Estudo da resposta tumoral à tirapazamina durante o tratamento do câncer cervical

Pacientes com câncer cervical localmente avançado podem ter um desfecho clínico ruim com cisplatina padrão e radioterapia pélvica. Está bem estabelecido que a hipóxia tumoral pré-tratamento é um fator prognóstico significativo em tumores e pode ser um dos mecanismos mais importantes e modificáveis ​​de resistência à radiação neste grupo de tumores. Níveis significativos de hipóxia não estão presentes em todos os tumores cervicais localmente avançados. Portanto, a medição do estado de oxigenação do tumor pré-tratamento é imperativa e pode ser avaliada por vários meios. A coloração imuno-histoquímica de vários marcadores de hipóxia intrínseca para incluir Ca9, Glut1, HIF-1 alfa nos tumores pré-tratamento pode ser realizada.

A tirapazamina, um agente antitumoral seletivo para células hipóxicas ativado biorredutivamente, demonstrou agir sinergicamente com a cisplatina, resultando em uma morte celular significativamente maior do que o esperado com base na ação aditiva. Propusemos medir o efeito de morte celular da tirapazamina com os seguintes testes:

• Ensaio do cometa: a tirapazamina causa danos ao DNA que podem prever a morte celular medindo os danos ao DNA em células de biópsias de tumor usando o ensaio do cometa alcalino.
• Medição da fosforilação da histona gama H2AX: Foi explorada como uma medida da radiossensibilidade em resposta a doses clinicamente relevantes de radiação. A fosforilação de histona gama H2AX pode ser usada para detectar quebras de fita dupla de DNA induzidas por tirapazamina e forquilhas de replicação colapsadas.

Há alguma evidência de que a administração do fármaco pode ser prejudicada e, de fato, o fármaco pode não atingir todas as células tumorais hipóxicas. Um estudo recente mostrou que, em um cenário experimental, a tirapazamina causa uma diminuição na perfusão vascular que pode ser medida com ressonância magnética com contraste. Propomos avaliar se este mecanismo é operativo em tumores humanos.

Estudos clínicos demonstraram que a vascularização do tumor pode aumentar durante o curso da radioterapia, consistente com a reoxigenação e que isso é sugestivo de um melhor resultado. Os tumores que se tornam menos hipóxicos durante o curso da terapia têm maior probabilidade de resposta ao tratamento administrado. No entanto, a resposta à tirapazamina pode ser reduzida. A fim de avaliar a alteração vascular que pode ocorrer diretamente devido à infusão de tirapazamina, bem como qualquer aumento na vascularização do tumor e talvez aumento na oxigenação do tumor durante o curso da terapia, planejamos avaliar esses tumores durante o curso da terapia. A avaliação da perfusão do tumor e da permeabilidade dos vasos após 10 tratamentos de radiação (no dia 12) de quimio-radioterapia será realizada por meio de ressonância magnética dinâmica ponderada em T1 (DCMRI).

Nós hipotetizamos que:

1. A tirapazamina (uma citotoxina de células hipóxicas e radiossensibilizador) resultará em aumento do dano ao DNA e um melhor resultado clínico se:

   1. o tumor pré-tratamento demonstra hipóxia significativa
   2. O tratamento com tirapazamina resulta em aumento do dano ao DNA
2. a tirapazamina atua, em parte, alterando a perfusão vascular no tumor e que essas alterações podem ser medidas com ressonância magnética com contraste dinâmico.