Эта страница была переведена автоматически, точность перевода не гарантируется. Пожалуйста, обратитесь к английской версии для исходного текста.

Протеомный паттерн стрессового недержания мочи у женщин: пилотное исследование

13 марта 2024 г. обновлено: Marianne Koch, Medical University of Vienna

Цель: основной целью исследования является сравнение концентраций белка между пациентами со стрессовым недержанием мочи (СНМ) и здоровыми людьми из контрольной группы.

Цель: это пилотное исследование направлено на определение возможного измененного белкового профиля у женщин, страдающих СНМ, по сравнению со здоровыми женщинами и, следовательно, на выявление потенциального белкового биомаркера СНМ.

Основная мера результата: масс-спектрометрическое измерение протеомного секретома мочи у больных и здоровых субъектов (охват последовательностей и количество идентифицированных белков)

Дизайн исследования: проспективное исследование случай-контроль

Место проведения: Кафедра гинекологии и акушерства Венского медицинского университета в сотрудничестве с Центром протеомики основных учреждений Венского медицинского университета

Популяция: Двадцать пациенток с СНМ и двадцать здоровых пациентов, которые посещают поликлинику отделения акушерства и гинекологии Венского медицинского университета (расчет размера выборки FDR 0,05, мощность 80%, предполагаемая доля истинного H0 0,95, предполагаемый стандартизированный эффект). размер 1)

Методы: Проведенные обследования: анамнез, провокационный стресс-тест, краткая анкета ICIQ, объем остаточной мочи (УЗИ) и анализ мочи (тест с полосками). Образец мочи берется у пациента после самопроизвольного мочеиспускания, к которому немедленно добавляется ингибитор протеазы. Два флакона сыворотки крови (каждый по 9 мл) берут из периферической вены пациента для рутинных лабораторных и дальнейших исследований.

Протеомный анализ будет проводиться с использованием хроматографического разделения (ЖХ) с масс-спектрометрическим детектированием (МС).

Обзор исследования

Статус

Завершенный

Условия

Вмешательство/лечение

Подробное описание

Методы:

Подготовка и анализ проб включают:

  1. Сбор проб и немедленное добавление коктейля ингибиторов протеазы (Roche, Complete Protease Inhibitor Cocktail).
  2. Центрифугирование и фильтрация мочи для удаления клеточного дебриса.
  3. Осаждение белков путем разделения метанола и хлороформа для удаления всех возможных небелковых веществ.
  4. Расщепление белков с применением трипсина, пепсина и Glu-C в растворе.

  5. Разделение пептидов с помощью нано-ВЭЖХ и различных хроматографических подходов.

    1. Обращенно-фазовое (ОФ) разделение пептидов и обнаружение МС
    2. Разделение пептидов с использованием HILIC (гидрофильной жидкостной хроматографии) для распознавания полярных пептидов.
    3. В дополнение к RP и HILIC, непосредственно связанным с MS, расщепленные пептиды будут разделены с использованием многомерных подходов. Колонки со слабым анионообменом, работающие в условиях HILIC, будут использоваться для разделения пептидов, несущих посттрансляционные модификации, такие как фосфорилирование или ацетилирование, что увеличивает динамический диапазон обнаружения. Во время этого разделения фракции будут собираться и повторно вводиться в RP и HILIC с МС-детектированием.
    4. Все разделения с помощью нано-ВЭЖХ будут выполняться с использованием биосовместимой системы разделения.

Масс-спектрометрический анализ расщепленных пептидов будет проводиться с использованием двух различных методов обнаружения: ионной ловушки и времяпролетной (qToF) МС. Масс-спектрометрическое обнаружение и анализ qToF также будут использоваться для безметочного количественного определения пептидов и белков, обнаруженных в образцах. Все измерения будут выполнены в трех экземплярах для внесения поправок на техническую изменчивость разделения и ионизации.

Общий поиск в базе данных будет выполняться с использованием базы данных Human SwissProt в ее актуальной версии на момент анализа. Поиск данных будет осуществляться с помощью Mascot (http://www.matrixscience.com/) и X!Tandem (http://www.thegpm.org/tandem/) поисковые машины, а также окончательное размещение и фильтрация данных с помощью Scaffold (www.proteomsoftware.com).

Статистический анализ:

Анализ данных будет проводиться с помощью пакета биокондукторов limma. Перед анализом данных данные будут отфильтрованы путем исключения белков с измерениями с низким межквартильным диапазоном. Группы будут сравниваться по модерируемой парной t-статистике с поправкой на возраст. Корректировка для многократного тестирования будет сделана поправкой Бенджамини-Хохберга, контролирующей FDR на уровне 0,05.

Тип исследования

Наблюдательный

Регистрация (Действительный)

40

Контакты и местонахождение

В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.

Места учебы

  • Австрия
      • Vienna, Австрия, 1090
        • Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology

Критерии участия

Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.

Критерии приемлемости

Возраст, подходящий для обучения

18 лет и старше (Взрослый, Пожилой взрослый)

Принимает здоровых добровольцев

Да

Метод выборки

Невероятностная выборка

Исследуемая популяция

Участники будут набраны из поликлиники урогинекологии и общей гинекологии отделения акушерства и гинекологии Медицинского университета Вены.

Описание

Критерии включения:

  • пациенты со стрессовым недержанием мочи: симптомы стрессового недержания мочи в анамнезе в течение как минимум 3 месяцев (включая анамнестические жалобы на непроизвольное подтекание мочи при усилии или нагрузке, чихании или кашле) и положительный провокационный нагрузочный тест (определяемый как наблюдаемая трансуретральная потеря мочевого пузыря). моча, которая была одновременно с кашлем или пробой Вальсальвы при объеме мочевого пузыря 300 мл или менее)
  • пациенты, способные к самостоятельному труду
  • пациенты, способные полностью понять все процедуры исследования и дать письменное информированное согласие на участие в исследовании
  • возраст ≥ 18 лет
  • пациентки после вагинальных родов

Критерий исключения:

  • пациенты, которые ранее лечились от SUI (как хирургическое, так и фармакологическое лечение)
  • пациенты, имеющие в анамнезе неконтролируемый гиперактивный мочевой пузырь (ГМП) или недержание мочи, отличное от СНМ (включая жалобы в анамнезе на непроизвольное подтекание мочи, сопровождающееся или непосредственно предшествующее императивным позывам, не вызванное стрессом)
  • пациенты с хорошо установленным неврологическим расстройством (например, рассеянный склероз, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера)
  • пациенты с пролапсом тазовых органов ≥ II стадии (классификация ICS)
  • пациенты с клинически значимой инфравезикальной обструкцией и/или пациенты с остаточным объемом после мочеиспускания (PVR) > 100 мл
  • пациенты с острой задержкой мочи в анамнезе или повторными катетеризациями в связи с острой задержкой мочи в течение последних 3 месяцев до дня получения информированного согласия
  • пациенты с постоянным катетером и пациенты, практикующие прерывистую самокатетеризацию
  • пациенты, перенесшие биопсию мочевого пузыря или любое другое малое хирургическое вмешательство на органах малого таза менее чем за 30 дней до дня получения информированного согласия
  • пациенты с раком мочевого пузыря в анамнезе
  • пациенты с острой или рецидивирующей инфекцией мочевыводящих путей и/или необъяснимой гематурией
  • пациенты с камнями в мочевом пузыре или уретре и мочекаменной болезнью верхних мочевых путей, вызывающие симптомы
  • пациенты с признаками почечной недостаточности (креатинин > 1,5x верхней границы нормы)
  • пациенты с признаками заболевания печени (общий билирубин более чем в 1,5 раза выше верхней границы нормы, или АСТ, АЛТ или щелочная фосфатаза более чем в 2 раза выше верхней границы нормы)
  • пациенты с историей злоупотребления алкоголем и / или другими наркотиками
  • пациенты, которые не могут и/или вряд ли смогут понять и следовать процедурам исследования и инструкциям
  • пациенты, которые беременны или кормят грудью
  • пациенты с серьезными заболеваниями, которые, по мнению исследователей, не должны участвовать в этом исследовании.

Контрольная группа представлена ​​пациентами с теми же критериями включения и исключения, что и основная группа, за исключением стрессового недержания мочи.

Учебный план

В этом разделе представлена ​​подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.

Как устроено исследование?

Детали дизайна

Когорты и вмешательства

Группа / когорта
Вмешательство/лечение
стрессовое недержание мочи
Пациенты со стрессовым недержанием мочи в соответствии с критериями включения и исключения
Другой: сбор мочи и крови
здоровый контроль
здоровые женщины с теми же критериями включения и исключения, что и группа случаев, за исключением стрессового недержания мочи.
Другой: сбор мочи и крови

Что измеряет исследование?

Первичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
масс-спектрометрическое измерение протеомного секретома мочи у больных и здоровых субъектов (охват последовательностей и количество идентифицированных белков)
Временное ограничение: Первичный показатель результата будет оцениваться для каждого участника в течение 4-7 дней после набора.
Сравнение концентраций белка на основе количества идентифицированных белков и масс-спектрометрического спектрального подсчета для пациентов со стрессовым недержанием мочи и здоровых людей.
Первичный показатель результата будет оцениваться для каждого участника в течение 4-7 дней после набора.

Соавторы и исследователи

Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.

Спонсор

Medical University of Vienna

Следователи

  • Главный следователь: Heinz Kölbl, Univ.-Prof.Dr.Dr.h.c., Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology

Публикации и полезные ссылки

Лицо, ответственное за внесение сведений об исследовании, добровольно предоставляет эти публикации. Это может быть что угодно, связанное с исследованием.

Общие публикации

Даты записи исследования

Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.

Изучение основных дат

Начало исследования

1 ноября 2013 г.

Первичное завершение (Действительный)

1 апреля 2015 г.

Завершение исследования (Действительный)

1 сентября 2015 г.

Даты регистрации исследования

Первый отправленный

18 ноября 2013 г.

Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества

23 декабря 2013 г.

Первый опубликованный (Оцененный)

30 декабря 2013 г.

Обновления учебных записей

Последнее опубликованное обновление (Действительный)

15 марта 2024 г.

Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества

13 марта 2024 г.

Последняя проверка

1 марта 2024 г.

Дополнительная информация

Термины, связанные с этим исследованием

Ключевые слова

Дополнительные соответствующие термины MeSH

Другие идентификационные номера исследования

  • EK 1788/2013

Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .

Подписаться