ICSI-tulosten vertailu sykleissä, joissa käytetään kivesten ja siemensyöksyn siittiöitä pariskunnilta, joilla on korkea SDF

Ensimmäisestä kuvauksestaan ​​vuonna 1992 lähtien intrasytoplasmista siittiöinjektiota (ICSI) on käytetty laajalti kaikenlaisen vakavan miespuolisen tekijän hedelmättömyyden voittamiseksi. Huolimatta hyväksyttävistä onnistumisprosenteista epänormaalien siittiöiden käytöllä, tutkimukset viittaavat siihen, että siittiöiden huono laatu voi olla haitallista ICSI-tuloksille. Siittiöiden DNA:lla on kriittinen rooli normaalissa alkionkehityksessä, koska seuraavalle sukupolvelle siirtyvä geneettinen informaatio riippuu sen eheydestä (6-8). Siittiöiden DNA-sisällön heikkeneminen on yhdistetty useisiin tiloihin, mukaan lukien elämäntapa ja gonadotoksiineille altistuminen, varicocele, miehen lisärauhasten infektiot ja pitkälle isän ikä.

Sperman DNA-fragmentointitesteillä (SDF) mitataan vaurioituneen kromatiinin omaavien siittiöiden osuutta käyttämällä koettimia tai värjäyksiä DNA-katkojen tunnistamiseen fluoresenssimikroskopian, valomikroskopian tai virtaussytometrian avulla menetelmän tyypistä riippuen. Analyysimenetelmästä riippumatta DNA-fragmentoituminen on yleisempää hedelmättömien miesten kuin hedelmällisten miesten siittiöissä. ICSI-hoitoa saavien parien joukossa korkea SDF siemensyöksyssä on 30 %:lla miehistä, ja se liittyy yleensä epänormaaleihin tavanomaisiin siemennesteen parametreihin. Mutta tämä korkea SDF on myös suhteellisen yleinen löydös hedelmättömillä miehillä, joilla on normaalit siemennesteen parametrit, joidenkin kirjoittajien mukaan jopa 20–40 prosenttia. Sen lisäksi, että on kyseenalaista tarvetta käyttää rutiininomaisesti SDF-testiä miesten hedelmättömyyden arvioinnin aikana, viimeaikaiset todisteet osoittavat, että FAE:n tunteminen voi olla kliinisesti informatiivista arvioitaessa avusteisilla lisääntymistekniikoilla (ART) saavutettavia tuloksia. Vaikka siittiöt, joissa on fragmentoitunut DNA, voivat hedelmöittää munasolun näennäisesti samalla teholla kuin siittiöistä ilman DNA:n fragmentoitumista, vaurioituneen isän kromatiinin negatiivinen vaikutus ilmenee yleensä tuotettujen alkioiden kehityksen aikana, mikä johtaa kehityksen tukkeutumiseen, istuttamisen epäonnistumiseen tai varhaiseen alkion menettämiseen. heikentää ART:n menestystä.

Monien strategioiden joukossa, joita on ehdotettu SDF:n voittamiseksi pariskunnille, joille tehdään ART, kivesten siittiöiden käyttö ejakulaatin sijasta miehillä, joilla ei ole atsoospermiaa, on saanut lisääntynyttä huomiota eri ryhmien äskettäin julkaisemien tulosten vuoksi. Biologinen todennäköisyys käyttää kivesten siittiöitä ICSI:ssä miehillä, joiden siemensyöksyssä on korkea SDF, perustuu havaintoihin, joiden mukaan kiveksestä peräisin olevassa siittiössä on vähemmän DNA:n fragmentoitumista verrattuna siemensyöksyssä oleviin siittiöihin. Siittiöiden kromatiinin eheyden muutos hedelmättömien miesten siemensyöksyssä voidaan selittää ensinnäkin sillä, että kromatiinin tiivistyminen jatkuu edelleen lisäkiveksen kuljetuksen aikana. Toiseksi, koska liiallinen ROS voi muodostua lisäkivesepiteelisoluissa stressitekijöiden, kuten korkeiden lämpötilojen ja ympäristöolosuhteiden, vaikutuksesta. Lopuksi, tietyt endonukleaasit voivat pilkkoa kypsän elävän siittiön DNA:ta ja sen seurauksena siittiön DNA:ta voi vaurioitua eri reiteillä, mukaan lukien hydroksyyliradikaali, typpioksidi ja siittiöiden kaspaasien ja endonukleaasien aktivaatio, mikä selittää SDF-positiivisuuden siemensyöksyssä. siittiöitä tai hedelmättömien miesten siittiöitä.

Näin ollen käsitys, jonka mukaan hapettumisen aiheuttamaa siittiöiden kromatiinivauriota voi esiintyä kivesten jälkeisessä ympäristössä tai lisäkiveksen kuljetuksessa ja varastoinnissa ja että siittiöiden palautuminen kromatiinin eheyteen parantuneena voidaan saavuttaa, jos lisäkives ohitetaan, on saanut tutkijat tutkimaan käyttöä. kivesten siittiöistä avusteisia lisääntymishoitoja varten. Koska kliininen päätös turvautua kivesten siittiöiden käyttöön ICSI:ssä on merkityksellinen, erityisesti tällaisen toimenpiteen luontaisten riskien ja kliinisten vaikutusten vuoksi, kivesten siittiöiden mahdollinen hyöty ICSI:lle on näissä tapauksissa selvitettävä ja näin ollen määrittää mahdolliset parannukset, jotka se voisi mahdollistaa.

Viimeisin työmme sai meidät tutkimaan saatavilla olevaa näyttöä ICSI-tuloksista kivesten siittiöillä (Testi-ICSI) ja siemensyöksyllä (Ejac-ICSI) ei-azoospermisillä hedelmättömillä miehillä, joilla on vahvistettu kivesvaurion jälkeinen vaurio järjestelmällisen tarkastelun ja meta-analyysin avulla. saatavilla olevasta tiedosta, jossa vertailimme: 1) Testi-ICSI:n ja Ejac-ICSI:n ICSI-tuloksia hedelmättömillä miehillä, joilla on korkea SDF (kukin tutkimuksessa määritelty) siemensyöksyssä; ja 2) SDF-määrät hedelmättömien miesten kivesten siittiöiden ja siemensyöksyiden joukossa riippumatta siitä, toimitettiinko ICSI-tietoja vai ei. Ottaen huomioon: 1) tutkimuspopulaatio (ICSI-vian historia vs. ei aikaisempaa ICSI-vikaa); 2) osallistujien siemennesteanalyysiprofiili (oligozoospermia vs. normozoospermia); 3) SDF-testausmenetelmä; ja 4) siittiöiden talteenottomenetelmä ja ristiriitaisten todisteiden löytäminen Testi-ICSI:n käytöstä ei-nazoospermisillä miehillä ja siittiöiden hakuun liittyvien komplikaatioiden luontaisista riskeistä, on tarpeen selvittää, voiko jokin tietty miesten hedelmättömyyspopulaatio hyötyä tästä interventiosta.

Viidessä tutkimuksessa verrattiin SDF-tasoja siemensyöksyssä ja kivesten siittiöiden välillä 143 potilaalla, jotka toimivat heidän omana kontrollinaan. Keskimääräiset SDF-määrät kiveksissä ja siemensyöksyssä oli 8,9 ± 5,1 % ja 33,4 ± 12,8 % (P

Suurin osa meta-analyysiimme sisältyvistä tutkimuksista käytti TUNEL-määritystä, jota on pidetty tarkimpana menetelmänä raskauden ennustamiseen ART:ssa. Vastaanottimen toimintakäyrän alapuolella oleva pinta-ala oli 0,71 (95 % CI 0,66-0,76). Neljässä tutkimuksessa käytettiin raja-arvoa 30 % siittiöistä, joissa oli fragmentoitunutta DNA:ta puhtaassa siemennesteessä erottamaan normaalit ja korkeat SDF-näytteet (34, 37, 40, 41), ja muissa tutkimuksissa käytettiin kynnysarvoja 29 %, 15 % ja 7 %. Erityisesti kolme neljästä Testi-ICSI- ja Ejac-ICSI-tietoja tuottaneesta tutkimuksesta sopivat raja-arvosta, jota käytetään luokiteltaessa potilaita, joilla on korkea SDF. Siksi huolimatta kiistasta siitä, mikä siittiöiden DNA-testi ja kynnysarvot tulisi ottaa käyttöön kliinisesti, tuloksemme viittaavat siihen, että Testi-ICSI on hyödyllinen, kun SDF-arvot ylittävät 29%. Monet SDF:ään liittyvät sairaudet voivat olla korjattavissa, mukaan lukien varicocele, elämäntapatekijät ja sukupuolielinten infektiot, ja ne voivat mahdollistaa tai parantaa luonnollisen hedelmöittymisen mahdollisuutta tai sallia siemensyöksyn käytön ICSI:ssä. Muissa tapauksissa kivesten biopsia voi olla harkittava vaihtoehto. Lopulta huolimatta alhaisesta DNA-vauriosta huolimatta kivesten siittiöillä voi olla korkeampi aneuploidia. Äskettäin julkaistussa julkaisussa SDF-luvut olivat lähes kolme kertaa alhaisemmat kivesten siittiöissä kuin siemensyöksyssä olevissa vastaavissa (14,9 ± 5,0 % vs. 40,6 ± 5,0 % 14,8 %; P

Koska saatavilla olevien Test-ICSI-tutkimusten laatu ja määrä korkean SDF:n yhteydessä ovat edelleen rajalliset, tarvitaan lisätutkimuksia, erityisesti satunnaistettuja kontrolloituja kokeita, jotka arvioivat eri näkökohtia, jotka ovat vielä ratkaisematta aiemmassa työssä. Esimerkiksi yhdessäkään tutkimuksessa ei analysoitu geneettisesti saatavilla olevia alkioita eikä niiden laatua, puhumattakaan jäädytetyillä alkioilla saaduista kumulatiivisista määristä ja myöhemmin sulatetuista sykleistä. Tulosten laskennassa, jossa nimittäjänä on arvioitu alkionsiirto, tuodaan negatiivinen harha, toisin sanoen piilotetaan tahattomasti toimenpiteen suurempi vaikutus valitsemalla saatavilla olevista alkioista ne, joilla on paremmat ominaisuudet, ja huomioimalla vain nämä (jolloin vertailtavien ryhmien väliset erot pienenevät). Kaikissa siittiöihin liittyvissä interventioissa on otettava tämä rajoitus huomioon, koska se vaikuttaa koko alkiokohorttiin, ei vain siirrettyihin alkioihin, eikä toimenpiteen vaikutuksen suuruutta näin ollen arvioida riittävästi. Tämä parantaisi vaikutuksen kokoarvion riittävyyttä ja mahdollistaisi paremman arvion löydöstemme kliinisestä merkityksestä.

Lisäksi siemennestenäytteiden tutkiminen pakastamisen ja sulatuksen/kapasitoinnin jälkeen mahdollistaa laboratoriokäsittelyn aiheuttamien iatrogeenisten vaurioiden hallinnan, mitä ei ollut aiemmin otettu huomioon, ja aiemmissa tutkimuksissa puuttuvan naaraspuolisen lisääntymismenestystä edistävän tekijän hallinnan. ottaa huomioon työssämme, valvomalla tilastollisesti mahdollisesti vaikuttavia muuttujia. Toistaiseksi meta-analyysimme osoittaa, että FAE-luvut ovat alhaisemmat kivesten siittiöissä kuin siemensyöksyssä, ja kliiniset tulokset ovat korkeammat miehillä, joilla on vahvistettu kivesten jälkeinen SDF, kun käytetään Testi-ICSI:tä Ejac-ICSI:n sijaan. Siksi olemassa oleva kirjallisuus tukee suositusta Testi-ICSI:n käyttämisestä valituissa miesryhmissä, joilla on vahvistettu kivesten jälkeinen SDF siemensyöksyssä. Koska tarkasteltujen tutkimusten laatu on yleensä heikko tai kohtalainen, ja siittiöiden talteenottoon liittyvät mahdolliset riskit, on perusteltua hankkia lisää vahvistavaa näyttöä käyttämällä vaihtoehtoista prospektiivista lähestymistapaa. Tällä hetkellä Testi-ICSI tulisi varata miehille, joilla on huomattava AEF ja joille tehdään ART, erityisesti niille, jotka ovat kokeneet toistuvia ICSI-vikoja ja kun toimenpiteet muiden SDF:ää aiheuttavien taustatekijöiden korjaamiseksi ovat epäonnistuneet.