Ihmisen sydänlihaksen iskemia-reperfuusiovaurion aiheuttama mitokondrioiden apoptoottinen reitti

Tausta: Iskemia-reperfuusion (I/R) indusoima sydänlihassolujen apoptoosi on yksi tärkeimmistä tekijöistä sydänlihaksen I/R-vauriossa (MIRI), jossa sydänläppä korvataan kardiopulmonaalisella ohitustoimenpiteellä (CVRCPB) ja iskeemisellä jälkihoitohoidolla (I-postC). ) voivat estää sydänlihassolujen apoptoosia. Näin ollen tässä tutkimuksessa tutkittiin sydänlihaksen keskeisiä geenejä ja apoptoosin signalointireittejä potilailla, joille tehtiin CVRCPB.

Menetelmät: Yhteensä 36 New York Heart Associationin luokan II tai III potilasta, joilla oli molempien sukupuolten reumaattinen sydänsairaus (RHD), iältään 21–59 vuotta, joille oli määrä tehdä ensimmäinen sydänläppävaihto CPB:llä tutkijoiden sairaalassa helmikuusta 2014 alkaen. toukokuuhun 2015, jaettiin satunnaisesti seuraaviin kolmeen ryhmään (n=12 kukin): negatiivinen kontrolliryhmä (NEG-ryhmä); I/R-ryhmä (POS-ryhmä); ja I-postC-ryhmä (hoitoryhmä). Treat-ryhmässä toimenpide sisälsi 5 minuuttia ennen nousevan aortan avaamista, aortan puristamisen 30 s ja ristikiinnittämistä 30 s kolmen syklin ajan, minkä jälkeen nouseva aortta avattiin kokonaan. NEG- ja Treat-ryhmiä ei hoidettu. Kolmekymmentäkuudesta potilaasta arvioitiin rytmihäiriöt ja sydänlihaksen supistumistoiminnan palautuminen reperfuusion jälkeen EKG-tutkimuksilla ja riippuvuuden astetta vasoaktiivisista lääkkeistä. Oikean eteisen lisäosan sydänkudokset saatiin 3 minuuttia ennen CPB:n perustamista NEG-ryhmässä ja 45 minuuttia aortan avaamisen jälkeen POS- ja Treat-ryhmissä. Kaikissa kolmessa ryhmässä oikean eteisen lisäosan sydänkudokset saatiin ja säilytettiin -80 °C:ssa lisäkokeita varten. Jokaisesta ryhmästä satunnaisesti valitun kolmen potilaan oikean eteisen lisäosa kiinnitettiin myöhemmin RNA:lla (Qiagen, Hilden, Saksa) sentrifugiputkessa yön yli 4 °C:ssa ja säilytettiin sitten -20 °C:ssa RNA:n uuttamista varten. Ihmisen 12 × 135K Gene Array -profilointi mRNA-ilmentymistä suoritettiin ihmisen sydänlihassoluissa. Kvantitatiivisella reaaliaikaisella RT-PCR:llä varmennetuille mRNA:ille suoritettiin reittianalyysi. AIF:n, APAF1:n, CYCS:n, Baxin, kaspaasi-3:n, kaspaasi-9:n, kaspaasi-6:n, kaspaasi-7:n, BCL2:n, BAG1:n ja PI3K:n mRNA-ekspressiot arvioitiin reaaliaikaisella RT-PCR- ja Western blot -analyysillä. I/R:n indusoiman sydänlihaksen apoptoosin tasoja tutkittiin TUNEL-määrityksillä. Sydänlihaksen apoptoosin aiheuttamia muutoksia MIRI:ssä tutkittiin sydänlihaksen patologisella tutkimuksella.