Chiarimento della base molecolare e biochimica della malattia da mutazione AhR umana

In uno studio precedente, abbiamo identificato una famiglia consanguinea del nord di Israele con tre bambini affetti da nistagmo infantile idiopatico (IIN) e ipoplasia foveale, che seguono una modalità autosomica recessiva di ereditarietà del gene AhR. in questo studio:

1. Per determinare se il fenotipo della malattia è la conseguenza di una diminuzione o assenza di attività AHH indotta da AHR. A tal fine, l'attività dell'enzima AHH basale e ligando-mediata sarà confrontata in membri della famiglia eterozigoti e omozigoti rispetto a volontari sani.
2. Esaminare i livelli proteici allo stato stazionario della proteina AHR nelle cellule di pazienti omo ed eterozigoti rispetto a quelli di volontari sani. Se non viene rilevata alcuna proteina mutante, determineremo l'effetto della mutazione sulla stabilità dell'mRNA.
3. Analizzare i livelli allo stato stazionario delle proteine ​​partner correlate (come ANRT) e i livelli delle proteine ​​​​dei bersagli trascrizionali (AHH) nei membri della famiglia eterozigoti e omozigoti rispetto ai volontari sani.
4. Per studiare la capacità dell'allele mutante di indurre l'attivazione trascrizionale in un sistema di test di lievito ingegnerizzato. Useremo un ceppo di lievito ingegnerizzato per contenere AHR umano e traslocatore nucleare AHR insieme a un gene reporter per indagare se la mutazione interferisce con l'attivazione della trascrizione.