Art-assist와 Neupogen을 사용하여 만성 사지 허혈 치료

이 프로토콜은 만성 사지 위협 허혈(CLI)을 치료하기 위한 세포 치료 접근법의 생화학적 평가의 다음 임상 단계입니다. 간단히 말해서, 측부 동맥을 확대하고("동맥신생") 조직 수준에서 새로운 모세혈관, 세동맥 및 소정맥의 성장을 자극하는("혈관신생") 능력은 타고난 것입니다. 수사관은 CLI에서 발생하는 실패가 허혈성 환경 때문이라고 생각합니다. 우리의 첫 번째 프로토콜에서 연구자들은 사지의 혈역학을 개선하고 가장 중요한 것은 동맥 생성이 시작될 수 있도록 내피를 활성화하는 "온 스위치"를 제공하기 위해 외부 프로그래밍된 공압 압축 장치(Art-Assist Device)를 사용했습니다. 이 새로운 프로토콜은 이 환경을 개선하는 두 번째 단계를 제공합니다. 세포 적자 및 단백질 신호 전달을 개선합니다. 연구자들은 임상 시험을 수행할 수 있도록 접근 방식을 개선하는 데 필요한 단백질체학, 생화학 및 세포 계측 데이터를 찾고 있습니다. 이 프로젝트는 FDA 승인 및 CMS 환급 제품을 사용합니다.

이론적 해석

CLI의 신혈관형성은 혈역학적("A") 및 세포성("B") 이유로 인해 실패합니다.

A) 다단계 동맥 폐쇄성 질환으로 인한 혈역학적 부전은 다음과 같은 결과를 초래합니다.

1. 슬하 내피 내피 전단 응력의 감쇠: 이 자극이 없으면 작은 측부 동맥을 감싸고 있는 내피 세포는 동맥 생성을 조율하는 순환 단핵구 및 전구 세포를 유인하고 포획하도록 유도되지 않습니다.
2. 허혈 조직으로의 산소화된 영양 혈류의 유입 장애
3. 허혈 조직의 대사 폐기물 제거 장애
4. 혈관 신생 회복 세포를 모집하는 허혈 조직의 단백질 신호 전파 장애.
5. 허혈 조직에 대한 이러한 프로-혈관신생 세포의 장애 도착. B) 순환 전구 세포 집단의 결핍: 이 세포는 혈관 신생 및 동맥 신생에 참여합니다. CLI 환자의 수와 기능이 부족합니다.

C) 면역 장애. 혈류가 개선되더라도 여전히 감염에 굴복하는 환자 집단이 있습니다. 이것의 일부는 열악한 상처 관리와 관련이 있고, 다른 하나는 손상된 면역입니다.

우리의 세포 치료 접근 방식은 이러한 각 문제를 해결하도록 설계되었습니다. 구체적으로:

가) 다분절 동맥 폐쇄성 질환으로 인한 혈역학적 부전은 ACI 장치를 착용하여 교정한다.

1. 동맥신생 과정을 시작하기 위해 혈관 내피를 활성화하는 데 필요한 내피 전단 응력을 복원합니다.
2. 허혈 조직으로 산소가 공급된 영양 혈류의 전달을 증가시킵니다.
3. 허혈 조직에서 대사의 노폐물을 제거합니다.
4. 혈관 신생 회복 세포를 모집하는 허혈 조직의 단백질 신호 전파를 증가시킵니다.
5. 이러한 pro-angiogenic 세포의 허혈성 조직으로의 전달을 향상시킵니다.

B) 순환 전구 세포 집단의 결핍이 수정됩니다.

G-CSF(Nuopogen, Amgen Inc.)는 전구체/줄기 세포 동원에 대해 FDA 승인을 받았습니다. 독립형 혈관신생 요법으로 임상적으로 사용되었습니다. 연구자들은 이 프로토콜에서 이를 사용하여 CLI 환자의 이 중요한 세포 집단의 결핍을 수정하여 동맥신생 및 혈관신생을 강화할 것입니다. 조사관은 생화학 적 영향을 측정합니다.

C) 손상된 면역이 해결될 것입니다. CLI는 면역력이 약한 노인, 종종 당뇨병 환자에게서 발생합니다. 감염이 발 앞부분에서 발생하여 발 중간에 도달하면 절단이 발생합니다.

우리의 가설: PPCD와 G-CSF의 병용이 동맥신생을 촉진할 것이라는 것입니다. 연구자들은 이 결합된 접근법이 혈류를 극적으로 개선한다는 제한적이지만 강력한 임상 증거를 가지고 있습니다. 최근 완료된 IRB 프로젝트(IRB#12-1198)는 PPCD의 생화학에 초점을 맞췄습니다. 현재 제출물은 PPCD와 G-CSF의 생화학적 영향을 함께 다루고 있습니다.

B.목적:

구체적인 목표 1: 최근 완성된 프로토콜(IRB # 12-1198) 동안 파생된 PPCD 단백질 프로파일 조사자에 대한 전구 세포 동원의 영향을 측정하는 것입니다. 10명의 CLI 환자가 등록됩니다. 모두 이전과 같이 PPCD를 착용합니다. 모두 10mcg/kg의 Filgrastim(Nuopogen, Amgen Inc.)을 총 5회 복용하게 됩니다. FDA 승인 적응증은 줄기 세포 동원입니다. 선량 측정이 하루에 한 번이 아닌 72시간마다 한 번으로 확산되기 때문에 선량 측정은 제품 라벨보다 덜 공격적입니다. FDA는 PI에게 이 투약 간격에 대한 IND 면제를 부여했습니다. 첫 번째 프로토콜과 마찬가지로 세포측정은 전구 CD34+ 및 VEGFR2+ 세포와 단핵구(CD14+)의 분포를 산출합니다. 성숙한 순환 내피 세포(CD31+) 세포의 분포를 기준점으로 측정합니다. 우리의 첫 번째 프로토콜과 마찬가지로 연구자들은 동맥 형성과 관련된 사이토카인 수준과 혈청 아질산염(산화질소 신타제 활성의 반영)을 측정하는 프로테옴 조사를 수행할 것입니다.

특정 목표 2: 조사관은 6개월 간격으로 이러한 생화학적 데이터, 혈역학 검사 및 임상 과정(전족부 허혈성 휴식 통증 및 허혈성 전족부 상처의 완화 또는 진행) 사이의 연관성을 조사합니다.

연구 설계: 허혈성 앞발 휴식 통증, 치유되지 않는 앞발 궤양 또는 건조한 앞발 괴저가 있는 10명의 CLI 환자를 모집합니다. 그들은 이미 비침습적 혈관 연구실에서 동맥 해부학의 혈역학 검사 및 이중 초음파 묘사를 포함하여 치료 표준 평가를 거쳤을 것입니다. 정상 또는 교정된 근위 대동맥-장골-대퇴 동맥 해부학을 가진 경골 동맥 폐색 질환이 있는 환자는 수술 또는 카테터 혈관 재관류술 대신 등록 옵션이 제공됩니다. PPCD 사용은 제시된 증상이 해결되거나 사지 구제를 달성하기 위해 전통적인 혈관 재생술이 필요할 때까지 계속됩니다. 첫 번째 IRB 제출물(IRB#12-1198)에 대한 단 세 가지 수정 사항은 다음과 같습니다.

1. 모두 10mcg/kg의 Filgrastim(Nuopogen, Amgen Inc.)을 총 5회 복용하게 됩니다.
2. 30일 CRC 방문은 14일 방문으로 대체됩니다.
3. 세포측정은 또한 14일 방문에서 수행될 것입니다. 첫 번째 IRB 제출에서와 같이 각 환자는 자신의 컨트롤 역할을 합니다. 혈액 표본의 두 "쌍"은 환자당 분석됩니다. "쌍"은 PPCD 2시간 전과 직후에 정맥절개를 포함합니다. 첫 번째 쌍은 CRC에 등록할 때 얻습니다. 두 번째 쌍은 G-CSF의 마지막 투여 후 18-24시간 후 2주 후에 수행됩니다. 환자는 14일 간의 CRC 평가 후 6개월에 반복적인 혈역학 검사와 함께 표준 치료 임상 평가를 위해 돌아올 것입니다.

기준선 방문(혈관 수술 클리닉):

1. 환자는 표준 치료 이력 및 신체(H&P) 검사를 받게 됩니다.
2. 다른 표준 관리 검사에는 이중 초음파(DUS), 발목 및 발가락 압력이 포함됩니다.
3. 환자가 자격이 있음이 확인되면(포함/제외 기준에 따라) ICF(정보에 입각한 동의 양식)를 환자에게 설명하여 연구에 대해 더 잘 설명하고 참여 승인을 요청합니다.

Day1 (CRC; 시카고 대학 임상 연구 센터): 다음 절차가 이 순서로 수행됩니다.

1. 초기 채혈(20ml)
2. 각 환자에게 Nuopogen 주사(10 mcg/kg)를 피하 투여합니다.
3. 그런 다음 환자는 (2시간 세션) 동안 앉은 자세로 PPCD를 착용합니다.
4. 2시간 동안 PPCD를 사용한 후 다시 채혈합니다(20ml).
5. 환자는 삶의 질 설문지를 작성할 수 있는 충분한 시간을 갖게 되며 연구 코디네이터는 이 시간에 환자를 도울 수 있습니다.
6. 혈액 샘플은 Dr. T.C. HE, 분석을 위한 박사 연구실.

4일, 7일, 10일 및 13일(집 또는 진료소에서): 다음 절차가 수행됩니다.

1. 간호사 또는 P.I. Nuopogen 주사(10 mcg/kg)를 3일마다 총 5회의 Nuopogen 주사에 대해 피하 투여합니다.
2. 환자는 증상이 해결될 때까지 매일 최소 하루 3시간 동안 PPCD를 계속 사용합니다.

14일차(CRC; 시카고 대학 임상 연구 센터): 다음 절차가 이 순서대로 수행됩니다.

1. Nuopogen 5회 주사 후 18-24시간 후 초기 채혈(20 ml). 혈액 샘플은 Dr. T.C.에게 보내질 것입니다. 그는 생화학 분석을 위한 박사 연구실입니다.
2. 그런 다음 환자는 앉은 자세로 2시간 동안 PPCD를 착용합니다.
3. 2시간 동안의 PPCD 사용이 끝나기 직전에 또 다른 채혈을 합니다(20ml).
4. QOL은 환자가 채울 것입니다.
5. 환자는 Nuopogen의 빈 바이알을 반환합니다.