Az ICSI-eredmények összehasonlítása a magas SDF-t tartalmazó párok here- és ejakulációs spermáját használó ciklusokban

1992-ben történt első leírása óta az intracitoplazmatikus spermium injekciót (ICSI) széles körben alkalmazzák a súlyos férfifaktoros meddőség minden formájának leküzdésére. Annak ellenére, hogy abnormális spermiumok használatával elfogadható sikerarányt értek el, a vizsgálatok azt sugallják, hogy a rossz spermaminőség káros lehet az ICSI kimenetelére. A spermium-DNS kritikus szerepet játszik a normális embrionális fejlődésben, mivel a következő generációnak továbbadott genetikai információ integritásától függ (6-8). A spermium DNS-tartalmának romlását számos feltétellel hozták összefüggésbe, beleértve az életmódot és a gonadotoxinoknak való kitettséget, a varicocelét, a férfi mellékmirigyek fertőzéseit és az előrehaladott apai életkort.

A spermium-DNS fragmentációs (SDF) tesztek a sérült kromatinnal rendelkező spermiumok arányát mérik, próbák vagy foltok segítségével azonosítják a DNS-töréseket fluoreszcens mikroszkóp, fénymikroszkóp vagy áramlási citometria segítségével, a módszer típusától függően. Az analitikai módszertől függetlenül a terméketlen férfiak spermájában gyakoribb a DNS fragmentáció, mint a termékeny férfiak spermájában. Az ICSI-n átesett párok körében az ejakulátumban a magas SDF-érték a férfiak 30%-ánál fordul elő, és általában rendellenes, hagyományos spermaparaméterekkel jár. De ez a magas SDF viszonylag gyakori megállapítás normál spermaparaméterekkel rendelkező, meddő férfiaknál is, egyes szerzők szerint akár 20-40%. Eltekintve az SDF teszt rutinszerű használatának megkérdőjelezhető szükségességétől a férfi meddőség értékelése során, a legújabb bizonyítékok azt mutatják, hogy a FAE ismerete klinikailag informatív lehet az asszisztált reprodukciós technikákkal (ART) elérhető eredmények becslésében. Bár a fragmentált DNS-sel rendelkező spermiumok látszólag hasonló hatékonysággal képesek megtermékenyíteni a petesejteket, mint a spermiumok DNS-fragmentáció nélkül, a károsodott apai kromatin negatív hatása általában a megtermelt embriók fejlődése során nyilvánul meg, ami fejlődési blokkoláshoz, beágyazódási kudarchoz vagy korai embrióvesztéshez vezet. csökkenti az ART sikerét.

Az SDF leküzdésére javasolt számos stratégia közül az ART-on átesett párok esetében az ejakulátum helyett azoospermiával nem rendelkező férfiaknál fokozott figyelmet kapott a here sperma alkalmazása, a különböző csoportok által közzétett közelmúltbeli eredmények miatt. A heréki spermiumok ICSI-hez való alkalmazásának biológiai valószínűsége az ejakulátumban magas SDF-értékkel rendelkező férfiaknál azon a megfigyeléseken alapul, hogy a herékből származó spermiumokban kisebb a DNS fragmentáció, mint az ejakulátumból származó spermiumokban. A meddő férfiak ejakulált spermájában a spermium kromatin integritásának megváltozása először is azzal magyarázható, hogy a kromatin tömörödése még mindig folyamatban van az epididimális tranzit során. Másodszor azért, mert túlzott ROS képződhet az epididimális hámsejtekben olyan stressztényezők hatására, mint a magas hőmérséklet és a környezeti feltételek. Végül, bizonyos endonukleázok hasíthatják az érett, élő spermiumok DNS-ét, és ennek eredményeként a spermium DNS-károsodása különböző utakon léphet fel, beleértve a hidroxilgyököt, a nitrogén-oxidot, valamint a spermium kaszpázok és endonukleázok aktiválását, így magyarázható az SDF pozitivitása ejakulált állapotban. spermium vagy meddő férfiak spermája.

Így az az elképzelés, hogy az oxidáció által kiváltott spermiumkromatin károsodás előfordulhat a herék utáni környezetben vagy a mellékhere áthaladása és tárolása során, és hogy a spermiumok jobb kromatinintegritásával járó visszanyerés érhető el a mellékhere megkerülésével, arra késztette a kutatókat, hogy megvizsgálják ennek felhasználását. here sperma, asszisztált reproduktív kezelésekhez. Tekintettel a heresperma ICSI-ben történő felhasználására vonatkozó klinikai döntés relevanciájára, különösen az ilyen beavatkozás eredendő kockázatai és klinikai következményei miatt, tisztázni kell a heresperma lehetséges előnyeit az ICSI számára ezekben az esetekben, és így meg kell határozni a lehetséges javulást, amelyet ez lehetővé tesz.

Legutóbbi munkánk arra vezetett, hogy szisztematikus áttekintésen és metaanalízisen keresztül megvizsgáljuk a rendelkezésre álló bizonyítékokat az ICSI eredményeiről here spermával (Testi-ICSI) és ejakulált spermiumokkal (Ejac-ICSI) nem azoospermiás meddő férfiaknál, akiknél igazolt posztherékkárosodás. A rendelkezésre álló információk közül az alábbiakat hasonlítottuk össze: 1) a Testi-ICSI és az Ejac-ICSI ICSI eredményeit a meddő férfiak körében, akiknek magas SDF-értéke (mindegyik vizsgálatban meghatározásra került) az ejakulátumban; és 2) az SDF aránya a meddő férfiak here spermájában és ejakulátumában, függetlenül attól, hogy ICSI adatokat szolgáltattak-e vagy sem. Figyelembe véve: 1) a vizsgálati populációt (ICSI-hiba anamnézisében, szemben az ICSI-hiba korábbi anamnézisével); 2) a résztvevők spermaelemzési profilja (oligozoospermia vs. normozoospermia); 3) az SDF-vizsgálat módszere; és 4) a spermiumok kinyerésének módszere, valamint ellentmondó bizonyítékok találása a Testi-ICSI nem nazoospermiás férfiakban történő alkalmazására és a spermiumlevételt követő szövődmények velejáró kockázatára vonatkozóan, tisztázni kell, hogy egy adott férfi meddőségi populáció részesülhet-e ebből a beavatkozásból.

Öt tanulmány hasonlította össze az ejakulált és a herék sperma közötti SDF-szinteket 143 olyan beteg esetében, akik saját kontrollként szolgáltak. Az átlagos SDF arány a herékben és az ejakulált spermiumokban 8,9 ± 5,1% és 33,4 ± 12,8% volt (P

A metaanalízisünkben szereplő tanulmányok többsége TUNEL tesztet használt, amelyet a terhesség előrejelzésének legpontosabb módszerének tartottak ART-ban, a vevő működési jelleggörbéje alatti területe 0,71 (95% CI 0,66-0,76). A tanulmányok közül négy a tiszta spermában lévő fragmentált DNS-t tartalmazó spermiumok 30%-os határértékét alkalmazta, hogy különbséget tegyen a normál és a magas SDF-minták között (34, 37, 40, 41), a többi tanulmány pedig 29%-os, 15%-os és 15%-os küszöbértéket használt. 7%. Nevezetesen, a Testi-ICSI és Ejac-ICSI adatokat tartalmazó négy tanulmány közül három megegyezik a magas SDF-ben szenvedő betegek osztályozására használt küszöbértékkel. Ezért a vita ellenére, hogy melyik spermium DNS-tesztet és küszöbértékeket kell klinikailag elfogadni, eredményeink arra utalnak, hogy a Testi-ICSI előnyös, ha az SDF-értékek meghaladják a 29%-ot. Az SDF-hez kapcsolódó számos állapot korrigálható lehet, beleértve a varicocele-t, az életmódbeli tényezőket és a genitális fertőzéseket, és potenciálisan lehetővé teszik vagy javítják a természetes fogantatás lehetőségét, vagy lehetővé teszik az ejakulált spermiumok használatát az ICSI-hez. Más esetekben megfontolandó lehet a herebiopszia. Végül, annak ellenére, hogy alacsony az általános DNS-károsodás, a herék spermájában magasabb az aneuploidia aránya. Egy közelmúltban megjelent cikkben az SDF aránya csaknem háromszor alacsonyabb volt a here spermájában, mint az ejakulált társakban (14,9±5,0% vs. 40,6± 14,8%; P

Tekintettel arra, hogy a magas SDF összefüggésben a Test-ICSI-ről rendelkezésre álló tanulmányok minősége és száma továbbra is korlátozott, további vizsgálatokra van szükség, különösen olyan randomizált, kontrollált vizsgálatokra, amelyek a korábbi munkák során még megoldatlan szempontokat értékelik. Például egyik tanulmány sem elemezte genetikailag a rendelkezésre álló embriókat, sem azok minőségét, nem is beszélve a fagyasztott embriók, majd a későbbi felengedett ciklusok összesített arányáról. Az eredmények számítása, nevezőként az embriótranszfert becsülve negatív torzítást vezet be, vagyis akaratlanul is elrejti a beavatkozás nagyobb hatását azzal, hogy a rendelkezésre álló embriók közül kiválasztja a jobb tulajdonságokkal rendelkező embriókat, és csak az embriók hozzájárulását veszi figyelembe. ezek (ezáltal kisebbek az összehasonlítandó csoportok közötti különbségek). A spermiumokkal kapcsolatos minden beavatkozásnak figyelembe kell vennie ezt a korlátot, mivel az a teljes embriócsoportot érinti, nem csak az átvitt embriókat, így a beavatkozás hatásának mértéke nem kellően értékelhető. Ez javítaná a hatás méretére vonatkozó becslés megfelelőségét, és lehetővé tenné az eredményeink klinikai jelentőségének jobb megítélését.

Ezenkívül a spermaminták fagyasztás és felolvasztás/kapacitáció utáni vizsgálata lehetővé teszi a laboratóriumi manipuláció által okozott iatrogén károsodások ellenőrzését, amelyet korábban nem vettek figyelembe, és a korábbi vizsgálatokból hiányzó nőstény szaporodási sikerhez hozzájáruló tényező szabályozását is. figyelembe kell venni munkánk során a potenciálisan befolyásoló változók statisztikai ellenőrzésével. A metaanalízisünk egyelőre azt mutatja, hogy a FAE-arányok alacsonyabbak a here spermájában, mint az ejakulált spermiumokban, és a klinikai eredmények magasabbak azoknál a férfiaknál, akiknél igazoltan poszt-herék SDF-et szenvedtek, ha Testi-ICSI-t használnak Ejac-ICSI helyett. Ezért a meglévő irodalom támogatja azt az ajánlást, hogy a Testi-ICSI-t olyan férfiak kiválasztott csoportjainál alkalmazzák, akiknél ejakulátumban igazolt poszt-herék SDF. Tekintettel az áttekintett vizsgálatok általánosságban alacsony vagy közepes minőségére, valamint a spermiumok kinyerésével kapcsolatos lehetséges kockázatokra, további megerősítő bizonyítékok szükségessége alternatív prospektív megközelítést alkalmazva indokolt. Jelenleg a Testi-ICSI-t azoknak a férfiaknak kell fenntartani, akiknek jelentős AEF-je van ART-nak, különösen azoknak, akiknél ismétlődő ICSI-hibák voltak, és ha az SDF-et okozó egyéb mögöttes tényezők kijavítására irányuló intézkedések kudarcot vallottak.