신장 이식 급성 거부반응의 예측에서 Dd-cfDNA 및 Treg

배경

면역 억제 기술의 발전에도 불구하고 신장 이식 후 10년 이식 생존율은 약 50%로 정체되어 있습니다. 신장 이식 수용자의 급성 거부반응을 시기 적절하게 진단하는 것은 장기 이식 생존율을 개선하는 데 필수적입니다. 급성 거부반응에 대한 임상적 의심은 현재 혈청 크레아티닌 상승 모니터링 및 신장 동종이식 생검을 통한 진단적 확인에 의존합니다. 그러나 혈청 크레아티닌 상승은 급성 거부반응에 대해 비특이적이며 동종이식에 상당한 면역학적 손상이 이미 발생한 후에 감지됩니다. 생검을 통한 확인은 침습적이며 1%의 주요 합병증 발생률과 관련이 있으며 부적절한 샘플링 및 전문 판독기 편차의 영향을 받습니다. 신장 이식 후 장기 이식 생존을 개선하기 위해서는 비침습적 방식으로 면역학적 손상 전에 급성 거부 반응을 모니터링하고 진단하는 새로운 방법이 필요합니다. 무세포 DNA는 일반적으로 세포가 세포 사멸 또는 괴사를 겪을 때 혈류로 방출됩니다. 신장 이식 및 동종이식의 맥락에서 기증자 유래 무세포 DNA(dd-cfDNA)는 동종이식 세포 회전율의 결과로 수혜자의 혈류로 지속적으로 유출되며 전체 세포의 작은 부분을 나타냅니다. 무료 DNA(기증자 및 수혜자 유래). Dd-cfDNA 분율은 처음에는 허혈-재관류 손상으로 인해 높고 일반적으로 신장 이식 후 10~14일에 기준선 수준으로 감소합니다. 결과적으로 급성 거부반응과 같은 동종이식편 손상의 에피소드는 수용자의 혈류로 들어가는 dd-cfDNA 분획의 증가로 이어집니다. 단일 뉴클레오티드 다형성 기반의 다중 폴리머라제 연쇄 반응 기술과 첨단 생물정보학을 사용하여 혈장 dd-cfDNA 분획을 이제 기증자 또는 수혜자의 사전 유전자형 분석 없이 신장 이식 수혜자에서 측정할 수 있습니다. 최근 연구에 따르면 혈장 dd-cfDNA는 사전에 그리고 생검으로 입증된 급성 거부반응 시에 상승하기 때문에 비침습적 방식으로 면역학적 손상 이전에 급성 거부반응을 감지하는 유망한 새로운 방법임을 입증했습니다. 1% 이상의 컷오프 dd-cfDNA 분율은 수신자 작동 특성(ROC) 곡선 분석에서 곡선 아래 면적(AUC)이 0.59 - 0.97인 연구에서 중등도에서 우수한 성능으로 급성 거부 반응을 예측할 수 있었습니다. 메커니즘에 의한 급성 거부 반응을 조사할 때, dd-cfDNA 분획은 항체 매개 거부반응(ABMR)에 대해 더 나은 예측 성능을 보이는 반면, T 세포 매개 거부반응(TCMR)을 예측하는 유틸리티는 특히 심각도가 낮을 ​​때 모호합니다(Banff보다 작음). 1B). 그럼에도 불구하고, 더 낮은 중증도의 TCMR(Banff 1A 또는 준임상)에서 0.5% 이상의 dd-cfDNA 분율은 예상 사구체 여과율(eGFR) 감소의 위험이 있는 신장 이식 수용자를 잠재적으로 식별하는 것으로 나타났습니다. 기증자 특정 항체 및 향후 거부 에피소드. Medicare의 임상 사용 승인에도 불구하고 dd-cfDNA에는 급성 거부 예측에 몇 가지 제한 사항이 남아 있습니다. 첫째, dd-cfDNA의 상승은 요로 감염, 전신 감염 및 BK 바이러스 신병증과 같은 다른 의학적 합병증도 dd-cfDNA를 증가시킬 수 있으므로 거부 특이적이지 않습니다. 둘째, 특히 낮은 심각도의 TCMR에 대한 dd-cfDNA의 예측 성능은 모호합니다. 마지막으로, 신장 이식 후 초기 dd-cfDNA 분획이 미래의 면역학적 이식편 손상 및 기능을 예측할 수 있는지 여부가 불분명합니다. dd-cfDNA를 급성 거부반응에 더 특이적으로 만들고, TCMR에 대한 예측 성능을 개선하고, 미래의 이식 기능과 연관시키는 새로운 방법은 임상적 유용성을 더욱 향상시킬 것입니다. 조절 T 세포(Tregs)는 이펙터 면역 반응을 억제함으로써 다양한 신장 이식 동물 모델에서 내성의 유도 및 유지에 필수적입니다. Treg는 CD4+ T 세포의 5 - 10%를 구성하며 전통적으로 CD25의 높은 발현, CD127의 낮은 발현 및 마스터 전사 인자 FoxP3의 발현을 가진 동종 집단으로 식별됩니다. 그러나 최근 데이터는 Treg가 더 이질적이며 전통적인 CD25, CD127 및 FoxP3보다 추가 분자의 발현이 억제 기능 활동에 영향을 미친다는 것을 나타냅니다. 인간 신장 이식에서 이식 후 순환 CD4+CD25hiCD127lo/- Treg는 급성 거부반응을 앓는 수용자와 그렇지 않은 수용자 간에 유사했습니다. 그러나 이식 후 순환 Treg에서 HLA-DR의 높은 발현은 급성 거부반응을 앓는 수용자에서 더 낮았습니다. 기능적 활성을 최대로 억제하는 Treg 집단을 식별하는 또 다른 분자는 TNFR2입니다. TNFR2는 동종이식 거부 동안 이펙터 T 세포의 모집 및 활성화에 관여하는 전 염증성 사이토카인 TNF-a의 ​​생물학적 기능을 매개합니다. 흥미롭게도, TNFR2는 이펙터 T 세포와 달리 Treg에서 우선적으로 발현되는 것으로 나타났습니다. 뮤린 및 인간 연구 모두에서 TNFR2+ Treg를 통한 TNF-α 신호는 이들의 생존, 증식 및 기능 억제 활성을 증가시켰습니다.

예비 결과 연구자들은 이전에 신장 이식의 특정 맥락에서 TNFR2+ Treg를 연구했습니다. 연구자들은 Treg에서 TNFR2의 발현이 자극된 이펙터 T 세포(r=0.63, p<0.01). 76명의 사망한 기증자 신장 이식 수혜자 코호트에서 연구자들은 신장 이식 후 지연되고 느린 이식 기능의 예측에서 이식 전 순환 수혜자 TNFR2+ Treg의 역할에 대해 발표했습니다. 지연 및 느린 이식 기능은 신장 이식 후 급성 거부 반응 발생에 대한 알려진 위험 요소이기 때문에 연구자들은 75명이 신장 이식을 받은 동일한 수혜자 코호트에서 급성 거부 예측에서 이식 전 순환 수혜자 TNFR2+ Treg의 역할을 조사했습니다. 특히 낮은 중증도의 TCMR에서 유망한 결과를 보이는 급성 거부반응 데이터.

가설

낮은 중증도 TCMR을 주로 포함하는 코호트에서 이전 연구와 조사관의 예비 결과가 급성 거부반응의 예측에서 HLA-DR+TNFR2+ Treg의 역할을 시사하므로, 조사관은 이를 dd-cfDNA 분획과 통합하면 특이성과 예측성을 향상시킬 수 있다고 가정합니다. 급성 거부반응, 특히 TCMR에 대한 성능. 연구자들은 또한 초기 dd-cfDNA 분획 및 이식 전 HLA-DR+TNFR2+ Treg의 측정이 eGFR에 의해 측정된 급성 거부 및 이식 기능을 포함하여 신장 이식 후 미래 결과를 예측할 수 있다는 가설을 세웠습니다.

목표

1. dd-cfDNA 분획을 HLA-DR+TNFR2+ Treg와 사전에 통합하거나 동종이식 부상 시에 신장 이식 후 급성 거부반응에 대한 예측 성능을 향상시킬 수 있는지 여부를 테스트합니다.
2. 이식 후 2주에 dd-cfDNA 분획을 이식 전 HLADR+TNFR2+ Treg와 통합하여 향후 급성 거부 반응 에피소드 및 1년 이식 기능을 예측할 수 있는지 여부를 테스트합니다.

조사관은 dd-cfDNA 분획 측정을 위해 보험이 적용되는 성인 신장 이식 수혜자 150명을 모집할 예정입니다.