使用Art-assist和Neupogen治疗慢性肢体缺血

该方案是我们对治疗慢性肢体威胁性缺血 (CLI) 的细胞疗法进行生化评估的下一步临床步骤。 简而言之，扩大侧支动脉（“动脉生成”）和在组织水平刺激新毛细血管、小动脉和小静脉生长（“血管生成”）的能力是与生俱来的。 调查人员将 CLI 中出现这种情况的失败归因于缺血环境。 在我们的第一个协议中，研究人员使用外部编程气动压缩装置（艺术辅助装置）来改善肢体的血液动力学，最重要的是提供“开关”以激活内皮细胞，以便开始动脉生成。 这个新协议提供了改善这种环境的第二步；改善细胞缺陷和蛋白质信号。 研究人员正在寻找改进方法所需的蛋白质组学、生物化学和细胞计数数据，以便进行临床试验。 该项目将使用 FDA 批准和 CMS 报销的产品。

基本原理

由于血液动力学（“A”）和细胞（“B”）原因，CLI 中的新血管形成失败：

A) 多节段动脉闭塞性疾病引起的血流动力学障碍导致：

1. 膝下内皮剪切应力的衰减：如果没有这种刺激，小侧支动脉内壁的内皮细胞不会被诱导吸引和捕获循环单核细胞和祖细胞，从而协调动脉生成。
2. 含氧营养血流入缺血组织受损
3. 缺血组织代谢废物的清除受损
4. 来自缺血组织的蛋白质信号传播受损，会募集促血管生成修复细胞。
5. 这些促血管生成细胞到达缺血组织的能力受损。 B) 循环祖细胞群的缺陷：这些细胞参与血管生成和动脉生成。 它们在 CLI 患者中的数量和功能都存在缺陷。

C) 免疫力受损。 即使血流得到改善，仍有大量患者死于感染。 部分原因与伤口管理不善有关，另一个原因是免疫力受损。

我们的细胞疗法旨在解决这些问题。 具体来说：

A) 多节段动脉闭塞性疾病引起的血流动力学障碍将通过佩戴ACI装置得到纠正

1. 恢复激活血管内皮所需的内皮剪切应力，从而启动动脉生成过程。
2. 增加含氧营养血流向缺血组织的输送
3. 清除缺血组织的代谢废物
4. 增加来自缺血组织的蛋白质信号的传播，该信号将募集促血管生成修复细胞。
5. 增强将这些促血管生成细胞输送回缺血组织。

B) 循环祖细胞群的缺陷将得到纠正：

G-CSF（Nuopogen，Amgen Inc.）经 FDA 批准用于祖细胞/干细胞动员。 它已在临床上用作独立的新血管形成疗法。 研究人员将在本协议中使用它来纠正 CLI 患者这一重要细胞群的缺陷，增强动脉生成和血管生成。 调查人员将测量其生化影响。

C) 免疫力受损将得到解决 G-CSF (Nuopogen, Amgen Inc.) 经 FDA 批准用于纠正细胞毒性化疗后的免疫缺陷。 CLI 发生在免疫力受损的老年人，通常是糖尿病患者。 当感染发生在前脚并到达中足时，就会导致截肢。

我们的假设：联合使用 PPCD 和 G-CSF 将促进动脉生成。 研究人员掌握的有限但有力的临床证据表明，这种组合方法可显着改善血流。 最近完成的 IRB 项目 (IRB#12-1198) 专注于 PPCD 的生物化学。 目前提交的文件共同解决了 PPCD 和 G-CSF 的生化影响。

B.目标：

具体目标 1：是测量祖细胞动员对我们最近完成的协议 (IRB # 12-1198) 期间得出的 PPCD 蛋白质组学概况调查员的影响。 将招募 10 名 CLI 患者。 所有人都将像以前一样佩戴 PPCD。 所有人都将接受 10 mcg/kg 的 Filgrastim（Nuopogen，Amgen Inc.），总共 5 剂。 FDA 批准的适应症是干细胞动员。 剂量测定没有产品标签那么激进，因为剂量测定被分散到每 72 小时一次而不是每天一次。 FDA 已授予 PI 对该剂量间隔的 IND 豁免。 与我们的第一个协议一样，细胞计数将产生祖细胞 CD34+ 和 VEGFR2+ 细胞和单核细胞 (CD14+) 的分布。 成熟循环内皮细胞 (CD31+) 细胞的分布将作为参考点进行测量。 与我们的第一个方案一样，研究人员将进行蛋白质组学调查，测量与动脉生成相关的细胞因子水平以及血清亚硝酸盐（反映一氧化氮合酶活性）。

具体目标 2：研究人员将在 6 个月的时间间隔内检查这些生化数据、血液动力学测试和临床过程（前足缺血性静息痛和缺血性前足伤口的缓解或进展）之间的关联。

研究设计：将招募 10 名患有缺血性前足静息痛、前足溃疡未愈合或前足干性坏疽的 CLI 患者。 他们将已经接受了护理评估标准，包括血液动力学测试和无创血管实验室动脉解剖的双重超声描绘。 那些患有胫动脉闭塞性疾病、具有正常或矫正的近端主动脉-髂股-股动脉解剖结构的患者，将可以选择入组以代替手术或导管血运重建。 PPCD 将继续使用，直到出现的症状消失或传统的血运重建成为实现肢体挽救所必需的。 对我们的第一次 IRB 提交 (IRB#12-1198) 的仅有的三个修正案是：

1. 所有人都将接受 10 mcg/kg 的 Filgrastim（Nuopogen，Amgen Inc.），总共 5 剂。
2. 为期 30 天的 CRC 访问将被替换为 14 天的访问。
3. 细胞计数也将在 14 天的访问中进行。 与我们第一次提交 IRB 时一样，每个患者都是他/她自己的对照。 每位患者将分析两“对”血液样本。 “一对”包括在 PPCD 两小时之前和之后立即进行的放血。 第一对是在 CRC 注册时获得的。 第二对将在 2 周后最后一次 G-CSF 给药后 18-24 小时进行。 患者将返回进行标准护理临床评估，并在 14 天 CRC 评估后 6 个月重复进行血液动力学测试。

基线访问（血管外科诊所）：

1. 患者将接受标准的护理病史和身体 (H&P) 检查。
2. 其他标准护理测试将包括：双相超声 (DUS)、脚踝和脚趾压力。
3. 在确认患者符合条件（基于纳入/排除标准）后，将向患者解释 ICF（知情同意书），以便更好地解释研究并请求授权参与。

第 1 天（在 CRC；芝加哥大学临床研究中心）：将按此顺序执行以下程序：

1. 初始抽血（20 毫升）
2. 将给每位患者皮下注射 Nuopogen (10 mcg/kg)。
3. 然后，患者将以坐姿佩戴 PPCD（2 小时）。
4. 使用 PPCD 2 小时后，将进行另一次抽血（20 毫升）。
5. 患者将有充足的时间填写生活质量问卷，此时研究协调员将在场协助患者。
6. 血样将被送到 T.C. 博士处。 HE，博士实验室进行分析。

第 4、7、10 和 13 天（在家或诊所）：将完成以下程序：

1. 护士或 P.I.将每 3 天皮下注射 Nuopogen 注射剂 (10 mcg/kg)，总共注射 5 次 Nuopogen。
2. 患者将继续每天使用 PPCD，每天至少 3 小时，直到症状消失。

第 14 天（在 CRC；芝加哥大学临床研究中心）：将按此顺序执行以下程序：

1. 第一次抽血（20毫升），诺泊根第5针后18-24小时。 血样将被送往 T.C. 博士。他，生化分析博士实验室。
2. 然后，患者将以坐姿佩戴 PPCD 2 小时。
3. 就在 PPCD 使用 2 小时结束之前，将进行另一次抽血（20 毫升）。
4. QOL 将由患者填写。
5. 患者将归还 Nuopogen 的空小瓶。