Vía apoptótica mitocondrial inducida por lesión por isquemia-reperfusión miocárdica en humanos

Antecedentes: La apoptosis de los cardiomiocitos inducida por isquemia-reperfusión (I/R) es uno de los factores más importantes en la lesión miocárdica por I/R (MIRI) sometida a reemplazo valvular cardíaco con derivación cardiopulmonar (CVRCPB) y poscondicionamiento isquémico (I-postC ) puede inhibir la apoptosis de las células miocárdicas. En consecuencia, este estudio investigó los genes clave y las vías de señalización de la apoptosis del miocardio en pacientes sometidos a CVRCPB.

Métodos: Un total de 36 pacientes de clase II o III de la New York Heart Association con cardiopatía reumática (RHD) de ambos sexos, de 21 a 59 años de edad, que estaban programados para el primer reemplazo de válvula cardíaca con CEC en el hospital de investigadores desde febrero de 2014 hasta mayo de 2015, se dividieron aleatoriamente en los siguientes tres grupos (n=12 cada uno): grupo de control negativo (grupo NEG); grupo I/R (grupo POS); y grupo I-postC (grupo de tratamiento). En el grupo Tratar, el procedimiento implicó 5 min antes de abrir la aorta ascendente, despinzamiento aórtico durante 30 s y pinzamiento cruzado durante 30 s durante tres ciclos, después de lo cual la aorta ascendente se abrió por completo. Los grupos NEG y Treat no fueron tratados. Treinta y seis pacientes fueron evaluados por arritmia y recuperación de la función contráctil del miocardio tras la reperfusión mediante electrocardiogramas y grado de dependencia a fármacos vasoactivos. Los tejidos miocárdicos de la orejuela de la aurícula derecha se obtuvieron 3 min antes de establecer la CEC en el grupo NEG y 45 min después de la apertura de la aorta en los grupos POS y Treat. En los tres grupos, los tejidos miocárdicos del apéndice auricular derecho se obtuvieron y conservaron a -80°C para experimentos posteriores. El apéndice auricular derecho de tres pacientes seleccionados aleatoriamente en cada grupo se fijó con ARN más tarde (Qiagen, Hilden, Alemania) en un tubo de centrífuga durante la noche a 4 °C y luego se conservó a -20 °C para la extracción de ARN. El perfil de la matriz de genes 12x135K humana de las expresiones de ARNm se llevó a cabo en células musculares cardíacas humanas. Los ARNm expresados ​​diferencialmente verificados mediante RT-PCR cuantitativa en tiempo real se sometieron a análisis de vía. Las expresiones de ARNm de AIF, APAF1, CYCS, Bax, caspasa-3, caspasa-9, caspasa-6, caspasa-7, BCL2, BAG1 y PI3K se evaluaron mediante RT-PCR en tiempo real y análisis de transferencia Western. Los niveles de apoptosis miocárdica inducida por I/R se investigaron mediante ensayos TUNEL. Los cambios en MIRI inducidos por la apoptosis miocárdica se investigaron mediante examen patológico del miocardio.