Dd-cfDNA et Treg dans la prédiction du rejet aigu de greffe de rein

Arrière-plan

Malgré les progrès de l'immunosuppression, la survie du greffon à 10 ans après une greffe de rein est restée stagnante à environ 50 %. Le diagnostic rapide du rejet aigu chez les greffés rénaux est essentiel pour améliorer la survie à long terme du greffon. La suspicion clinique de rejet aigu repose actuellement sur la surveillance de l'élévation de la créatinine sérique et la confirmation du diagnostic par une biopsie d'allogreffe rénale. L'élévation de la créatinine sérique, cependant, n'est pas spécifique du rejet aigu et est détectée après que des dommages immunologiques importants de l'allogreffe se soient déjà produits. La confirmation par biopsie est invasive, associée à un taux de complications majeures de 1 %, et soumise à un échantillonnage inadéquat ainsi qu'à la variance du lecteur expert. De nouvelles façons de surveiller et de diagnostiquer le rejet aigu avant une lésion immunologique de manière non invasive sont nécessaires dans le but d'améliorer la survie à long terme du greffon après une transplantation rénale. L'ADN acellulaire est normalement libéré dans la circulation sanguine lorsque les cellules subissent une apoptose ou une nécrose. Dans le contexte d'une transplantation rénale et de la présence d'une allogreffe, l'ADN acellulaire dérivé du donneur (dd-cfDNA) est continuellement versé dans la circulation sanguine du receveur en raison du renouvellement cellulaire de l'allogreffe et représente une petite fraction de la cellule totale. ADN libre (dérivé du donneur et du receveur). La fraction Dd-cfDNA est initialement élevée à la suite d'une lésion d'ischémie-reperfusion et diminue généralement jusqu'à un niveau de référence 10 à 14 jours après la transplantation rénale. Par la suite, des épisodes de lésion d'allogreffe tels qu'un rejet aigu entraînent une augmentation de la fraction dd-cfDNA dans la circulation sanguine du receveur. En utilisant la technologie de réaction en chaîne par polymérase multiplexée basée sur des polymorphismes mononucléotidiques et la bioinformatique avancée, la fraction dd-cfDNA plasmatique peut désormais être mesurée chez un receveur de greffe de rein sans avoir besoin d'un génotypage préalable du donneur ou du receveur. Des études récentes ont démontré que le plasma dd-cfDNA est une nouvelle méthode prometteuse pour détecter le rejet aigu avant une lésion immunologique de manière non invasive, car il est élevé à l'avance et au moment du rejet aigu prouvé par biopsie. Une fraction dd-cfDNA de coupure supérieure ou égale à 1 % était en mesure de prédire un rejet aigu avec des performances modérées à bonnes dans les études avec une aire sous les courbes (AUC) variant de 0,59 à 0,97 sur les analyses de la courbe des caractéristiques de fonctionnement du récepteur (ROC). Lors de l'examen du rejet aigu par mécanisme, la fraction dd-cfDNA semble avoir de meilleures performances prédictives pour le rejet médié par les anticorps (ABMR), tandis que son utilité pour prédire le rejet médié par les lymphocytes T (TCMR) reste équivoque, en particulier lorsqu'elle est de moindre gravité (moins que Banff 1B). Néanmoins, dans le TCMR de moindre gravité (Banff 1A ou subclinique), il a été démontré qu'une fraction dd-cfDNA supérieure ou égale à 0,5 % pouvait potentiellement identifier les receveurs de greffe de rein à risque de déclin plus prononcé du taux de filtration glomérulaire estimé (eGFR), développant de novo anticorps spécifique du donneur et futurs épisodes de rejet. Bien qu'il ait été approuvé pour une utilisation clinique par Medicare, plusieurs limites subsistent avec le dd-cfDNA dans la prédiction du rejet aigu. Premièrement, l'élévation du dd-cfDNA n'est pas spécifique au rejet, car d'autres complications médicales telles que les infections des voies urinaires, les infections systémiques et la néphropathie à virus BK peuvent également augmenter le dd-cfDNA. Deuxièmement, les performances prédictives du dd-cfDNA pour le TCMR, en particulier de moindre gravité, restent équivoques. Enfin, il n'est pas clair si la fraction dd-cfDNA précoce après une transplantation rénale peut prédire les futures lésions et fonctions immunologiques du greffon. De nouvelles façons de rendre le dd-cfDNA plus spécifique pour le rejet aigu, d'améliorer ses performances prédictives pour le TCMR et de le corréler avec la fonction future du greffon amélioreraient encore son utilité clinique. Les cellules T régulatrices (Tregs) sont essentielles dans l'induction et le maintien de la tolérance dans divers modèles animaux de transplantation rénale en supprimant les réponses immunitaires effectrices. Les Tregs constituent 5 à 10 % des lymphocytes T CD4+ et sont traditionnellement identifiés comme une population homogène avec une expression élevée de CD25, une faible expression de CD127 et une expression du facteur maître de transcription FoxP3. Des données récentes indiquent cependant que les Tregs sont plus hétérogènes et que l'expression de molécules supplémentaires par rapport aux traditionnels CD25, CD127 et FoxP3 influence leur activité fonctionnelle suppressive. Dans la transplantation rénale humaine, les CD4+CD25hiCD127lo/- Treg circulants après la greffe étaient similaires entre les receveurs qui souffraient d'un rejet aigu et ceux qui n'en souffraient pas. Cependant, l'expression élevée de HLA-DR sur les Tregs circulants post-transplantation, qui identifiait une population avec une activité fonctionnelle maximale suppressive, était plus faible chez les receveurs qui souffraient d'un rejet aigu. Une autre molécule identifiant une population de Treg avec une activité fonctionnelle suppressive maximale est TNFR2. TNFR2 médie la fonction biologique de la cytokine pro-inflammatoire TNF-a, qui est impliquée dans le recrutement et l'activation des lymphocytes T effecteurs lors du rejet de l'allogreffe. Fait intéressant, TNFR2 s'est avéré être préférentiellement exprimé sur les Treg par opposition aux lymphocytes T effecteurs. Dans les études murines et humaines, la signalisation du TNF-α via les Tregs TNFR2 + a augmenté leur survie, leur prolifération et leur activité fonctionnelle suppressive.

Résultats préliminaires Les investigateurs ont précédemment étudié les Tregs TNFR2+ dans le contexte spécifique de la transplantation rénale. Les chercheurs ont confirmé dans une cohorte de candidats à la transplantation rénale que l'expression de TNFR2 sur les Tregs était corrélée à la fonction suppressive mesurée via un test de co-culture traditionnel de Tregs avec des lymphocytes T effecteurs stimulés (r = 0,63, p<0,01). Dans une cohorte de 76 receveurs de greffe de rein de donneur décédé, les chercheurs ont publié sur le rôle des Tregs TNFR2+ circulants avant la greffe dans la prédiction de la fonction retardée et lente du greffon après une greffe de rein. Étant donné que la fonction retardée et lente du greffon sont des facteurs de risque connus pour le développement d'un rejet aigu après une transplantation rénale, les chercheurs ont ensuite examiné le rôle des Tregs TNFR2+ circulants du receveur avant la greffe dans la prédiction du rejet aigu dans la même cohorte de receveurs dont 75 avaient données disponibles sur le rejet aigu avec des résultats prometteurs, en particulier avec le TCMR de faible gravité.

Hypothèses

Étant donné que des études antérieures et les résultats préliminaires des chercheurs dans une cohorte comprenant principalement des TCMR de faible gravité suggèrent un rôle des Tregs HLA-DR + TNFR2 + dans la prédiction du rejet aigu, les chercheurs émettent l'hypothèse que l'intégrer à la fraction dd-cfDNA pourrait améliorer la spécificité et la capacité prédictive performances pour le rejet aigu, en particulier TCMR. Les chercheurs émettent également l'hypothèse que la mesure de la fraction dd-cfDNA précoce et des Tregs HLA-DR + TNFR2 + pré-transplantation pourrait prédire les résultats futurs après une transplantation rénale, y compris le rejet aigu et la fonction de greffe mesurée par eGFR.

Objectifs

1. Testez si l'intégration de la fraction dd-cfDNA avec HLA-DR + TNFR2 + Tregs à l'avance ou au moment de la lésion de l'allogreffe peut améliorer les performances prédictives du rejet aigu après une transplantation rénale.
2. Testez si l'intégration de la fraction dd-cfDNA à 2 semaines après la greffe avec les Tregs HLADR + TNFR2 + pré-transplantation peut prédire les futurs épisodes de rejet aigu et la fonction du greffon sur 1 an.

Les chercheurs recruteront 150 receveurs de greffe de rein adultes avec une couverture d'assurance pour la mesure de la fraction dd-cfDNA.