Wzór proteomiczny w wysiłkowym nietrzymaniu moczu u kobiet: badanie pilotażowe
Cel: Głównym celem badania jest porównanie stężeń białek pomiędzy pacjentami z wysiłkowym nietrzymaniem moczu (WNM) i zdrowymi osobami z grupy kontrolnej.
Cel: To badanie pilotażowe ma na celu określenie możliwego zmienionego profilu białkowego u kobiet cierpiących na WNM w porównaniu ze zdrowymi kobietami, a tym samym rozróżnienie potencjalnego biomarkera białkowego dla WNM.
Główny wynik: pomiar spektrometrii mas sekrecji proteomicznej moczu u osób chorych i zdrowych (pokrycie sekwencji i liczba zidentyfikowanych białek)
Projekt badania: prospektywne badanie kliniczno-kontrolne
Otoczenie: Klinika Ginekologii i Położnictwa Uniwersytetu Medycznego w Wiedniu we współpracy z Zakładem Proteomiki Uniwersytetu Medycznego w Wiedniu
Populacja: 20 pacjentek z WNM i 20 zdrowych pacjentek leczących się w ambulatorium Kliniki Położnictwa i Ginekologii Uniwersytetu Medycznego w Wiedniu (wielkość próby obliczona FDR 0,05, moc 80%, przyjęto proporcję prawdziwego H0 0,95, przyjęto efekt standaryzowany rozmiar 1)
Metodyka: Badania do wykonania: wywiad, prowokacyjny test wysiłkowy, skrócony kwestionariusz ICIQ, objętość zalegającego moczu (USG) oraz analiza moczu (test paskowy). Od pacjenta pobierana jest próbka moczu po samoistnej mikcji, do której natychmiast dodaje się inhibitor proteazy. Z żyły obwodowej pacjenta pobiera się dwie fiolki krwi z surowicą (każda po 9 ml) do rutynowych badań laboratoryjnych i dalszych badań.
Analiza proteomiczna zostanie przeprowadzona z wykorzystaniem rozdziału chromatograficznego (LC) z detekcją spektrometrią mas (MS).
Przegląd badań
Status
Interwencja / Leczenie
Szczegółowy opis
Metody:
Przygotowanie i analiza próbek obejmie:
- Pobranie próbki i natychmiastowe dodanie koktajlu inhibitora proteazy (Roche, Complete Protease Inhibitor Cocktail).
- Odwirowanie i filtracja moczu w celu usunięcia resztek komórek.
- Wytrącanie białek poprzez zastosowanie separacji metanol/chloroform w celu usunięcia wszystkich możliwych substancji niebiałkowych.
- Trawienie białek przy użyciu trypsyny, pepsyny i Glu-C w roztworze.
Rozdzielanie peptydów przy użyciu nano HPLC i różnych podejść chromatograficznych.
- Rozdzielanie peptydów w odwróconej fazie (RP) i detekcja MS
- Rozdzielanie peptydów za pomocą HILIC (hydrofilowa chromatografia cieczowa z interakcjami) w celu rozróżnienia polarnych peptydów.
- Oprócz RP i HILIC bezpośrednio sprzężonych z MS, strawione peptydy zostaną rozdzielone przy użyciu podejść wielowymiarowych. Słabe kolumny anionowymienne pracujące w warunkach HILIC zostaną użyte do separacji peptydów niosących modyfikacje potranslacyjne, takie jak fosforylacja lub acetylacja, zwiększając w ten sposób dynamiczny zakres detekcji. Podczas tego rozdzielania frakcje będą zbierane i ponownie wstrzykiwane do RP i HILIC z detekcją MS.
- Wszystkie rozdziały nano HPLC zostaną przeprowadzone przy użyciu biokompatybilnego systemu rozdziału.
Analiza spektrometrii masowej strawionych peptydów zostanie przeprowadzona przy użyciu dwóch różnych metod wykrywania: pułapki jonowej i MS czasu przelotu (qToF). Wykrywanie i analiza metodą spektrometrii mas qToF będą również wykorzystywane do oznaczania ilościowego peptydów i białek wykrywanych w próbkach bez znaczników. Wszystkie pomiary zostaną wykonane trzykrotnie, aby zapewnić poprawki na techniczną zmienność separacji i jonizacji.
Ogólne przeszukiwanie bazy danych zostanie przeprowadzone przy użyciu Human SwissProt Database w wersji aktualnej w momencie analizy. Wyszukiwanie danych zostanie przeprowadzone przy użyciu Mascot (http://www.matrixscience.com/) i X!Tandem (http://www.thegpm.org/tandem/) wyszukiwarek oraz ostateczną alokację i filtrowanie danych za pomocą Scaffold (www.proteomsoftware.com).
Analiza statystyczna:
Analiza danych zostanie przeprowadzona za pomocą pakietu bioprzewodników limma. Przed analizą danych dane zostaną przefiltrowane poprzez wykluczenie białek z pomiarami o niskim rozstępie międzykwartylowym. Grupy zostaną porównane za pomocą moderowanych sparowanych statystyk t dostosowujących się do wieku. Korekta dla wielokrotnego testowania zostanie wykonana przez poprawkę Benjaminiego-Hochberga kontrolującą FDR na poziomie 0,05.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
-
Vienna, Austria, 1090
- Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Metoda próbkowania
Badana populacja
Opis
Kryteria przyjęcia:
- pacjenci z wysiłkowym nietrzymaniem moczu: objawy wysiłkowego nietrzymania moczu w wywiadzie przez co najmniej 3 miesiące (w tym anamnestyczne dolegliwości dotyczące mimowolnego wycieku podczas wysiłku lub kichania lub kaszlu) oraz dodatni wynik prowokacyjnego testu wysiłkowego (zdefiniowany jako obserwowana przezcewkowa utrata moczu) moczu, który był równoczesny z kaszlem lub próbą Valsalvy przy objętości pęcherza 300 ml lub mniejszej)
- pacjentów zdolnych do samodzielnej pracy
- pacjentów, którzy są w stanie w pełni zrozumieć wszystkie procedury badania i wyrazić pisemną świadomą zgodę na udział w badaniu
- wiek ≥ 18 lat
- pacjentki po porodzie siłami natury
Kryteria wyłączenia:
- pacjenci, którzy byli wcześniej leczeni z powodu WNM (zarówno chirurgicznie, jak i farmakologicznie)
- pacjenci z wywiadem medycznym dotyczącym niekontrolowanego pęcherza nadreaktywnego (OAB) lub nietrzymania moczu innego niż WNM (w tym skargi anamnestyczne dotyczące mimowolnego wycieku moczu, któremu towarzyszy parcia naglące lub bezpośrednio je poprzedzają, niespowodowane stresem)
- pacjenci z dobrze rozwiniętymi zaburzeniami neurologicznymi (np. stwardnienie rozsiane, choroba Parkinsona, choroba Alzheimera)
- pacjentki z wypadaniem narządów miednicy mniejszej stopnia ≥ II (klasyfikacja ICS)
- pacjenci z klinicznie istotną przeszkodą podpęcherzową i/lub pacjenci z objętością zalegającą po mikcji (PVR) > 100 ml
- pacjenci z ostrym zatrzymaniem moczu w wywiadzie lub powtarzanymi cewnikowaniami z powodu ostrego zatrzymania moczu w ciągu ostatnich 3 miesięcy przed dniem wyrażenia świadomej zgody
- pacjentów z założonym na stałe cewnikiem i pacjentów praktykujących okresowe samocewnikowanie
- pacjenci, którzy przeszli biopsję pęcherza moczowego lub inną drobną interwencję chirurgiczną w obrębie miednicy mniejszej niż 30 dni przed dniem wyrażenia świadomej zgody
- pacjentów z historią raka pęcherza moczowego
- u pacjentów z ostrym lub nawracającym zakażeniem dróg moczowych i (lub) niewyjaśnionym krwiomoczem
- pacjentów z kamieniami w pęcherzu moczowym lub cewce moczowej oraz chorobą kamicy górnych dróg oddechowych powodującą objawy
- pacjenci z objawami niewydolności nerek (kreatynina > 1,5x górna granica normy)
- pacjenci z objawami choroby wątroby (bilirubina całkowita >1,5x górna granica normy lub AspAT lub ALT lub fosfataza zasadowa >2x górna granica normy)
- pacjentów z historią nadużywania alkoholu i (lub) innych leków
- pacjentów, którzy nie są w stanie i/lub jest mało prawdopodobne, aby zrozumieli i postępowali zgodnie z procedurami i instrukcjami badania
- pacjentki w ciąży lub karmiące piersią
- pacjentów z poważnymi schorzeniami, którzy zdaniem badaczy nie powinni brać udziału w tym badaniu
Grupę kontrolną stanowią pacjenci spełniający takie same kryteria włączenia i wyłączenia jak grupa przypadku, z wyjątkiem wysiłkowego nietrzymania moczu.
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
Kohorty i interwencje
Grupa / Kohorta |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
wysiłkowe nietrzymanie moczu
Pacjenci zgłaszający się z wysiłkowym nietrzymaniem moczu zgodnie z kryteriami włączenia i wyłączenia
|
|
|
zdrowe kontrole
zdrowe kobiety z tymi samymi kryteriami włączenia i wyłączenia jak grupa przypadków, z wyjątkiem wysiłkowego nietrzymania moczu
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
pomiar spektrometrii masowej sekrecji proteomicznej moczu u osób chorych i zdrowych (pokrycie sekwencji i liczba zidentyfikowanych białek)
Ramy czasowe: Podstawowa miara wyniku zostanie oceniona dla każdego uczestnika w przedziale czasowym 4-7 dni po rekrutacji
|
Porównanie stężeń białek na podstawie liczby zidentyfikowanych białek i liczby widmowej spektrometrii mas u pacjentów z wysiłkowym nietrzymaniem moczu i zdrowych osób kontrolnych.
|
Podstawowa miara wyniku zostanie oceniona dla każdego uczestnika w przedziale czasowym 4-7 dni po rekrutacji
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Śledczy
- Główny śledczy: Heinz Kölbl, Univ.-Prof.Dr.Dr.h.c., Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology
Publikacje i pomocne linki
Publikacje ogólne
- Petricoin EF, Ardekani AM, Hitt BA, Levine PJ, Fusaro VA, Steinberg SM, Mills GB, Simone C, Fishman DA, Kohn EC, Liotta LA. Use of proteomic patterns in serum to identify ovarian cancer. Lancet. 2002 Feb 16;359(9306):572-7. doi: 10.1016/S0140-6736(02)07746-2.
- Chen B, Wen Y, Zhang Z, Guo Y, Warrington JA, Polan ML. Microarray analysis of differentially expressed genes in vaginal tissues from women with stress urinary incontinence compared with asymptomatic women. Hum Reprod. 2006 Jan;21(1):22-9. doi: 10.1093/humrep/dei276. Epub 2005 Aug 26.
- Mushkat Y, Bukovsky I, Langer R. Female urinary stress incontinence--does it have familial prevalence? Am J Obstet Gynecol. 1996 Feb;174(2):617-9. doi: 10.1016/s0002-9378(96)70437-4.
- Elia G, Bergman J, Dye TD. Familial incidence of urinary incontinence. Am J Obstet Gynecol. 2002 Jul;187(1):53-5. doi: 10.1067/mob.2002.124842.
- Hu S, Loo JA, Wong DT. Human body fluid proteome analysis. Proteomics. 2006 Dec;6(23):6326-53. doi: 10.1002/pmic.200600284.
- Ho L, Sharma N, Blackman L, Festa E, Reddy G, Pasinetti GM. From proteomics to biomarker discovery in Alzheimer's disease. Brain Res Brain Res Rev. 2005 Apr;48(2):360-9. doi: 10.1016/j.brainresrev.2004.12.025.
- Semmes OJ, Feng Z, Adam BL, Banez LL, Bigbee WL, Campos D, Cazares LH, Chan DW, Grizzle WE, Izbicka E, Kagan J, Malik G, McLerran D, Moul JW, Partin A, Prasanna P, Rosenzweig J, Sokoll LJ, Srivastava S, Srivastava S, Thompson I, Welsh MJ, White N, Winget M, Yasui Y, Zhang Z, Zhu L. Evaluation of serum protein profiling by surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry for the detection of prostate cancer: I. Assessment of platform reproducibility. Clin Chem. 2005 Jan;51(1):102-12. doi: 10.1373/clinchem.2004.038950.
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Szacowany)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
- Objawy behawioralne
- Zaburzenia psychiczne
- Choroby Urologiczne
- Objawy dolnych dróg moczowych
- Manifestacje urologiczne
- Zaburzenia oddawania moczu
- Zaburzenia eliminacji
- Choroby układu moczowo-płciowego kobiet
- Choroby układu moczowo-płciowego kobiet i powikłania ciąży
- Choroby układu moczowo-płciowego
- Choroby układu moczowo-płciowego u mężczyzn
- Niemożność utrzymania moczu
- Moczenie mimowolne
- Nietrzymanie moczu, stres
Inne numery identyfikacyjne badania
- EK 1788/2013
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .