr;48(2):360-9. doi: 10.1016/j.brainresrev.2004.12.025.
- Semmes OJ, Feng Z, Adam BL, Banez LL, Bigbee WL, Campos D, Cazares LH, Chan DW, Grizzle WE, Izbicka E, Kagan J, Malik G, McLerran D, Moul JW, Partin A, Prasanna P, Rosenzweig J, Sokoll LJ, Srivastava S, Srivastava S, Thompson I, Welsh MJ, White N, Winget M, Yasui Y, Zhang Z, Zhu L. Evaluation of serum protein profiling by surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry for the detection of prostate cancer: I. Assessment of platform reproducibility. Clin Chem. 2005 Jan;51(1):102-12. doi: 10.1373/clinchem.2004.038950.
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia
Primární dokončení (Aktuální)
Dokončení studie (Aktuální)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Odhadovaný)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další relevantní podmínky MeSH
- Symptomy chování
- Duševní poruchy
- Urologická onemocnění
- Příznaky dolních močových cest
- Urologické projevy
- Poruchy močení
- Poruchy eliminace
- Ženské urogenitální onemocnění
- Ženské urogenitální onemocnění a těhotenské komplikace
- Urogenitální onemocnění
- Mužská urogenitální onemocnění
- Únik moči
- Enuréza
- Inkontinence moči, stres
Další identifikační čísla studie
- EK 1788/2013
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .