Voie apoptotique mitochondriale induite par une lésion d'ischémie-reperfusion myocardique chez l'homme

Contexte : L'apoptose des cardiomyocytes induite par l'ischémie-reperfusion (I/R) est l'un des facteurs les plus importants dans la lésion myocardique I/R (MIRI) subissant un remplacement de valve cardiaque par circulation extracorporelle (CVRCPB) et le postconditionnement ischémique (I-postC ) peut inhiber l'apoptose des cellules myocardiques. Par conséquent, cette étude a examiné les gènes clés et les voies de signalisation de l'apoptose du myocarde chez les patients subissant un CVRCPB.

Méthodes : Un total de 36 patients de classe II ou III de la New York Heart Association atteints de cardiopathie rhumatismale (RHD) des deux sexes, âgés de 21 à 59 ans, qui devaient subir un premier remplacement de valve cardiaque par CPB à l'hôpital des investigateurs à partir de février 2014 à mai 2015, ont été répartis au hasard dans les trois groupes suivants (n = 12 chacun) : groupe témoin négatif (groupe NEG) ; groupe I/R (groupe POS); et groupe I-postC (groupe Traiter). Dans le groupe Treat, la procédure impliquait 5 min avant l'ouverture de l'aorte ascendante, un desserrage aortique pendant 30 s et un clampage croisé pendant 30 s pendant trois cycles, après quoi l'aorte ascendante était complètement ouverte. Les groupes NEG et Treat n'ont pas été traités. Trente-six patients ont été évalués pour l'arythmie et la récupération de la fonction contractile du myocarde après reperfusion par des électrocardiogrammes et le degré de dépendance aux médicaments vasoactifs. Les tissus myocardiques de l'appendice auriculaire droit ont été obtenus 3 min avant l'établissement de la CPB dans le groupe NEG et 45 min après l'ouverture de l'aorte dans les groupes POS et Treat. Dans les trois groupes, les tissus myocardiques de l'appendice auriculaire droit ont été obtenus et conservés à -80°C pour d'autres expériences. L'appendice auriculaire droit de trois patients sélectionnés au hasard dans chaque groupe a été fixé ultérieurement avec de l'ARN (Qiagen, Hilden, Allemagne) dans un tube à centrifuger pendant une nuit à 4 ° C, puis conservé à -20 ° C pour l'extraction de l'ARN. Le profilage de l'expression de l'ARNm par la matrice de gènes humains 12 × 135 K a été entrepris dans des cellules musculaires cardiaques humaines. Les ARNm différentiellement exprimés vérifiés par RT-PCR quantitative en temps réel ont été soumis à une analyse des voies. Les expressions d'ARNm de AIF, APAF1, CYCS, Bax, caspase-3, caspase-9, caspase-6, caspase-7, BCL2, BAG1 et PI3K ont été évaluées par RT-PCR en temps réel et analyse Western blot. Les niveaux d'apoptose myocardique induits par l'I/R ont été étudiés par des dosages TUNEL. Les changements de MIRI induits par l'apoptose myocardique ont été étudiés par un examen pathologique du myocarde.