Proteomisk mønster i kvinnelig stressurininkontinens: en pilotstudie
Mål: Hovedmålet med studien er sammenligning av proteinkonsentrasjoner mellom pasienter med stressurininkontinens (SUI) og friske kontroller.
Mål: Denne pilotstudien tar sikte på å bestemme en mulig endret proteinprofil hos kvinner som lider av SUI, sammenlignet med friske kvinner og derfor å diskriminere en potensiell proteinbiomarkør for SUI.
Hovedresultatmål: massespektrometrisk måling av urinproteomisk sekretom hos syke og friske personer (sekvensdekning og antall identifiserte proteiner)
Forsøksdesign: Prospektiv case-kontroll studie
Innstilling: Avdeling for gynekologi og obstetrikk ved det medisinske universitetet i Wien i samarbeid med kjernefasilitetene Proteomics ved det medisinske universitetet i Wien
Populasjon: Tjue kvinnelige pasienter med SUI og tjue friske pasienter som går på poliklinikken ved Obstetrisk og gynekologisk avdeling, Medical University of Vienna (prøvestørrelsesberegning FDR 0,05, styrke på 80 %, antatt andel sann H0 0,95, antatt standardisert effekt størrelse 1)
Metoder: Undersøkelser som skal utføres: pasientanamnese, provoserende stresstest, ICIQ-spørreskjema i kort form, resturinvolum (ultralyd) og urinanalyse (peilepinnetesting). En urinprøve tas fra pasienten etter spontan vannlating, som umiddelbart tilsettes proteasehemmer. To hetteglass med serumblod (hver på 9 ml) tas fra en perifer vene til pasienten for rutinemessig laboratorium og videre forskning.
Proteomikkanalyse vil bli utført ved bruk av kromatografisk separasjon (LC) med massespektrometrisk deteksjon (MS).
Studieoversikt
Status
Forhold
Intervensjon / Behandling
Detaljert beskrivelse
Metoder:
Prøveforberedelse og analyse vil omfatte:
- Prøvesamling og umiddelbar tilsetning av proteasehemmercocktail (Roche, Complete Protease Inhibitor Cocktail).
- Urinsentrifugering og -filtrering for fjerning av celleavfall.
- Proteinutfelling ved å bruke metanol/kloroform-separasjon for fjerning av alle mulige ikke-proteinholdige stoffer.
- Proteinfordøyelse ved å bruke trypsin i oppløsning, pepsin og Glu-C.
Peptidseparasjon ved bruk av nano-HPLC og forskjellige kromatografiske tilnærminger.
- Reversert fase (RP) separasjon av peptider og MS-deteksjon
- Separasjon av peptider ved hjelp av HILIC (hydrofil interaksjonsvæskekromatografi) for diskriminering av polare peptider.
- I tillegg til RP og HILIC direkte koblet til MS, vil fordøyde peptider separeres ved hjelp av flerdimensjonale tilnærminger. Svake anionbytterkolonner operert under HILIC-forhold vil bli brukt til å skille peptider som bærer posttranslasjonelle modifikasjoner som fosforylering eller acetylering, og dermed øke det dynamiske deteksjonsområdet. Under denne separasjonen vil fraksjoner bli samlet og re-injisert på RP og HILIC med MS-deteksjon.
- Alle nano-HPLC-separasjoner vil bli utført ved bruk av biokompatibelt separasjonssystem.
Massespektrometrisk analyse av fordøyde peptider vil bli utført ved bruk av to forskjellige deteksjonsmetoder: ione-felle og time-of-flight (qToF) MS. qToF massespektrometrisk deteksjon og analyse vil også bli brukt for merkingfri kvantifisering av peptider og proteiner påvist i prøver. Alle målinger vil bli utført i tre eksemplarer for å gi korreksjoner for teknisk variasjon av separasjon og ionisering.
Generelt databasesøk vil bli utført ved å bruke Human SwissProt-databasen i den faktiske versjonen på analysetidspunktet. Datasøk vil bli utført med Mascot (http://www.matrixscience.com/) og X!Tandem (http://www.thegpm.org/tandem/) søkemaskiner, og den endelige dataallokeringen og filtreringen ved å bruke Scaffold (www.proteomsoftware.com).
Statistisk analyse:
Dataanalyse vil bli utført med biolederpakken limma. Før dataanalyse vil data filtreres ved å ekskludere proteiner med målinger med lavt interkvartilområde. Grupper vil bli sammenlignet med moderert paret t-statistikk som justerer for alder. Justering for flere tester vil bli gjort av Benjamini-Hochberg-korreksjon som kontrollerer FDR til 0,05.
Studietype
Registrering (Faktiske)
Kontakter og plasseringer
Studiesteder
-
-
-
Vienna, Østerrike, 1090
- Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
-
-
Deltakelseskriterier
Kvalifikasjonskriterier
Alder som er kvalifisert for studier
Tar imot friske frivillige
Prøvetakingsmetode
Studiepopulasjon
Beskrivelse
Inklusjonskriterier:
- pasienter med stressurinkontinens: en historie med symptomer på stressurinkontinens i minst 3 måneder (inkludert anamnestiske klager på ufrivillig lekkasje ved anstrengelse eller anstrengelse eller ved nysing eller hosting) og en positiv provoserende stresstest (definert som et observert transuretralt tap av urin som var samtidig med hoste eller Valsalva-manøver med et blærevolum på 300 ml eller mindre)
- pasienter som er i stand til å arbeide selvstendig
- pasienter som er i stand til å forstå alle studieprosedyrer fullt ut og gi skriftlig informert samtykke til studiedeltakelse
- alder ≥ 18
- pasienter etter vaginal fødsel
Ekskluderingskriterier:
- pasienter som tidligere har blitt behandlet for SUI (både kirurgisk eller farmakologisk behandling)
- pasienter som har en sykehistorie med ukontrollert overaktiv blære (OAB) eller annen urininkontinens enn SUI (inkludert anamnestiske klager på ufrivillig urinlekkasje ledsaget av eller umiddelbart forut for haste, ikke stressindusert)
- pasienter med veletablert nevrologisk lidelse (f. Multippel sklerose, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom)
- pasienter med bekkenorganprolaps stadium ≥ II (ICS-klassifisering)
- pasienter med en klinisk signifikant obstruksjon av blæreutløpet og/eller pasienter med et postvoid restvolum (PVR) > 100 ml
- pasienter med en historie med akutt urinretensjon eller historie med gjentatte kateteriseringer på grunn av akutt urinretensjon i løpet av de siste 3 månedene før dagen for informert samtykke
- pasienter med inneliggende kateter og pasienter som praktiserer intermitterende selvkateterisering
- pasienter som har gjennomgått en blærebiopsi eller andre mindre bekkenkirurgiske inngrep mindre enn 30 dager før dagen for informert samtykke
- pasienter med en historie med blærekreft
- pasienter med akutt eller tilbakevendende urinveisinfeksjon og/eller uforklarlig hematuri
- pasienter med stein(er) i blæren eller urinrøret og steinsykdom i øvre del av kanalen som forårsaker symptomer
- pasienter med tegn på nyresvikt (kreatinin > 1,5x øvre normalgrense)
- pasienter med tegn på leversykdom (total bilirubin >1,5x øvre normalgrense, eller ASAT eller ALAT eller alkalisk fosfatase >2x øvre normalgrense)
- pasienter med en historie med alkohol og/eller andre rusmidler
- pasienter som ikke er i stand til og/eller usannsynlig å forstå og følge studieprosedyrene og instruksjonene
- pasienter som er gravide eller ammende
- pasienter med alvorlige medisinske tilstander som etter etterforskernes mening ikke bør delta i denne studien
Kontrollgruppen er representert av pasienter med samme inklusjons- og eksklusjonskriterier som casegruppen, bortsett fra stressurininkontinens.
Studieplan
Hvordan er studiet utformet?
Designdetaljer
Kohorter og intervensjoner
Gruppe / Kohort |
Intervensjon / Behandling |
|---|---|
|
stressurininkontinens
Pasienter med anstrengelsesurinkontinens i henhold til inklusjons- og eksklusjonskriteriene
|
|
|
sunne kontroller
friske kvinner med samme inklusjons- og eksklusjonskriterier som casegruppen, bortsett fra anstrengelsesurininkontinens
|
Hva måler studien?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
massespektrometrisk måling av urinproteomisk sekretom hos syke og friske personer (sekvensdekning og antall identifiserte proteiner)
Tidsramme: Det primære utfallsmålet vil bli vurdert for hver deltaker i en tidsramme på 4-7 dager etter rekruttering
|
Sammenligning av proteinkonsentrasjoner basert på antall identifiserte proteiner og massespektrometrisk spektraltall for pasienter med stressurininkontinens og friske kontroller.
|
Det primære utfallsmålet vil bli vurdert for hver deltaker i en tidsramme på 4-7 dager etter rekruttering
|
Samarbeidspartnere og etterforskere
Sponsor
Etterforskere
- Hovedetterforsker: Heinz Kölbl, Univ.-Prof.Dr.Dr.h.c., Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
Publikasjoner og nyttige lenker
Generelle publikasjoner
- Petricoin EF, Ardekani AM, Hitt BA, Levine PJ, Fusaro VA, Steinberg SM, Mills GB, Simone C, Fishman DA, Kohn EC, Liotta LA. Use of proteomic patterns in serum to identify ovarian cancer. Lancet. 2002 Feb 16;359(9306):572-7. doi: 10.1016/S0140-6736(02)07746-2.
- Chen B, Wen Y, Zhang Z, Guo Y, Warrington JA, Polan ML. Microarray analysis of differentially expressed genes in vaginal tissues from women with stress urinary incontinence compared with asymptomatic women. Hum Reprod. 2006 Jan;21(1):22-9. doi: 10.1093/humrep/dei276. Epub 2005 Aug 26.
- Mushkat Y, Bukovsky I, Langer R. Female urinary stress incontinence--does it have familial prevalence? Am J Obstet Gynecol. 1996 Feb;174(2):617-9. doi: 10.1016/s0002-9378(96)70437-4.
- Elia G, Bergman J, Dye TD. Familial incidence of urinary incontinence. Am J Obstet Gynecol. 2002 Jul;187(1):53-5. doi: 10.1067/mob.2002.124842.
- Hu S, Loo JA, Wong DT. Human body fluid proteome analysis. Proteomics. 2006 Dec;6(23):6326-53. doi: 10.1002/pmic.200600284.
- Ho L, Sharma N, Blackman L, Festa E, Reddy G, Pasinetti GM. From proteomics to biomarker discovery in Alzheimer's disease. Brain Res Brain Res Rev. 2005 Apr;48(2):360-9. doi: 10.1016/j.brainresrev.2004.12.025.
- Semmes OJ, Feng Z, Adam BL, Banez LL, Bigbee WL, Campos D, Cazares LH, Chan DW, Grizzle WE, Izbicka E, Kagan J, Malik G, McLerran D, Moul JW, Partin A, Prasanna P, Rosenzweig J, Sokoll LJ, Srivastava S, Srivastava S, Thompson I, Welsh MJ, White N, Winget M, Yasui Y, Zhang Z, Zhu L. Evaluation of serum protein profiling by surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry for the detection of prostate cancer: I. Assessment of platform reproducibility. Clin Chem. 2005 Jan;51(1):102-12. doi: 10.1373/clinchem.2004.038950.
Studierekorddatoer
Studer hoveddatoer
Studiestart
Primær fullføring (Faktiske)
Studiet fullført (Faktiske)
Datoer for studieregistrering
Først innsendt
Først innsendt som oppfylte QC-kriteriene
Først lagt ut (Antatt)
Oppdateringer av studieposter
Sist oppdatering lagt ut (Faktiske)
Siste oppdatering sendt inn som oppfylte QC-kriteriene
Sist bekreftet
Mer informasjon
Begreper knyttet til denne studien
Ytterligere relevante MeSH-vilkår
- Atferdssymptomer
- Psykiske lidelser
- Urologiske sykdommer
- Nedre urinveissymptomer
- Urologiske manifestasjoner
- Vannlatingsforstyrrelser
- Eliminasjonsforstyrrelser
- Kvinnelige urogenitale sykdommer
- Kvinnelige urogenitale sykdommer og graviditetskomplikasjoner
- Urogenitale sykdommer
- Mannlige urogenitale sykdommer
- Urininkontinens
- Enuresis
- Urininkontinens, stress
Andre studie-ID-numre
- EK 1788/2013
Denne informasjonen ble hentet direkte fra nettstedet clinicaltrials.gov uten noen endringer. Hvis du har noen forespørsler om å endre, fjerne eller oppdatere studiedetaljene dine, vennligst kontakt register@clinicaltrials.gov. Så snart en endring er implementert på clinicaltrials.gov, vil denne også bli oppdatert automatisk på nettstedet vårt. .