Használja az Art-assist és a Neupogent a krónikus végtag-ischaemia kezelésére

Ez a protokoll a következő klinikai lépés a krónikus végtag-fenyegető ischaemia (CLI) kezelésére szolgáló sejtterápiás megközelítés biokémiai értékelésében. Röviden, a kollaterális artériák megnagyobbításának ("arteriogenezis") képessége, valamint az új kapillárisok, arteriolák és venulák szöveti szinten történő növekedésének stimulálása ("angiogenezis") veleszületett. A kutatók az ischaemiás környezetnek tulajdonítják, hogy ez a CLI-ben nem fordult elő. Első protokollunkban a kutatók egy külső programozott pneumatikus kompressziós eszközt (Art-Assist Device) használtak a végtag hemodinamikájának javítására, és ami a legfontosabb, hogy biztosítsák az "on-kapcsolót" az endotélium aktiválásához, hogy megindulhasson az arteriogenezis. Ez az új protokoll a második lépést jelenti e környezet javításában; a sejthiány és a fehérje jelátvitel javítása. A kutatók keresik a proteomikai, biokémiai és citometriai adatokat, amelyek a megközelítés finomításához szükségesek, hogy klinikai vizsgálatot lehessen végezni. Ez a projekt FDA által jóváhagyott és CMS által támogatott termékeket fog használni.

Indoklás

A neovaszkularizáció a CLI-ben hemodinamikai ("A") és sejtes ("B") okok miatt sikertelen:

A) A többszintű artériás elzáródás okozta hemodinamikai elégtelenség a következőkhöz vezet:

1. Az infragenikulált endothel nyírófeszültség csillapítása: E inger nélkül a kis kollaterális artériákat bélelő endothelsejtek nem indukálódnak a keringő monociták és progenitorsejtek vonzására és befogására, amelyek irányítanák az arteriogenezist.
2. Az oxigénnel telített tápláló vér beáramlása az ischaemiás szövetbe
3. Az anyagcsere salakanyagok kiürülése az ischaemiás szövetből
4. Az ischaemiás szövetből származó fehérje jelek terjesztése károsodott, ami pro-angiogén reparatív sejteket toborozna.
5. Ezeknek a pro-angiogén sejteknek az ischaemiás szövetbe való bejutásának károsodása. B) A keringő progenitor sejtpopuláció hiánya: Ezek a sejtek részt vesznek az angiogenezisben és az arteriogenezisben. Számukban és funkciójukban hiányosak a CLI betegekben.

C) Csökkent immunitás. Még akkor is, ha a véráramlás javul, vannak olyan betegek, akik még mindig belehalnak a fertőzésbe. Ennek egy része a rossz sebkezelés, a másik az immunitás károsodása.

Sejtterápiás megközelítésünket ezek mindegyikére tervezték. Kimondottan:

A) A többszintű artériás elzáródás okozta hemodinamikai kudarcot az ACI készülék viselésével korrigálják.

1. Helyreállítja az endothel nyírófeszültséget, amely a vaszkuláris endotélium aktiválásához szükséges, hogy beindítsa az arteriogenezis folyamatot.
2. Növeli az oxigéntartalmú tápanyag véráramlását az ischaemiás szövetbe
3. Kitisztítja az anyagcsere salakanyagait az ischaemiás szövetből
4. Növeli a fehérje jelek terjesztését az ischaemiás szövetből, amely pro-angiogén reparatív sejteket toborozna.
5. Elősegíti ezen pro-angiogén sejtek visszajutását az ischaemiás szövetbe.

B) A keringő progenitor sejtpopuláció hiánya korrigálásra kerül:

A G-CSF (Nuopogen, Amgen Inc.) az FDA által jóváhagyott progenitor/őssejt mobilizálásra. Klinikailag önálló neovaszkularizációs terápiaként alkalmazták. A kutatók ebben a protokollban ezt fogják használni, hogy kijavítsák e létfontosságú sejtpopuláció hiányát CLI-betegeknél, fokozva az arteriogenezist és az angiogenezist. A nyomozók mérni fogják a biokémiai hatását.

C) A károsodott immunitást kezelni kell. A G-CSF (Nuopogen, Amgen Inc.) az FDA által jóváhagyott citotoxikus kemoterápia utáni immunológiai hiány korrekciójára. A CLI idős, gyakran cukorbeteg, csökkent immunitású betegeknél fordul elő. Amputáció akkor következik be, amikor a fertőzés a láb elülső részén jelentkezik, és eléri a lábközépet.

Hipotézisünk az, hogy a PPCD és a G-CSF együttes alkalmazása elősegíti az arteriogenezist. A kutatók korlátozott, de erős klinikai bizonyítékokkal rendelkeznek arra vonatkozóan, hogy ez a kombinált megközelítés drámai módon javítja a véráramlást. A nemrég befejezett IRB projekt (IRB#12-1198) a PPCD biokémiájára összpontosított. Ez a beadvány a PPCD és a G-CSF biokémiai hatásával együtt foglalkozik.

B. CÉLKITŰZÉSEK:

1. specifikus cél: a közelmúltban elkészült protokollunk (IRB # 12-1198) során levezetett PPCD proteomikus profil vizsgálókra gyakorolt ​​hatásának mérése az őssejtek mobilizációjára. Tíz CLI-beteget vesznek fel. Mindenki viselni fogja a PPCD-t, mint korábban. Mindannyian 10 mcg/kg Filgrastim-ot (Nuopogen, Amgen Inc.) kapnak összesen 5 adagban. Az FDA által jóváhagyott indikáció az őssejt-mobilizáció. A dozimetria kevésbé agresszív, mint a termék címkéje, mivel a dózis mérése 72 óránként egyszer történik, nem pedig naponta egyszer. Az FDA IND-mentességet adott a PI-nek erre az adagolási intervallumra vonatkozóan. Az első protokollunkhoz hasonlóan a citometria a progenitor CD34+ és VEGFR2+ sejtek és monociták (CD14+) eloszlását eredményezi. Az érett keringő endotélsejtek (CD31+) sejtek eloszlását mérjük referenciapontként. Az első protokollunkhoz hasonlóan a kutatók proteomikai felmérést fognak végezni az arteriogenezishez kapcsolódó citokinek, valamint a szérum nitrit szintjének mérésére (a nitrogén-monoxid-szintáz aktivitásának tükrözése).

2. specifikus cél: a vizsgálók 6 hónapos időközönként megvizsgálják az összefüggést ezeknek a biokémiai adatoknak, a hemodinamikai vizsgálatoknak és a klinikai lefolyásnak (az elülső ischaemiás nyugalmi fájdalom és az ischaemiás lábfej sebek enyhítése vagy progressziója) között.

A vizsgálat elrendezése: Tíz olyan CLI-beteget vesznek fel, akiknek ischaemiás elülső lábnyugalmi fájdalma, nem gyógyuló elülső fekélye vagy száraz elülső gangrénája van. Már átestek a standard gondozási értékelésen, beleértve a hemodinamikai vizsgálatokat és az artériák anatómiájának duplex ultrahangos lehatárolását a non-invazív vaszkuláris laboratóriumban. A tibialis artéria elzáródásos betegségben szenvedők, normál vagy korrigált proximális aorto-ilio-femoralis artériás anatómiával rendelkezők műtét vagy katéteres revaszkularizáció helyett lehetőséget kapnak a felvételre. A PPCD-használat mindaddig folytatódik, amíg a jelentkező tünetek megszűnnek, vagy a hagyományos revaszkularizáció szükségessé válik a végtagmentés eléréséhez. Az első IRB-beadványunkhoz (IRB#12-1198) vonatkozó egyetlen három módosítás a következő:

1. Mindannyian 10 mcg/kg Filgrastim-ot (Nuopogen, Amgen Inc.) kapnak összesen 5 adagban.
2. A 30 napos CRC látogatást 14 napos látogatás váltja fel.
3. A 14 napos vizit során citometriát is végeznek. Az első IRB-beadványunkhoz hasonlóan minden páciens saját kontrolljaként szolgál. Betegenként két "pár" vérmintát elemeznek. A "pár" magában foglalja a phlebotomiát a PPCD előtt és közvetlenül utána. Az első pár a CRC-be való beiratkozáskor kerül megszerzésre. A második pár 2 héttel később, 18-24 órával a G-CSF utolsó adagja után történik. A beteg visszatér a standard ellátás klinikai értékelésére, és 6 hónappal a 14 napos CRC értékelés után ismételt hemodinamikai vizsgálatot végeznek.

Kiindulási vizit (Érsebészeti Klinika):

1. A betegek standard gondozási anamnézisnek és fizikai (H&P) vizsgálatnak vetik alá magukat.
2. Az egyéb standard ápolási tesztek közé tartozik a duplex ultrahang (DUS), a boka és lábujj nyomása.
3. Annak ellenőrzésekor, hogy a beteg jogosult-e (a felvételi/kizárási kritériumok alapján), egy ICF-et (informált beleegyezési űrlapot) magyaráznak el a páciensnek, hogy jobban elmagyarázzák a vizsgálatot, és engedélyt kérjenek a részvételhez.

1. nap (a CRC-ben; Clinical Research Center, University of Chicago): A következő eljárásokat ebben a sorrendben hajtják végre:

1. Első vérvétel (20 ml)
2. Minden beteg szubkután Nuopogen injekciót kap (10 mcg/kg).
3. A betegek ezután ülő helyzetben viselik a PPCD-t (2 órás kezelés).
4. A PPCD 2 órás használata után újabb vérvétel történik (20 ml).
5. A páciens elegendő időt kap az életminőséggel kapcsolatos kérdőívek kitöltésére, és a vizsgálati koordinátor ebben az időben rendelkezésre áll, hogy segítsen a betegnek.
6. A vérmintákat a Dr. T.C. HE, PhD laboratórium az elemzéshez.

4., 7., 10. és 13. nap (otthon vagy a klinikán): A következő eljárásokat kell elvégezni:

1. Nővér vagy P.I. a Nuopogen injekciót (10 mcg/kg) szubkután, minden 3. napon, összesen 5 Nuopogen injekciót.
2. A beteg továbbra is használja a PPCD-t minden nap, legalább napi 3 órában, amíg a tünetek megszűnnek.

14. nap (a CRC-ben; Clinical Research Center, University of Chicago): A következő eljárásokat ebben a sorrendben hajtják végre:

1. Első vérvétel (20 ml), 18-24 órával az 5. Nuopogen oltás után. A vérmintákat Dr. T.C.-nek küldik. Ő, a biokémiai elemzési laboratórium PhD.
2. A betegek ezután 2 órán át ülő helyzetben viselik a PPCD-t.
3. Közvetlenül a PPCD 2 órás használatának vége előtt újabb vérvétel történik (20 ml).
4. A QOL-t a beteg tölti be.
5. A beteg visszaküldi az üres Nuopogen injekciós üvegeket.