Effetto dell'estratto di germogli di broccoli sulla differenziazione dei cheratinociti nella pelle normale

10 volontari adulti, inclusi partecipanti afroamericani, caucasici, maschi e femmine, saranno reclutati dai genitori dei pazienti visitati nella clinica di dermatologia pediatrica. Ogni partecipante riceverà 7 ml di estratto di germogli di broccoli (BSE) in olio di jojoba, contenente 3500 nmol di sulforafano (vedere la preparazione dell'estratto di germogli di broccoli di seguito). Ogni notte verranno applicati 500 nmol di sulforafano. I partecipanti applicheranno la miscela BSE-olio di jojoba su un cerchio di 3 cm di diametro sulla parte superiore del braccio ogni notte per 7 notti consecutive. Il braccio di controllo avrà solo olio di jojoba applicato. Entrambe le braccia saranno occluse con saran ogni notte. Dopo la settima notte, ai volontari verrà prelevata una biopsia di 6 mm da ciascun braccio (2 in totale), eseguita da un residente in dermatologia. Le biopsie saranno pulite con alcool, intorpidite con 0.5-1cc di lidocaina all'1% con epinefrina e chiuse con una sutura non assorbibile in nylon 4-0. Il sito della biopsia sarà coperto con vaselina e un cerotto. L'area verrà tenuta coperta per 24 ore, dopodiché potrà essere lavata con acqua e sapone e poi recuperata con vaselina e cerotto. La sutura verrà rimossa 10-14 giorni dopo la procedura. Dalla visita iniziale fino alla visita finale per la rimozione della sutura, prevediamo che la durata della prova duri circa 1 mese. Ai partecipanti verrà detto di evitare di applicare farmaci topici o lozioni o creme da banco per tutta la durata dello studio e verrà anche detto di lavarsi con il sapone Dove sotto la doccia. Verrà inoltre consigliato loro di evitare una dieta ricca di piante crocifere come broccoli, senape e rafano. I risultati della biopsia saranno divisi ciascuno a metà. Una metà da congelare per il criosezionamento e la colorazione con immunofluorescenza e l'altra metà da utilizzare per l'estrazione di proteine ​​o RNA per analisi molecolari (reazione a catena della polimerasi in tempo reale e/o reazione a catena della polimerasi quantitativa per RNA messaggeri selezionati e western blotting per antigeni proteici selezionati) . I livelli di cheratina 1, cheratina 5, cheratina 10, cheratina 14, cheratina 16, cheratina 17 e Nrf2 saranno studiati sia con immunofluorescenza che con RNA PCR.