Art-assist と Neupogen を使用して慢性肢虚血を治療する

このプロトコルは、慢性肢脅迫虚血 (CLI) を治療するための細胞療法アプローチの生化学的評価における次の臨床ステップです。 簡単に言えば、側副動脈を拡大する能力 (「動脈形成」) と、組織レベルで新しい毛細血管、細動脈、細静脈の成長を刺激する能力 (「血管形成」) は生まれつきのものです。 研究者は、CLI でこれが発生しないのは、虚血環境が原因であると考えています。 私たちの最初のプロトコル研究者は、外部プログラムされた空気圧圧縮装置 (Art-Assist Device) を使用して、四肢の血行動態を改善し、最も重要なこととして、内皮を活性化して動脈形成を開始できるようにする「オンスイッチ」を提供しました。 この新しいプロトコルは、この環境を改善するための 2 番目のステップを提供します。細胞欠損とタンパク質シグナル伝達を改善します。 研究者は、臨床試験を実施できるようにアプローチを改良するために必要なプロテオミクス、生化学、およびサイトメトリーのデータを求めています。 このプロジェクトでは、FDA 承認済みで CMS が償還された製品を使用します。

根拠

CLI での血管新生は、血行動態 (「A」) および細胞 (「B」) の理由で失敗します。

A) マルチレベルの動脈閉塞性疾患によって引き起こされる血行動態の障害は、以下につながります。

1. 膝下内皮せん断応力の減衰: この刺激がなければ、小さな側副動脈の内側を覆う内皮細胞は、動脈形成を調整する循環単球および前駆細胞を引き付けて捕捉するように誘導されません。
2. 虚血組織への酸素化栄養血流の流入障害
3. 虚血組織からの代謝老廃物の除去障害
4. 血管新生促進修復細胞を動員する虚血組織からのタンパク質シグナルの伝達障害。
5. これらの血管新生促進細胞の虚血組織への到着の障害。 B）循環前駆細胞集団の欠乏：これらの細胞は、血管新生および動脈新生に関与しています。 CLI患者では、それらの数と機能が不足しています。

C) 免疫障害。 血流が改善されたとしても、依然として感染に屈する患者集団が存在します。 これの一部は不十分な創傷管理に関連しており、もう 1 つは免疫力の低下です。

当社の細胞治療アプローチは、これらのそれぞれに対処するように設計されています。 具体的には：

A) 多段階動脈閉塞症による血行動態障害は、ACI 装置を装着することで修正されます。

1. 動脈形成プロセスを開始するために、血管内皮を活性化するために必要な内皮せん断応力を回復します。
2. 虚血組織への酸素化された栄養血流の送達を増加させます
3. 虚血組織から代謝の老廃物を取り除きます
4. 血管新生促進修復細胞を動員する虚血組織からのタンパク質シグナルの拡散を増加させます。
5. これらの血管新生促進細胞の虚血組織への送達を強化します。

B) 循環前駆細胞集団の欠乏が修正されます。

G-CSF (Nuopogen、Amgen Inc.) は、前駆細胞/幹細胞の動員について FDA に承認されています。 スタンドアロンの血管新生療法として臨床的に使用されています。 研究者はこのプロトコルでそれを使用して、CLI 患者のこの重要な細胞集団の欠乏を修正し、動脈形成と血管形成を強化します。 研究者は、その生化学的影響を測定します。

C) 免疫障害に対処する G-CSF (Nuopogen、Amgen Inc.) は、細胞傷害性化学療法後の免疫学的欠損を是正するために FDA に承認されています。 CLI は、高齢者、しばしば糖尿病患者、免疫障害のある患者で発生します。 切断は、感染が前足で発生し、中足に達すると起こります。

私たちの仮説は、PPCD と G-CSF を併用すると動脈形成が促進されるというものです。 研究者は、この組み合わせたアプローチが血流を劇的に改善するという限られた強力な臨床的証拠を持っています. 最近完了した IRB プロジェクト (IRB#12-1198) は、PPCD の生化学に焦点を当てています。 現在の提出物は、PPCD と G-CSF の生化学的影響を一緒に扱っています。

B. 目的:

具体的な目的 1: 最近完成したプロトコル (IRB # 12-1198) 中に得られた PPCD プロテオミクス プロファイル研究者に対する前駆細胞動員の影響を測定することです。 10 人の CLI 患者が登録されます。 全員が以前と同じように PPCD を着用します。 全員が 10 mcg/kg の Filgrastim (Nuopogen、Amgen Inc.) を合計 5 回投与されます。 FDA 承認の適応症は、幹細胞動員です。 線量測定は、1 日 1 回ではなく 72 時間ごとに 1 回に分散されているため、製品ラベルよりも積極的ではありません。 FDA は、PI にこの投与間隔の IND 免除を認めました。 私たちの最初のプロトコルと同様に、サイトメトリーは前駆細胞 CD34+ および VEGFR2+ 細胞と単球 (CD14+) の分布をもたらします。 成熟した循環内皮細胞 (CD31+) 細胞の分布は、基準点として測定されます。 私たちの最初のプロトコルと同様に、研究者は、動脈形成に関連するサイトカインのレベルと血清亜硝酸塩（一酸化窒素シンターゼ活性の反射）を測定するプロテオミクス調査を行います。

特定の目的 2: 研究者は、これらの生化学的データ、血行動態検査、および臨床経過 (前足部の虚血性安静時痛および虚血性前足部創傷の軽減または進行) との関連を 6 か月間隔で調べます。

研究デザイン：虚血性前足安静時疼痛、非治癒性前足潰瘍、または乾性前足壊疽を有する 10 人の CLI 患者が募集されます。 彼らは、非侵襲的血管検査室での血行動態検査や動脈解剖学の二重超音波描写など、標準治療評価をすでに受けています。 近位大動脈腸骨大腿動脈の解剖学的構造が正常または修正された脛骨動脈閉塞性疾患のある患者には、手術またはカテーテル血行再建術の代わりに登録のオプションが与えられます。 PPCD の使用は、現在の症状が解消するか、従来の血行再建術が必要になるまで続けます。 IRB への最初の提出 (IRB#12-1198) に対する 3 つの修正は次のとおりです。

1. 全員が 10 mcg/kg の Filgrastim (Nuopogen、Amgen Inc.) を合計 5 回投与されます。
2. 30 日間の CRC 訪問は、14 日間の訪問に置き換えられます。
3. サイトメトリーも 14 日間の訪問で実行されます。 私たちの最初の IRB 提出と同様に、各患者は自分のコントロールとして機能します。 患者ごとに 2 つの「ペア」の血液検体が分析されます。 「ペア」には、PPCD の 2 時間前と直後の瀉血が含まれます。 最初のペアは、CRC への登録時に取得されます。 2 番目のペアは、2 週間後、G-CSF の最後の投与から 18 ～ 24 時間後に行われます。 患者は標準治療の臨床評価のために戻り、14日間のCRC評価の6か月後に血行動態検査を繰り返します。

ベースライン訪問 (血管外科クリニック):

1. 患者は標準治療歴と身体検査（H&P）を受ける。
2. その他の標準的なケア検査には、デュプレックス超音波 (DUS)、足首およびつま先の圧力が含まれます。
3. 患者が（包含/除外基準に基づいて）適格であることが確認されると、ICF（インフォームドコンセントフォーム）が患者に説明され、研究についてよりよく説明し、参加の承認を求めます。

Day1 (CRC; シカゴ大学臨床研究センター): 以下の手順がこの順序で行われます。

1. 最初の採血 (20 ml)
2. 各患者には、Nuopogen ショット (10 mcg/kg) が皮下投与されます。
3. その後、患者は座位で PPCD を着用します (2 時間のセッション)。
4. PPCD を 2 時間使用した後、別の採血が行われます (20 ml)。
5. 患者には、生活の質に関するアンケートに記入するための十分な時間が与えられ、この時点で研究コーディネーターが利用可能になり、患者を支援します。
6. 血液サンプルは Dr. T.C. に送られます。 HE、分析のための PhD ラボ。

4、7、10、および 13 日目 (自宅または診療所): 次の手順が実行されます。

1. 看護師または P.I. Nuopogen ショット (10 mcg/kg) を 3 日おきに皮下投与し、合計 5 回の Nuopogen ショットを投与します。
2. 患者は、症状が解消されるまで、毎日、少なくとも 1 日 3 時間、PPCD を使用し続けます。

Day14 (CRC; シカゴ大学臨床研究センター): 以下の手順がこの順序で行われます。

1. 最初の採血 (20 ml)、Nuopogen の 5 回目の注射の 18 ～ 24 時間後。 血液サンプルは T.C. 博士に送られます。彼は、生化学分析のための PhD Lab です。
2. その後、患者は座位で 2 時間 PPCD を装着します。
3. PPCD の 2 時間の使用が終了する直前に、別の採血が行われます (20 ml)。
4. QOLは患者さん自身で満たしていきます。
5. 患者は Nuopogen の空のバイアルを返却します。