Mitokondriell apoptotisk bane indusert av myokardisk iskemi-reperfusjonsskade hos mennesker

Bakgrunn: Kardiomyocyttenes apoptose indusert av iskemi-reperfusjon (I/R) er en av de viktigste faktorene i den myokardielle I/R-skaden (MIRI) som gjennomgår hjerteklafferstatning med kardiopulmonal bypass (CVRCPB), og iskemisk postkondisjonering (I-postC). ) kan hemme apoptose av myokardceller. Følgelig undersøkte denne studien nøkkelgenene og apoptosesignalveiene til myokard hos pasienter som gjennomgikk CVRCPB.

Metoder: Totalt 36 New York Heart Association klasse II eller III pasienter med revmatisk hjertesykdom (RHD) av begge kjønn, i alderen 21-59 år, som var planlagt for første hjerteklafferstatning med CPB på etterforskernes sykehus fra februar 2014 til mai 2015, ble tilfeldig delt inn i følgende tre grupper (n=12 hver): negativ kontrollgruppe (NEG-gruppe); I/R-gruppe (POS-gruppe); og I-postC gruppe (Treat group). I Treat-gruppen innebar prosedyren 5 minutter før åpning av den ascenderende aorta, aortaavspenning i 30 s og kryssklemming i 30 s i tre sykluser, hvoretter den stigende aorta ble helt åpnet. NEG- og Treat-gruppene ble ikke behandlet. Trettiseks pasienter ble vurdert for arytmi og gjenoppretting av myokardial kontraktil funksjon etter reperfusjon ved elektrokardiogrammer og grad av avhengighet av vasoaktive legemidler. Myokardvevet til høyre atrievedheng ble oppnådd 3 minutter før CPB ble etablert i NEG-gruppen, og 45 minutter etter åpning av aorta i POS- og Treat-gruppene. I alle tre gruppene ble myokardvevet til høyre atrievedheng oppnådd og bevart ved -80 °C for videre eksperimenter. Det høyre atrievedhenget til tre pasienter tilfeldig valgt i hver gruppe ble fiksert med RNA senere (Qiagen, Hilden, Tyskland) i et sentrifugerør over natten ved 4 °C, og deretter konservert ved -20 °C for RNA-ekstraksjon. Human 12×135K Gene Array-profilering av mRNA-uttrykk ble utført i humane hjertemuskelceller. Differensielt uttrykte mRNA-er verifisert ved kvantitativ sanntids RT-PCR ble utsatt for baneanalyse. mRNA-uttrykkene til AIF, APAF1, CYCS, Bax, caspase-3, caspase-9, caspase-6, caspase-7, BCL2, BAG1 og PI3K ble vurdert ved sanntids RT-PCR og western blot-analyse. Nivåene av myokard-apoptose indusert av I/R ble undersøkt med TUNEL-analyser. Endringene i MIRI indusert av myokardial apoptose ble undersøkt ved patologisk undersøkelse av myokard.