CO2 intranasale per rinite allergica

Disegno dello studio: abbiamo eseguito uno studio crossover randomizzato a due vie in soggetti con rinite allergica stagionale fuori stagione. I soggetti sono venuti al Laboratorio di Fisiologia Nasale per lo screening, dove hanno completato un questionario sulle allergie e sono stati sottoposti a test cutanei per la conferma di un'allergia all'erba o all'ambrosia. Il test cutaneo includeva controlli positivi e negativi e i risultati sono stati classificati rispetto ai controlli da 1+ a 4+ (1+: pomfo più grande del controllo negativo e più piccolo del controllo positivo; 2+: pomfo 5-7 mm; 3+: pomfo: pomfo 7-10 mm; 4+: qualsiasi reazione con pomfo >10 mm o pseudopodi pronunciati). I soggetti con test cutaneo positivo (tra 2+ e 4+) e una storia positiva di sintomi allergici durante le stagioni pertinenti sono stati quindi sottoposti a screening nasale con allergene dell'erba o dell'ambrosia. I soggetti che hanno superato il test di screening (raddoppiamento delle secrezioni nasali ipsilaterali o controlaterali dopo il test dell'allergene rispetto al diluente) hanno avuto un periodo di washout di 2 settimane e sono tornati al laboratorio, dove sono stati randomizzati a ricevere il trattamento intranasale con CO2 o nessun trattamento . Trenta minuti dopo il trattamento, i soggetti sono stati sottoposti a test nasale con allergene. Sette soggetti sono stati sfidati con l'ambrosia e cinque soggetti sono stati sfidati con l'erba. I soggetti hanno avuto un altro periodo di washout di 2 settimane e sono stati quindi trasferiti all'altro trattamento seguito da una sfida simile. Il lavoro precedente nel nostro laboratorio utilizzando un sistema di sfida simile ha mostrato che i cambiamenti infiammatori indotti da allergeni sono tornati al basale 2 settimane dopo la sfida.

Soggetti: hanno partecipato dodici soggetti. I soggetti sono stati studiati al di fuori della loro stagione allergica. Tutti i soggetti erano sani ad eccezione dell'asma lieve che richiedeva solo broncodilatatori al bisogno. Non assumevano alcun farmaco e non avevano ricevuto antistaminici o antagonisti del recettore dei leucotrieni per almeno 1 settimana e steroidi intranasali per almeno 1 mese prima dell'arruolamento e per la durata dello studio.

Trattamento: la CO2 è stata applicata per 10 secondi in ciascuna narice utilizzando uno speciale applicatore (nasello in plastica a tenuta stagna) collegato a una bomboletta di CO2 e una valvola di controllo del flusso. È stato erogato a una portata di 0,5 L/min standard con la bocca aperta per evitare l'inalazione. Pertanto, per una durata di somministrazione di 20 secondi, la dose totale di CO2 erogata è stata di 167 ml. La quantità di CO2 erogata alla mucosa non è nota. Il braccio senza trattamento ha comportato il posizionamento del dispositivo ma non è stato erogato gas. Pertanto, né i soggetti né i ricercatori erano accecati dal trattamento somministrato. Il braccio senza trattamento non prevedeva l'erogazione di aria senza CO2 al naso perché eravamo preoccupati che soffiare aria secca nel naso potesse causare una reazione della mucosa che potesse confondere i risultati. In precedenza abbiamo dimostrato che le sfide dell'aria fredda e secca creano un ambiente iperosmolare, innescano l'attivazione dei mastociti e inducono una reazione nasonasale.7 Pertanto, poiché il nostro risultato primario era la misura oggettiva del riflesso nasonasale, abbiamo evitato questa possibilità.

Sfida nasale: ai soggetti sono stati concessi 15 minuti per acclimatarsi all'ambiente di laboratorio prima della sfida. Sono stati registrati starnuti basali che riflettevano i 15 minuti di acclimatazione e sintomi nasali e oculari seguiti dalla raccolta di un raschiamento nasale per la quantificazione degli eosinofili nelle secrezioni nasali. Gli starnuti sono stati registrati dai soggetti durante ciascuno degli intervalli valutati del protocollo di sfida. Ai soggetti è stato ricordato di tenere traccia del numero di starnuti dal coordinatore della ricerca che è stato presente per tutta la durata delle sfide. La CO2 intranasale o sham è stata quindi applicata per 10 secondi a ciascuna narice. Trenta minuti dopo, starnuti e sintomi sono stati nuovamente registrati, per riflettere il periodo di tempo di 30 minuti, ed è stata avviata la sfida nasale. Poiché eravamo interessati a valutare l'effetto del trattamento sui riflessi nasali indotti da allergeni, abbiamo utilizzato dischi di carta da filtro per eseguire le sfide e monitorare la risposta secretoria come descritto in precedenza.

In breve, sono stati utilizzati dischi di carta da filtro da 8 mm (Shandon, Inc., Pittsburgh, PA) sia per il test nasale che per la raccolta delle secrezioni risultanti. Sono stati posizionati sul setto nasale anteriore, oltre la giunzione mucocutanea, sotto visione diretta utilizzando uno speculum nasale, una pinza e un faro. Cinquanta microlitri di soluzioni di sfida sono stati posti sui dischi, che sono stati poi applicati al setto nasale per 1 minuto. Trenta secondi dopo la rimozione, due dischi di carta da filtro prepesati sono stati posizionati su entrambi i lati del setto nasale per 30 secondi, raccogliendo le secrezioni nasali dal sito di sfida (omolaterale) e dalla narice controlaterale. Questi dischi sono stati quindi immediatamente riposti nei microtubi e pesati. La differenza nel loro peso prima e dopo la sfida era il peso delle secrezioni nasali prodotte, che è stato registrato in milligrammi. Dieci minuti dopo ogni sfida, il numero di starnuti e sintomi su ciascun lato sono stati registrati dai soggetti riflettenti l'intervallo di 10 minuti La prima prova è stata eseguita utilizzando soluzione salina tamponata con fenolo, il diluente per gli estratti di allergeni, e questo seguito da 2 dosi crescenti di allergene dell'erba o dell'ambrosia. Il tempo dalla somministrazione del trattamento al primo test con allergeni è stato di circa 40 minuti e al secondo test con allergeni, 50 minuti. La quantità di allergene applicata sui dischetti di carta per il test era di 333 e 1000 BAU (unità di allergia bioequivalente) di estratto di allergene di erba (Hollister-Stier, Spokane, WA) o 50 microlitri di estratto di antigene di ambrosia a concentrazioni di 1:666 e 1: 200 w/v (Hollister-Stier). I soggetti sono tornati in laboratorio 24 ore dopo e sono stati sottoposti a raschiamento delle loro secrezioni nasali per valutare l'afflusso di eosinofili.