Studio della risposta del tumore alla tirapazamina durante il trattamento del cancro cervicale

I pazienti con carcinoma cervicale localmente avanzato possono avere un esito clinico sfavorevole con il cisplatino standard e la radioterapia pelvica. È ben noto che l'ipossia tumorale pre-trattamento è un fattore prognostico significativo nei tumori e può essere uno dei meccanismi più importanti e modificabili della resistenza alle radiazioni in questo gruppo di tumori. Livelli significativi di ipossia non sono presenti in tutti i tumori cervicali localmente avanzati. Pertanto la misurazione dello stato di ossigenazione del tumore prima del trattamento è imperativa e può essere valutata utilizzando vari mezzi. È possibile eseguire la colorazione immunoistochimica di vari marcatori di ipossia intrinseca per includere Ca9, Glut1, HIF-1 alfa sui tumori pretrattamento.

È stato scoperto che la tirapazamina, un agente antitumorale selettivo delle cellule ipossiche attivato in modo bioriduttivo, agisce in sinergia con il cisplatino, determinando un'uccisione cellulare significativamente più elevata del previsto sulla base dell'azione additiva. Abbiamo proposto di misurare l'effetto di uccisione cellulare della tirapazamina con i seguenti test:

• Saggio della cometa: la tirapazamina provoca danni al DNA che possono prevedere l'uccisione delle cellule misurando il danno al DNA nelle cellule dalle biopsie tumorali utilizzando il test della cometa alcalina.
• Misurazione della fosforilazione dell'istone gamma H2AX: è stata esplorata come misura della radiosensibilità in risposta a dosi di radiazioni clinicamente rilevanti. La fosforilazione dell'istone gamma H2AX può essere utilizzata per rilevare le rotture del doppio filamento del DNA indotte dalla tirapazamina e le forcelle di replicazione collassate.

Ci sono alcune prove che la somministrazione del farmaco potrebbe essere compromessa e in effetti il ​​farmaco potrebbe non raggiungere effettivamente tutte le cellule tumorali ipossiche. Uno studio recente ha dimostrato che, in un contesto sperimentale, la tirapazamina provoca una diminuzione della perfusione vascolare che può essere misurata con la risonanza magnetica con mezzo di contrasto. Ci proponiamo di valutare se questo meccanismo è operativo nei tumori umani.

Studi clinici hanno dimostrato che il tumore vascolare può aumentare durante il corso della radioterapia, coerentemente con la riossigenazione e che ciò è indicativo di un esito migliore. I tumori che diventano meno ipossici durante il corso della terapia hanno una maggiore probabilità di risposta al trattamento dato. Tuttavia, la risposta alla tirapazamina può essere ridotta. Al fine di valutare sia il cambiamento vascolare che può verificarsi direttamente a causa dell'infusione di tirapazamina, sia qualsiasi aumento della vascolarizzazione del tumore e forse aumento dell'ossigenazione del tumore durante il corso della terapia, prevediamo di valutare questi tumori durante il corso della terapia. La valutazione della perfusione tumorale e della permeabilità vasale dopo 10 trattamenti con radiazioni (il giorno 12) di chemio-radioterapia sarà eseguita mediante risonanza magnetica potenziata con contrasto dinamico pesata in T1 (DCMRI).

Ipotizziamo che:

1. La tirapazamina (una citotossina cellulare ipossica e radiosensibilizzante) provocherà un aumento del danno al DNA e un migliore esito clinico se:

   1. il tumore prima del trattamento mostra un'ipossia significativa
   2. il trattamento con tirapazamina provoca un aumento del danno al DNA
2. la tirapazamina agisce, in parte, modificando la perfusione vascolare nel tumore e questi cambiamenti possono essere misurati con la risonanza magnetica con contrasto dinamico.