Donosowe CO2 na alergiczny nieżyt nosa

Projekt badania: Przeprowadziliśmy randomizowane, dwukierunkowe badanie krzyżowe u pacjentów z sezonowym alergicznym zapaleniem błony śluzowej nosa poza sezonem. Pacjenci zgłaszali się do Laboratorium Fizjologii Nosa na badania przesiewowe, gdzie wypełniali kwestionariusz dotyczący alergii i poddawani byli punktowym testom skórnym w celu potwierdzenia alergii na trawę lub ambrozję. Test skórny obejmował kontrolę pozytywną i negatywną, a wyniki oceniano w porównaniu z kontrolą od 1+ do 4+ (1+: bąbel większy niż kontrola negatywna i mniejszy niż kontrola pozytywna; 2+: bąbel 5-7 mm; 3+: bąbel 7-10 mm; 4+: każda reakcja z bąblem >10 mm lub wyraźnymi pseudopodiami). Osobnicy z dodatnim wynikiem testu skórnego (między 2+ a 4+) i dodatnim wywiadem objawów alergicznych w odpowiednich sezonach przeszli następnie przesiewową prowokację donosową z alergenem trawy lub ambrozji. Pacjenci, którzy pomyślnie przeszli test przesiewowy (dwukrotny wzrost wydzieliny z nosa po tej samej lub przeciwnej stronie po prowokacji alergenem w porównaniu z rozcieńczalnikiem) mieli 2-tygodniowy okres wypłukiwania i wrócili do laboratorium, gdzie zostali losowo przydzieleni do grupy otrzymującej leczenie donosowe z CO2 lub bez leczenia . Trzydzieści minut po leczeniu osobniki poddano prowokacji donosowej z alergenem. Siedmiu badanych poddano próbie z ambrozji, a pięciu z trawą. Pacjenci mieli kolejny 2-tygodniowy okres wypłukiwania, a następnie przechodzili do innego leczenia, po którym następowała podobna prowokacja. Poprzednie prace w naszym laboratorium przy użyciu podobnego systemu prowokacji wykazały, że zmiany zapalne wywołane alergenem wracają do wartości wyjściowych 2 tygodnie po prowokacji.

Przedmioty: Uczestniczyło w nim 12 przedmiotów. Osobników badano poza sezonem alergicznym. Wszyscy pacjenci byli zdrowi, z wyjątkiem łagodnej astmy wymagającej tylko doraźnych leków rozszerzających oskrzela. Nie przyjmowali żadnych leków i nie otrzymywali leków przeciwhistaminowych ani antagonistów receptora leukotrienowego przez co najmniej 1 tydzień ani sterydów donosowych przez co najmniej 1 miesiąc przed włączeniem do badania i przez cały czas trwania badania.

Leczenie: CO2 podawano przez 10 sekund do każdego nozdrza za pomocą specjalnego aplikatora (plastikowy szczelny nosek) przymocowanego do pojemnika z CO2 i zaworu kontrolującego przepływ. Dostarczano go z szybkością przepływu 0,5 standardowego l/min z otwartymi ustami, aby zapobiec wdychaniu. Tak więc, przez 20-sekundowy czas podawania, całkowita dostarczona dawka CO2 wyniosła 167 ml. Ilość CO2 dostarczonego do błony śluzowej jest nieznana. Ramię bez leczenia obejmowało umieszczenie urządzenia, ale nie podano gazu. Dlatego ani badani, ani badacze nie byli zaślepieni co do stosowanego leczenia. Ramię bez leczenia nie obejmowało dostarczania powietrza bez CO2 do nosa, ponieważ obawialiśmy się, że wdmuchiwanie suchego powietrza do nosa może spowodować reakcję błony śluzowej, która mogłaby zafałszować wyniki. Wcześniej wykazaliśmy, że wyzwania związane z zimnym, suchym powietrzem tworzą środowisko hiperosmolarne, wyzwalają aktywację komórek tucznych i indukują reakcję nosowo-nosową.7 Tak więc, ponieważ naszym głównym wynikiem była obiektywna miara odruchu nosowo-nosowego, uniknęliśmy tej możliwości.

Prowokacja donosowa: Osobnikom pozwolono na 15 minut na aklimatyzację do środowiska laboratoryjnego przed prowokacją. Zarejestrowano podstawowe kichnięcia odzwierciedlające 15 minut aklimatyzacji oraz objawy ze strony nosa i oczu, a następnie pobrano zeskrobiny z nosa w celu ilościowego oznaczenia eozynofilów w wydzielinach z nosa. Kichnięcia były rejestrowane przez badanych podczas każdego z ocenianych przedziałów protokołu prowokacji. Koordynator badań, który był obecny podczas trwania wyzwań, przypominał badanym, aby śledzili liczbę kichnięć. Następnie do każdego nozdrza przez 10 sekund podawano donosowo CO2 lub pozorowaną dawkę CO2. Trzydzieści minut później ponownie zarejestrowano kichnięcia i objawy, aby odzwierciedlić 30-minutowy okres, i rozpoczęto prowokację donosową. Ponieważ byliśmy zainteresowani oceną wpływu leczenia na odruchy nosowe wywołane alergenem, użyliśmy dysków z bibuły filtracyjnej do wykonania prowokacji i monitorowania odpowiedzi wydzielniczej, jak opisano wcześniej.

Pokrótce, 8-milimetrowe krążki bibuły filtracyjnej (Shandon, Inc., Pittsburgh, PA) stosowano zarówno do prowokacji donosowej, jak i zbierania powstałych wydzielin. Umieszczano je na przedniej przegrodzie nosa, poza połączeniem śluzówkowo-skórnym, pod bezpośrednim widzeniem za pomocą wziernika nosowego, kleszczyków i reflektora. Pięćdziesiąt mikrolitrów roztworów do prowokacji umieszczono na krążkach, które następnie nanoszono na przegrodę nosową na 1 minutę. Trzydzieści sekund po wyjęciu dwa uprzednio zważone krążki bibuły filtracyjnej umieszczono po obu stronach przegrody nosowej na 30 sekund, zbierając wydzielinę nosową z miejsca prowokacji (po tej samej stronie) i przeciwległego nozdrza. Krążki te następnie natychmiast umieszczono z powrotem w mikroprobówkach i zważono. Różnica w ich masie przed i po prowokacji była masą wytworzonej wydzieliny z nosa, którą odnotowywano w miligramach. Dziesięć minut po każdej prowokacji badani rejestrowali liczbę kichnięć oraz objawy po każdej stronie, odzwierciedlając 10-minutowy odstęp. następnie 2 rosnące dawki alergenu trawy lub ambrozji. Czas od podania leku do pierwszej prowokacji alergenem wynosił około 40 minut, a do drugiej prowokacji alergenem 50 minut. Ilość alergenu naniesiona na papierowe krążki do prowokacji wynosiła 333 i 1000 BAU (jednostka biorównoważna alergii) ekstraktu alergenu traw (Hollister-Stier, Spokane, WA) lub 50 mikrolitrów ekstraktu antygenu ambrozji w stężeniach 1:666 i 1: 200 w/v (Hollister-Stier). Badani wrócili do laboratorium 24 godziny później i zostali poddani zeskrobaniu wydzieliny z nosa w celu oceny napływu eozynofili.