Verwenden Sie Art-assist und Neupogen zur Behandlung von chronischer Ischämie der Gliedmaßen

Dieses Protokoll ist der nächste klinische Schritt in unserer biochemischen Bewertung eines zelltherapeutischen Ansatzes zur Behandlung von chronischer, die Extremitäten bedrohender Ischämie (CLI). Kurz gesagt, die Fähigkeit, Kollateralarterien ("Arteriogenese") zu vergrößern und das Wachstum neuer Kapillaren, Arteriolen und Venolen auf Gewebeebene ("Angiogenese") zu stimulieren, ist angeboren. Die Ermittler schreiben das Versäumnis, dass dies in CLI auftrat, der ischämischen Umgebung zu. In unserem ersten Protokoll verwendeten die Forscher ein externes programmiertes pneumatisches Kompressionsgerät (Art-Assist-Gerät), um die Hämodynamik in der Extremität zu verbessern und vor allem den „Ein-Schalter“ bereitzustellen, um das Endothel zu aktivieren, damit die Arteriogenese beginnen kann. Dieses neue Protokoll stellt den zweiten Schritt zur Verbesserung dieser Umgebung dar; Verbesserung des zellulären Defizits und der Proteinsignalisierung. Die Forscher suchen nach proteomischen, biochemischen und zytometrischen Daten, die zur Verfeinerung des Ansatzes erforderlich sind, damit eine klinische Studie durchgeführt werden kann. Dieses Projekt wird von der FDA zugelassene und von der CMS erstattete Produkte verwenden.

Begründung

Die Neovaskularisation bei CLI schlägt aus hämodynamischen ("A") und zellulären ("B") Gründen fehl:

A) Das hämodynamische Versagen, das durch eine mehrstufige arterielle Verschlusskrankheit verursacht wird, führt zu:

1. Abschwächung der infragenikulären endothelialen Scherspannung: Ohne diesen Stimulus werden die Endothelzellen, die kleine Kollateralarterien auskleiden, nicht dazu veranlasst, zirkulierende Monozyten und Vorläuferzellen anzuziehen und einzufangen, die die Arteriogenese orchestrieren würden.
2. Gestörter Zufluss von sauerstoffreichem Nährblutfluss in das ischämische Gewebe
3. Gestörte Beseitigung von Stoffwechselabfallprodukten aus dem ischämischen Gewebe
4. Beeinträchtigte Verbreitung von Proteinsignalen aus dem ischämischen Gewebe, die pro-angiogene reparative Zellen rekrutieren würden.
5. Beeinträchtigte Ankunft dieser pro-angiogenen Zellen im ischämischen Gewebe. B) Mangel an der zirkulierenden Vorläuferzellpopulation: Diese Zellen sind an der Angiogenese und Arteriogenese beteiligt. Sie sind in Anzahl und Funktion bei CLI-Patienten mangelhaft.

C) Beeinträchtigte Immunität. Selbst wenn die Durchblutung verbessert ist, gibt es eine Population von Patienten, die immer noch einer Infektion erliegen. Ein Teil davon bezieht sich auf ein schlechtes Wundmanagement, der andere auf eine beeinträchtigte Immunität.

Unser Zelltherapie-Ansatz ist darauf ausgelegt, all diese zu adressieren. Speziell:

A) Das hämodynamische Versagen, das durch eine mehrstufige arterielle Verschlusskrankheit verursacht wird, wird durch das Tragen des ACI-Geräts korrigiert

1. Stellt die endotheliale Scherspannung wieder her, die zur Aktivierung des vaskulären Endothels erforderlich ist, um den Arteriogeneseprozess zu starten.
2. Erhöht die Zufuhr von sauerstoffreichem, nahrhaftem Blutfluss in das ischämische Gewebe
3. Beseitigt Abfallprodukte des Stoffwechsels aus dem ischämischen Gewebe
4. Erhöht die Verbreitung von Proteinsignalen aus dem ischämischen Gewebe, die pro-angiogene reparative Zellen rekrutieren würden.
5. Verbessert die Abgabe dieser pro-angiogenen Zellen zurück an das ischämische Gewebe.

B) Der Mangel in der zirkulierenden Vorläuferzellpopulation wird behoben:

G-CSF (Nuopogen, Amgen Inc.) ist von der FDA für die Mobilisierung von Vorläufern/Stammzellen zugelassen. Es wurde klinisch als eigenständige Neovaskularisationstherapie eingesetzt. Die Forscher werden es in diesem Protokoll verwenden, um den Mangel in dieser lebenswichtigen Zellpopulation bei CLI-Patienten zu korrigieren und die Arteriogenese und Angiogenese zu verbessern. Forscher messen seine biochemische Wirkung.

C) Die beeinträchtigte Immunität wird angegangen G-CSF (Nuopogen, Amgen Inc.) ist von der FDA zur Korrektur des immunologischen Defizits nach einer zytotoxischen Chemotherapie zugelassen. CLI tritt bei älteren, oft diabetischen Patienten mit eingeschränkter Immunität auf. Amputationen entstehen, wenn Infektionen im Vorfuß entstehen und den Mittelfuß erreichen.

Unsere Hypothese: ist, dass die kombinierte Verwendung eines PPCD und G-CSF die Arteriogenese fördert. Forscher haben begrenzte, aber starke klinische Beweise dafür, dass dieser kombinierte Ansatz den Blutfluss dramatisch verbessert. Das kürzlich abgeschlossene IRB-Projekt (IRB#12-1198) konzentrierte sich auf die Biochemie des PPCD. Die vorliegende Einreichung befasst sich mit der biochemischen Wirkung von PPCD und G-CSF zusammen.

B. ZIELE:

Spezifisches Ziel 1: ist die Messung des Einflusses der Mobilisierung von Vorläuferzellen auf das PPCD-Proteomprofil, das von Forschern während unseres kürzlich abgeschlossenen Protokolls (IRB Nr. 12-1198) abgeleitet wurde. Es werden zehn CLI-Patienten aufgenommen. Alle werden die PPCD wie bisher tragen. Alle erhalten 10 mcg/kg Filgrastim (Nuopogen, Amgen Inc.) für insgesamt 5 Dosen. Die von der FDA zugelassene Indikation ist die Mobilisierung von Stammzellen. Die Dosimetrie ist weniger aggressiv als das Produktetikett, da die Dosimetrie auf einmal alle 72 Stunden und nicht einmal am Tag verteilt wird. Die FDA hat dem PI einen IND-Waiver für dieses Dosierungsintervall erteilt. Wie bei unserem ersten Protokoll ergibt die Zytometrie die Verteilung der Vorläuferzellen CD34+ und VEGFR2+ und Monozyten (CD14+). Als Referenzpunkt wird die Verteilung reifer zirkulierender Endothelzellen (CD31+) gemessen. Wie bei unserem ersten Protokoll führen die Ermittler eine proteomische Untersuchung durch, bei der die mit der Arteriogenese assoziierten Zytokinspiegel sowie Serumnitrit (Reflexion der Stickoxid-Synthase-Aktivität) gemessen werden.

Spezifisches Ziel 2: Die Prüfer untersuchen den Zusammenhang zwischen diesen biochemischen Daten, hämodynamischen Tests und dem klinischen Verlauf (Linderung oder Progression von ischämischen Ruheschmerzen und ischämischen Vorfußwunden im Vorfuß) über einen Zeitraum von 6 Monaten.

Studiendesign: Es werden zehn CLI-Patienten mit ischämischen Vorfußruheschmerzen, nicht heilenden Vorfußgeschwüren oder trockenem Vorfußgangrän rekrutiert. Sie wurden bereits einer Standardbehandlung unterzogen, einschließlich hämodynamischer Tests und Duplex-Ultraschall-Darstellung der arteriellen Anatomie im nicht-invasiven Gefäßlabor. Personen mit Verschlusskrankheit der Tibiaarterie mit normaler oder korrigierter proximaler aorto-ilio-femoraler arterieller Anatomie wird die Möglichkeit gegeben, sich anstelle einer Operation oder Katheterrevaskularisierung einzuschreiben. Die Verwendung von PPCD wird fortgesetzt, bis die vorliegenden Symptome abgeklungen sind oder eine herkömmliche Revaskularisierung erforderlich wird, um eine Extremitätenerhaltung zu erreichen. Die einzigen drei Änderungen an unserer ersten IRB-Einreichung (IRB#12-1198) sind:

1. Alle erhalten 10 mcg/kg Filgrastim (Nuopogen, Amgen Inc.) für insgesamt 5 Dosen.
2. Der 30-tägige CRC-Besuch wird durch einen 14-tägigen Besuch ersetzt.
3. Bei dem 14-tägigen Besuch wird auch eine Zytometrie durchgeführt. Wie bei unserer ersten IRB-Einreichung dient jeder Patient als seine eigene Kontrolle. Pro Patient werden zwei „Paare“ Blutproben analysiert. Ein "Paar" umfasst eine Phlebotomie vor und unmittelbar nach zwei Stunden PPCD. Das erste Paar erhält man bei der Einschreibung in das CRC. Das zweite Paar wird 2 Wochen später 18-24 Stunden nach der letzten G-CSF-Dosis durchgeführt. Der Patient wird zur klinischen Standarduntersuchung zurückkehren, mit wiederholten hämodynamischen Tests 6 Monate nach dieser 14-tägigen CRC-Bewertung.

Baseline-Besuch (Klinik für Gefäßchirurgie):

1. Die Patienten werden einer standardmäßigen Anamnese und einer körperlichen (H&P) Untersuchung unterzogen.
2. Andere Standard-Versorgungstests umfassen: Duplex-Ultraschall (DUS), Knöchel- und Zehendruck.
3. Nach Überprüfung, ob der Patient geeignet ist (basierend auf den Einschluss-/Ausschlusskriterien), wird dem Patienten ein ICF (Informed Consent Form) erklärt, um die Studie besser zu erklären und um Genehmigung zur Teilnahme zu bitten.

Tag 1 (am CRC; Clinical Research Center, University of Chicago): Die folgenden Verfahren werden in dieser Reihenfolge durchgeführt:

1. Anfängliche Blutentnahmen (20 ml)
2. Jedem Patienten wird eine Nuopogen-Spritze (10 mcg/kg) subkutan verabreicht.
3. Die Patienten tragen dann die PPCD in sitzender Position für (2-stündige Sitzung).
4. Nach der 2-stündigen Anwendung des PPCD wird eine weitere Blutabnahme durchgeführt (20 ml).
5. Dem Patienten wird ausreichend Zeit gegeben, um die Fragebögen zur Lebensqualität auszufüllen, und der Studienkoordinator steht zu diesem Zeitpunkt zur Verfügung, um dem Patienten zu helfen.
6. Blutproben werden an die Dr. T.C. HE, PhD Labor für Analyse.

Tage 4, 7, 10 und 13 (zu Hause oder in der Klinik): Die folgenden Verfahren werden durchgeführt:

1. Krankenschwester oder P.I. verabreicht Nuopogen-Schuss (10 mcg/kg) jeden 3. Tag subkutan für insgesamt 5 Nuopogen-Schüsse.
2. Der Patient wird das PPCD jeden Tag mindestens 3 Stunden am Tag verwenden, bis die Symptome abgeklungen sind.

Tag 14 (am CRC; Clinical Research Center, University of Chicago): Die folgenden Verfahren werden in dieser Reihenfolge durchgeführt:

1. Anfängliche Blutentnahme (20 ml), 18-24 Stunden nach der 5. Injektion von Nuopogen. Blutproben werden an Dr. T.C. He, PhD Labor für biochemische Analytik.
2. Die Patienten tragen dann PPCD für 2 Stunden in sitzender Position.
3. Unmittelbar vor dem Ende der 2-stündigen Verwendung des PPCD wird eine weitere Blutabnahme durchgeführt (20 ml).
4. QOL wird vom Patienten ausgefüllt.
5. Der Patient schickt die leeren Nuopogen-Durchstechflaschen zurück.