Сравнение результатов ИКСИ в циклах с использованием сперматозоидов из яичек и эякулята от пар с высоким SDF

С момента своего первого описания в 1992 году интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ) широко использовалась для преодоления всех форм тяжелого мужского бесплодия. Несмотря на достижение приемлемых показателей успеха при использовании аномальной спермы, исследования показывают, что низкое качество спермы может отрицательно сказаться на результатах ИКСИ. ДНК сперматозоидов играет критическую роль в нормальном эмбриональном развитии, поскольку генетическая информация, передаваемая следующему поколению, зависит от ее целостности (6-8). Ухудшение содержания ДНК сперматозоидов было связано с несколькими состояниями, включая образ жизни и воздействие гонадотоксинов, варикоцеле, инфекции мужских добавочных желез и преклонный возраст отца.

Тесты фрагментации ДНК сперматозоидов (SDF) измеряют долю сперматозоидов с поврежденным хроматином, используя зонды или красители для выявления разрывов ДНК с помощью флуоресцентной микроскопии, световой микроскопии или проточной цитометрии в зависимости от типа метода. Независимо от аналитического метода фрагментация ДНК чаще встречается в сперме бесплодных мужчин, чем фертильных мужчин. Среди пар, подвергающихся ИКСИ, высокий уровень SDF в эякуляте обнаруживается у 30% мужчин и обычно связан с аномальными обычными параметрами спермы. Но этот высокий SDF также является относительно частым явлением у бесплодных мужчин с нормальными параметрами спермы, до 20–40%, по данным некоторых авторов. Помимо сомнительной необходимости рутинного использования теста SDF при оценке мужского бесплодия, последние данные указывают на то, что знание FAE может быть клинически информативным при оценке результатов, которые должны быть получены с помощью вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Хотя сперматозоиды с фрагментированной ДНК могут оплодотворять ооцит с явно такой же эффективностью, что и сперматозоиды без фрагментации ДНК, негативное влияние поврежденного отцовского хроматина обычно проявляется во время развития полученных эмбрионов, что приводит к блокировке развития, неудаче имплантации или ранней потере эмбриона, таким образом снижение успеха ВРТ.

Среди многих стратегий, предложенных для преодоления SDF у пар, проходящих ВРТ, использование спермы из яичек вместо эякулята у мужчин без азооспермии привлекло повышенное внимание благодаря недавним результатам, опубликованным различными группами. Биологическая достоверность использования сперматозоидов яичек для ИКСИ у мужчин с высоким уровнем SDF в эякуляте основана на наблюдениях за меньшей фрагментацией ДНК в сперме из яичка по сравнению со спермой из эякулята. Изменение целостности хроматина сперматозоидов в эякулированных сперматозоидах бесплодных мужчин может быть объяснено, во-первых, тем, что уплотнение хроматина все еще продолжается во время эпидидимального транзита. Во-вторых, из-за того, что избыточное количество АФК может образовываться в эпителиальных клетках придатка яичка при стрессовых факторах, таких как высокие температуры и условия окружающей среды. Наконец, некоторые эндонуклеазы могут расщеплять ДНК зрелых живых сперматозоидов, в результате чего повреждение ДНК сперматозоидов может происходить различными путями, включая гидроксильный радикал, оксид азота и активацию каспаз и эндонуклеаз сперматозоидов, что объясняет положительный результат на SDF в эякуляте. сперма или сперма бесплодных мужчин.

Таким образом, представление о том, что вызванное окислением повреждение хроматина сперматозоидов может происходить в посттестикулярной среде или при транзите и хранении придатка яичка, и что восстановление сперматозоидов с улучшенной целостностью хроматина может быть достигнуто, если обойти эпидидимис, побудило исследователей изучить использование тестикулярной спермы для вспомогательных репродуктивных технологий. Из-за актуальности клинического решения прибегнуть к использованию тестикулярной спермы для ИКСИ, особенно из-за неотъемлемых рисков и клинических последствий такого вмешательства, в этих случаях необходимо уточнить потенциальную пользу тестикулярной спермы для ИКСИ и, таким образом, чтобы определить потенциальное улучшение, которое это может позволить.

Наша последняя работа побудила нас изучить имеющиеся данные о результатах ИКСИ с тестикулярной спермой (Testi-ICSI) и эякулированной спермой (Ejac-ICSI) среди мужчин с бесплодием без азооспермии и подтвержденным посттестикулярным повреждением посредством систематического обзора и метаанализа. из доступной информации, где мы сравнили: 1) результаты ИКСИ Testi-ICSI и Ejac-ICSI среди бесплодных мужчин с высоким SDF (как определено в каждом исследовании) в эякуляте; и 2) уровни SDF среди тестикулярной спермы и эякулятов бесплодных мужчин, независимо от того, были ли предоставлены данные ИКСИ. Принимая во внимание: 1) исследуемую популяцию (история неудачи ИКСИ по сравнению с отсутствием неудачи ИКСИ в анамнезе); 2) профиль анализа спермы участников (олигозооспермия против нормозооспермии); 3) методика испытаний СДФ; и 4) метод извлечения спермы и обнаружение противоречивых данных относительно использования Testi-ICSI у мужчин без азооспермии и неотъемлемого риска осложнений после извлечения спермы, необходимо уточнить, может ли какое-либо конкретное мужское бесплодие получить пользу от этого вмешательства.

Пять исследований сравнивали уровни SDF в эякуляте и тестикулярной сперме у 143 пациентов, которые служили их собственным контролем. Средние показатели SDF в тестикулярной и эякулированной сперме составили 8,9 ± 5,1% и 33,4 ± 12,8% (P

В большинстве исследований, включенных в наш метаанализ, использовался анализ TUNEL, который считается наиболее точным методом прогнозирования беременности при ВРТ, с площадью под кривой рабочей характеристики приемника 0,71 (95% ДИ 0,66–0,76). В четырех исследованиях использовалось пороговое значение 30% сперматозоидов с фрагментированной ДНК в чистой сперме для различения образцов с нормальным и высоким SDF (34, 37, 40, 41), а в остальных исследованиях использовались пороговые значения 29%, 15% и 7%. Примечательно, что три из четырех исследований, в которых представлены данные Testi-ICSI и Ejac-ICSI, согласуются с пороговым значением, используемым для классификации пациентов с высоким SDF. Таким образом, несмотря на разногласия по поводу того, какие тесты ДНК сперматозоидов и пороговые значения следует применять в клинической практике, наши результаты показывают, что Testi-ICSI полезен, когда значения SDF превышают 29%. Многие состояния, связанные с SDF, могут быть излечимы, включая варикоцеле, факторы образа жизни и генитальные инфекции, и потенциально делают возможным или улучшают возможность естественного зачатия или позволяют использовать эякулированную сперму для ИКСИ. В других случаях можно рассмотреть биопсию яичка. Наконец, несмотря на низкий общий уровень повреждения ДНК, тестикулярные сперматозоиды могут иметь более высокие показатели анеуплоидии. В недавней статье показатели SDF были почти в три раза ниже в тестикулярных сперматозоидах, чем в эякулированных аналогах (14,9 ± 5,0% против 40,6 ± 14,8%; п

Учитывая, что качество и количество доступных исследований Тест-ИКСИ в контексте высокого SDF все еще ограничены, необходимы дальнейшие исследования, особенно рандомизированные контролируемые испытания, в которых оцениваются различные аспекты, еще не решенные в предыдущей работе. Например, ни в одном из исследований не проводился генетический анализ ни имеющихся эмбрионов, ни их качества, не говоря уже о кумулятивных показателях, полученных с замороженными эмбрионами и впоследствии в последующих циклах размораживания. Подсчет результатов, оценивающий перенос эмбрионов в знаменателе, вносит отрицательное смещение, то есть непреднамеренно скрывает больший эффект вмешательства, отбирая среди имеющихся эмбрионов те, которые обладают лучшими характеристиками, и принимая во внимание только вклад эти (таким образом уменьшая различия между сравниваемыми группами). Любое вмешательство, проводимое в отношении сперматозоидов, должно учитывать это ограничение, поскольку оно влияет на всю когорту эмбрионов, а не только на пересаженные эмбрионы, и, таким образом, величина эффекта вмешательства не может быть адекватно оценена. Это улучшит адекватность оценки размера эффекта и позволит лучше судить о клинической значимости наших результатов.

Кроме того, исследование образцов спермы после замораживания и оттаивания/капацитации позволяет контролировать ятрогенные повреждения, вызванные лабораторными манипуляциями, что ранее не рассматривалось, а также контроль женского фактора, способствующего репродуктивному успеху, который отсутствовал в предыдущих исследованиях. следует учитывать в нашей работе путем статистического контроля потенциально влияющих переменных. В настоящее время наш мета-анализ показывает, что частота FAE ниже в сперме яичка, чем в эякулированной сперме, а клинические результаты выше у мужчин с подтвержденным посттестикулярным SDF, когда используется Testi-ICSI, а не Ejac-ICSI. Таким образом, существующая литература поддерживает рекомендацию использовать Testi-ICSI в отдельных группах мужчин с подтвержденным посттестикулярным SDF в эякуляте. Учитывая, как правило, качество рассмотренных исследований от низкого до среднего, а также потенциальные риски, связанные с получением спермы, оправдана потребность в дополнительных подтверждающих доказательствах с использованием альтернативного проспективного подхода. В настоящее время Testi-ICSI следует зарезервировать для мужчин с выраженной НФВ, получающих АРТ, особенно у тех, у кого были повторные неудачи ИКСИ и когда меры по коррекции других основных факторов, вызывающих SDF, оказались безуспешными.