CO2 intranasal para la rinitis alérgica

Diseño del estudio: Realizamos un estudio aleatorizado cruzado de dos vías en sujetos con rinitis alérgica estacional fuera de temporada. Los sujetos acudieron al Laboratorio de Fisiología Nasal para la detección, donde completaron un cuestionario de alergia y se sometieron a pruebas de punción cutánea para confirmar alergia a la hierba o la ambrosía. La prueba cutánea incluyó controles positivos y negativos y los resultados se clasificaron en comparación con los controles de 1+ a 4+ (1+: roncha más grande que el control negativo y más pequeña que el control positivo; 2+: roncha de 5-7 mm; 3+: roncha de 7-10 mm; 4+: cualquier reacción con una roncha >10 mm o pseudópodos pronunciados). Los sujetos con prueba cutánea positiva (entre 2+ y 4+) y un historial positivo de síntomas alérgicos durante las temporadas relevantes luego se sometieron a un desafío nasal de detección con alérgeno de hierba o ambrosía. Los sujetos que pasaron el desafío de detección (aumento del doble en las secreciones nasales ipsilaterales o contralaterales después del desafío con alérgenos en comparación con el diluyente) tuvieron un período de lavado de 2 semanas y regresaron al laboratorio, donde fueron aleatorizados para recibir tratamiento intranasal con CO2 o sin tratamiento. . Treinta minutos después del tratamiento, los sujetos se sometieron a una provocación nasal con alérgeno. Siete sujetos fueron desafiados con ambrosía y cinco sujetos fueron desafiados con hierba. Los sujetos tuvieron otro período de lavado de 2 semanas y luego se cruzaron al otro tratamiento seguido de un desafío similar. El trabajo previo en nuestro laboratorio usando un sistema de desafío similar mostró que los cambios inflamatorios inducidos por alérgenos vuelven a la línea de base 2 semanas después del desafío.

Sujetos: Participaron doce sujetos. Los sujetos fueron estudiados fuera de su temporada de alergias. Todos los sujetos estaban sanos excepto por el asma leve que solo requería broncodilatadores según las necesidades. No tomaban ningún medicamento y no habían recibido antihistamínicos o antagonistas de los receptores de leucotrienos durante al menos 1 semana y esteroides intranasales durante al menos 1 mes antes de la inscripción y durante la duración del estudio.

Tratamiento: se aplicó CO2 durante 10 segundos en cada fosa nasal usando un aplicador especial (pieza nasal de plástico herméticamente sellada) conectado a un bote de CO2 y una válvula de control de flujo. Se administró a un caudal de 0,5 l/min estándar con la boca abierta para evitar la inhalación. Por lo tanto, durante la administración de 20 segundos, la dosis total de CO2 administrada fue de 167 ml. Se desconoce la cantidad de CO2 que llega a la mucosa. El brazo sin tratamiento involucró la colocación del dispositivo pero no se suministró gas. Por lo tanto, ni los sujetos ni los investigadores desconocían el tratamiento administrado. El brazo sin tratamiento no implicó el suministro de aire sin CO2 a la nariz porque nos preocupaba que soplar aire seco en la nariz pudiera causar una reacción en la mucosa que podría confundir los resultados. Hemos demostrado anteriormente que los desafíos con aire frío y seco crean un entorno hiperosmolar, desencadenan la activación de los mastocitos e inducen una reacción nasonasal.7 Por lo tanto, debido a que nuestro resultado primario fue la medida objetiva del reflejo nasonasal, evitamos esta posibilidad.

Desafío Nasal: A los sujetos se les permitió 15 minutos para que se aclimataran al ambiente del laboratorio antes del desafío. Se registraron los estornudos iniciales que reflejaban los 15 minutos de aclimatación y los síntomas nasales y oculares, seguidos de la recolección de un raspado nasal para la cuantificación de eosinófilos en las secreciones nasales. Los sujetos registraron los estornudos durante cada uno de los intervalos evaluados del protocolo de desafío. Se recordó a los sujetos que llevaran un registro del número de estornudos por parte del coordinador de investigación que estuvo presente durante la duración de los desafíos. Luego se aplicó CO2 intranasal o simulado durante 10 segundos en cada fosa nasal. Treinta minutos más tarde, los estornudos y los síntomas se registraron nuevamente para reflejar el período de tiempo de 30 minutos y se inició el desafío nasal. Debido a que estábamos interesados ​​en evaluar el efecto del tratamiento sobre los reflejos nasales inducidos por alérgenos, usamos discos de papel de filtro para realizar los desafíos y monitorear la respuesta secretora como se describió anteriormente.

Brevemente, se usaron discos de papel de filtro de 8 mm (Shandon, Inc., Pittsburgh, PA) tanto para la provocación nasal como para la recolección de las secreciones resultantes. Se colocaron en el tabique nasal anterior, más allá de la unión mucocutánea, bajo visión directa con espéculo nasal, fórceps y linterna. Se colocaron cincuenta microlitros de soluciones de desafío en los discos, que luego se aplicaron al tabique nasal durante 1 minuto. Treinta segundos después de la extracción, se colocaron dos discos de papel de filtro previamente pesados ​​a ambos lados del tabique nasal durante 30 segundos, recolectando secreciones nasales del sitio de desafío (ipsilateral) y la fosa nasal contralateral. A continuación, estos discos se volvieron a colocar inmediatamente en microtubos y se pesaron. La diferencia en su peso antes y después del desafío fue el peso de las secreciones nasales producidas, que se registró en miligramos. Diez minutos después de cada desafío, los sujetos registraron la cantidad de estornudos y los síntomas en cada lado reflejando el intervalo de 10 minutos. El primer desafío se realizó con solución salina tamponada con fenol, el diluyente para los extractos de alérgenos, y esto seguido de 2 dosis crecientes de alérgeno de hierba o ambrosía. El tiempo desde la administración del tratamiento hasta la primera provocación con alérgenos fue de aproximadamente 40 minutos y hasta la segunda provocación con alérgenos, 50 minutos. La cantidad de alérgeno aplicada en los discos de papel para el desafío fue de 333 y 1000 BAU (unidad de alergia bioequivalente) de extracto de alérgeno de hierba (Hollister-Stier, Spokane, WA) o 50 microlitros de extracto de antígeno de ambrosía en concentraciones de 1:666 y 1: 200 p/v (Hollister-Stier). Los sujetos regresaron al laboratorio 24 horas más tarde y se sometieron a un raspado de sus secreciones nasales para evaluar la entrada de eosinófilos.