Käytä Art-assist ja Neupogenia kroonisen raajaiskemian hoitoon

Tämä protokolla on seuraava kliininen vaihe biokemiallisessa arvioinnissamme kroonisen raajan uhkaavan iskemian (CLI) hoitoon käytettävästä soluterapiamenetelmästä. Lyhyesti sanottuna kyky suurentaa sivuvaltimoita ("arteriogeneesi") ja stimuloida uusien kapillaarien, arteriolien ja laskimolaskimojen kasvua kudostasolla ("angiogeneesi") on synnynnäinen. Tutkijat katsovat, että tämän epäonnistumisen CLI:ssä johtuu iskeemisestä ympäristöstä. Ensimmäisessä protokollassamme tutkijat käyttivät ulkoista ohjelmoitua pneumaattista puristuslaitetta (Art-Assist Device) parantaakseen raajan hemodynamiikkaa ja mikä tärkeintä tarjotakseen "on-kytkintä" endoteelin aktivoimiseksi, jotta arteriogeneesi voi alkaa. Tämä uusi protokolla on toinen vaihe tämän ympäristön parantamisessa. parantaa soluvajetta ja proteiinisignaalia. Tutkijat etsivät proteomisia, biokemiallisia ja sytometrisiä tietoja, joita tarvitaan lähestymistavan tarkentamiseksi, jotta kliininen tutkimus voidaan suorittaa. Tässä projektissa käytetään FDA:n hyväksymiä ja CMS-korvattuja tuotteita.

Perustelut

Neovaskularisaatio CLI:ssä epäonnistuu hemodynaamisista ("A") ja solusyistä ("B"):

A) Monitasoisen valtimotukossairauden aiheuttama hemodynaaminen häiriö johtaa:

1. Infragenikulaattisen endoteelin leikkausjännityksen vaimennus: Ilman tätä ärsykettä pieniä sivuvaltimoita vuoraavat endoteelisolut eivät indusoidu houkuttelemaan ja vangitsemaan kiertäviä monosyyttejä ja progenitorisoluja, jotka ohjaisivat arteriogeneesiä.
2. Happipitoisen ravitsevan veren virtauksen heikentyminen iskeemiseen kudokseen
3. Aineenvaihdunnan jätetuotteiden heikentynyt puhdistuma iskeemisestä kudoksesta
4. Heikentynyt proteiinisignaalien leviäminen iskeemisestä kudoksesta, mikä saattaisi värvätä pro-angiogeenisiä reparatiivisia soluja.
5. Näiden pro-angiogeenisten solujen saapuminen iskeemiseen kudokseen on heikentynyt. B) Puutos kiertävässä kantasolupopulaatiossa: Nämä solut osallistuvat angiogeneesiin ja arteriogeneesiin. Niiden lukumäärä ja toiminta ovat puutteellisia CLI-potilailla.

C) Heikentynyt immuniteetti. Silloinkin, kun verenkierto on parantunut, on potilaspopulaatio, joka silti altistuu infektiolle. Osa tästä liittyy huonoon haavanhoitoon, toinen on heikentynyt immuniteetti.

Soluterapiamenetelmämme on suunniteltu vastaamaan jokaiseen näistä. Erityisesti:

A) Monitasoisen valtimotukoksen aiheuttama hemodynaaminen vika korjataan käyttämällä ACI-laitetta, joka

1. Palauttaa endoteelin leikkausjännityksen, jota tarvitaan verisuonten endoteelin aktivoimiseen arteriogeneesiprosessin käynnistämiseksi.
2. Lisää hapetetun ravitsevan veren virtausta iskeemiseen kudokseen
3. Poistaa aineenvaihdunnan jätetuotteet iskeemisestä kudoksesta
4. Lisää proteiinisignaalien leviämistä iskeemisestä kudoksesta, mikä rekrytoisi pro-angiogeenisiä reparatiivisia soluja.
5. Edistää näiden pro-angiogeenisten solujen kulkeutumista takaisin iskeemiseen kudokseen.

B) Kiertävän kantasolupopulaation puute korjataan:

G-CSF (Nuopogen, Amgen Inc.) on FDA:n hyväksymä progenitori-/kantasolumobilisaatioon. Sitä on käytetty kliinisesti erillisenä neovaskularisaatiohoitona. Tutkijat käyttävät sitä tässä protokollassa korjatakseen tämän elintärkeän solupopulaation puutteen CLI-potilailla, mikä tehostaa arteriogeneesiä ja angiogeneesiä. Tutkijat mittaavat sen biokemiallisia vaikutuksia.

C) Heikentynyttä immuniteettia käsitellään. G-CSF (Nuopogen, Amgen Inc.) on FDA:n hyväksymä immunologisen puutteen korjaamiseen sytotoksisen kemoterapian jälkeen. CLI esiintyy vanhuksilla, usein diabeetikoilla, potilailla, joiden vastustuskyky on heikentynyt. Amputaatio tapahtuu, kun infektiot ilmaantuvat jalkaterän etuosaan ja ulottuvat jalan keskiosaan.

Hypoteesimme: PPCD:n ja G-CSF:n yhdistetty käyttö edistää arteriogeneesiä. Tutkijoilla on rajallista mutta vahvaa kliinistä näyttöä siitä, että tämä yhdistetty lähestymistapa parantaa dramaattisesti verenkiertoa. Äskettäin valmistunut IRB-projekti (IRB#12-1198) keskittyi PPCD:n biokemiaan. Tässä lausunnossa käsitellään PPCD:n ja G-CSF:n biokemiallisia vaikutuksia yhdessä.

B. TAVOITTEET:

Erityinen tavoite 1: on mitata progenitorisolujen mobilisaation vaikutusta PPCD-proteomisen profiilin tutkijoihin, jotka on johdettu äskettäin valmistetun protokollamme aikana (IRB # 12-1198). Mukaan otetaan kymmenen CLI-potilasta. Kaikki käyttävät PPCD:tä kuten ennenkin. Kaikki saavat 10 mikrogrammaa/kg filgrastimia (Nuopogen, Amgen Inc.) yhteensä 5 annosta kohti. FDA:n hyväksymä käyttöaihe on kantasolujen mobilisointi. Dosimetria on vähemmän aggressiivinen kuin tuotteen etiketti, koska annosmittaus jaetaan kerran 72 tunnin välein eikä kerran päivässä. FDA on myöntänyt PI:lle IND-vapautuksen tälle annosvälille. Kuten ensimmäinen protokollamme, sytometria tuottaa CD34+- ja VEGFR2+-kantasolujen ja monosyyttien (CD14+) jakautumisen. Vertailupisteenä mitataan kypsien verenkierrossa olevien endoteelisolujen (CD31+) jakautuminen. Ensimmäisen protokollamme tapaan tutkijat tekevät proteomisen tutkimuksen, jossa mitataan arteriogeneesiin liittyvien sytokiinien tasoa sekä seerumin nitriittiä (typpioksidisyntaasin aktiivisuuden heijastus).

Erityinen tavoite 2: Tutkijat tutkivat näiden biokemiallisten tietojen, hemodynaamisten testien ja kliinisen kulun (jalan etuosan iskeemisen lepokivun ja iskeemisten jalkahaavojen lievitys tai eteneminen) välistä yhteyttä 6 kuukauden välein.

Tutkimussuunnitelma: Rekrytoidaan kymmenen CLI-potilasta, joilla on iskeeminen jalkaterän lepokipu, ei-parantuva jalkaterän haavauma tai kuiva jalkaosan kuolio. Heille on jo suoritettu standardinmukainen hoitoarviointi, mukaan lukien hemodynaaminen testaus ja valtimon anatomian kaksisuuntainen ultraäänimääritys ei-invasiivisessa vaskulaarisessa laboratoriossa. Niille, joilla on säärivaltimon tukossairaus ja joilla on normaali tai korjattu proksimaalinen aorto-ilio-femoraalinen valtimon anatomia, annetaan mahdollisuus ilmoittautua leikkauksen tai katetrin revaskularisoinnin sijasta. PPCD:n käyttöä jatketaan, kunnes esiintyvät oireet häviävät tai perinteinen revaskularisaatio tulee välttämättömäksi raajan pelastamiseksi. Ainoat kolme muutosta ensimmäiseen IRB-lähetykseen (IRB#12-1198) ovat:

1. Kaikki saavat 10 mikrogrammaa/kg filgrastimia (Nuopogen, Amgen Inc.) yhteensä 5 annosta kohti.
2. 30 päivän CRC-käynti korvataan 14 päivän vierailulla.
3. 14 päivän käynnillä tehdään myös sytometria. Kuten ensimmäisessä IRB-lähetyksessämme, jokainen potilas toimii omana kontrollinaan. Potilasta kohden analysoidaan kaksi "paria" verinäytteitä. "Pari" sisältää flebotomian ennen kahden tunnin PPCD:tä ja välittömästi sen jälkeen. Ensimmäinen pari saadaan ilmoittautumisen yhteydessä CRC:hen. Toinen pari tehdään 2 viikkoa myöhemmin 18-24 tuntia viimeisen G-CSF-annoksen jälkeen. Potilas palaa normaalihoidon kliiniseen arviointiin, jossa toistetaan hemodynaaminen testi 6 kuukautta tämän 14 päivän CRC-arvioinnin jälkeen.

Peruskäynti (verisuonikirurgian klinikka):

1. Potilaille tehdään tavanomainen hoitohistoria ja fyysinen (H&P) tutkimus.
2. Muita standardeja hoitotestejä ovat: duplex ultraääni (DUS), nilkka- ja varvaspaineet.
3. Kun on varmistettu, että potilas on kelvollinen (sisällytys-/poissulkemiskriteerien perusteella), potilaalle selitetään ICF-lomake (Informed suostumuslomake), jotta hän voi selittää paremmin tutkimuksen ja pyytää lupaa osallistua.

Päivä 1 (CRC:ssä; Clinical Research Center, Chicagon yliopisto): Seuraavat toimenpiteet suoritetaan tässä järjestyksessä:

1. Ensimmäiset verikokeet (20 ml)
2. Jokaiselle potilaalle annetaan Nuopogen-rokote (10 mcg/kg) ihon alle.
3. Tämän jälkeen potilaat käyttävät PPCD:tä istuma-asennossa (2 tunnin istunnon ajan).
4. PPCD:n 2 tunnin käytön jälkeen otetaan toinen verikoe (20 ml).
5. Potilaalle annetaan runsaasti aikaa elämänlaatukyselyiden täyttämiseen, ja tutkimuksen koordinaattori on tällä hetkellä käytettävissä auttamaan potilasta.
6. Verinäytteet lähetetään Dr. T.C. HE, PhD Lab analyysiä varten.

Päivät 4, 7, 10 ja 13 (kotona tai klinikalla): Seuraavat toimenpiteet suoritetaan:

1. Sairaanhoitaja tai P.I. antaa Nuopogen-rokotetta (10 mcg/kg) ihonalaisesti joka 3. päivä, yhteensä 5 Nuopogen-rokotetta.
2. Potilas jatkaa PPCD:n käyttöä joka päivä, vähintään 3 tuntia päivässä, kunnes oireet ovat hävinneet.

Päivä 14 (CRC:ssä; Clinical Research Center, Chicagon yliopisto): Seuraavat toimenpiteet suoritetaan tässä järjestyksessä:

1. Ensimmäinen verenotto (20 ml), 18-24 tuntia viidennen Nuopogen-annoksen jälkeen. Verinäytteet lähetetään Dr. T.C.:lle. Hän, biokemiallisen analyysin tohtori.
2. Tämän jälkeen potilaat käyttävät PPCD:tä 2 tunnin ajan istuma-asennossa.
3. Juuri ennen PPCD:n 2 tunnin käytön päättymistä otetaan toinen verikoe (20 ml).
4. QOL täyttää potilas.
5. Potilas palauttaa tyhjät Nuopogen-injektiopullot.