인간의 심근 허혈-재관류 손상에 의해 유도된 미토콘드리아 세포사멸 경로

배경: 허혈-재관류(I/R)에 의해 유도된 심근세포의 세포사멸은 심폐우회술(CVRCPB) 및 허혈성 후조건화(I-postC ) 심근 세포의 세포 사멸을 억제할 수 있습니다. 결과적으로, 본 연구는 CVRCPB를 겪는 환자에서 심근의 주요 유전자 및 세포사멸 신호 전달 경로를 조사하였다.

방법: 2014년 2월부터 조사 병원에서 CPB로 첫 번째 심장 판막 교체가 예정된 21-59세 남녀의 류마티스성 심장 질환(RHD)이 있는 총 36명의 New York Heart Association 클래스 II 또는 III 환자 2015년 5월까지 무작위로 다음 세 그룹으로 나누었습니다(각각 n=12): 음성 대조군(NEG 그룹); I/R 그룹(POS 그룹); 및 I-postC 그룹(치료 그룹). 처리군은 상행대동맥 개통 5분 전, 대동맥 언클램핑 30초, 크로스 클램핑 30초를 3주기로 한 후 상행대동맥을 완전히 개방하였다. NEG 및 처리 그룹은 처리되지 않았습니다. 36명의 환자에서 심전도에 의한 재관류 후 부정맥과 심근 수축 기능의 회복 및 혈관 작용 약물 의존도를 평가하였다. 우심방이의 심근조직은 NEG군은 CPB를 설치하기 3분 전, POS군과 Treat군은 대동맥개방 45분에 각각 채취하였다. 세 그룹 모두에서 우심방 부속기의 심근 조직을 채취하여 추가 실험을 위해 -80°C에서 보존했습니다. 각 그룹에서 무작위로 선택된 3명의 환자의 우심방이를 원심분리기 튜브에서 하룻밤 동안 RNA later(Qiagen, Hilden, Germany)로 4°C에서 고정한 다음 RNA 추출을 위해 -20°C에서 보존했습니다. 인간 심장 근육 세포에서 mRNA 발현의 인간 12×135K 유전자 어레이 프로파일링을 수행하였다. 정량적 실시간 RT-PCR에 의해 검증된 차별적으로 발현된 mRNA를 경로 분석에 적용하였다. AIF, APAF1, CYCS, Bax, caspase-3, caspase-9, caspase-6, caspase-7, BCL2, BAG1 및 PI3K의 mRNA 발현을 실시간 RT-PCR 및 western blot 분석으로 평가하였다. I/R에 의해 유도된 심근 세포사멸의 수준을 TUNEL 분석으로 조사하였다. 심근의 세포사멸에 의해 유발된 MIRI의 변화를 심근의 병리학적 검사로 조사하였다.