Sangue periferico mobilizzato autologo Cellule staminali e progenitrici ematopoietiche CD34+ (HSPC) trasdotte con il fattore di allungamento Alpha Short Promoter (EFS) - Gene dell'adenosina deaminasi (ADA) (EFS-ADA) Vettore lentivirale per l'immunodeficienza combinata grave dell'adenosina deaminasi (ADA SCID)

Criterio di inclusione:

Tutti i soggetti devono soddisfare i seguenti criteri per essere inclusi nello studio:

1. Fornitura di consenso informato scritto prima di qualsiasi procedura correlata allo studio. In questo studio il consenso deve essere fornito dai genitori/tutori legali e, ove applicabile secondo le leggi locali, un assenso firmato dal bambino,
2. Soggetti di età ≥30 giorni,

3. Con una diagnosi di ADA-SCID basata su:

   Evidenza di carenza di ADA, definita come:

   io. Ridotta attività enzimatica ADA in eritrociti, leucociti, fibroblasti cutanei o cellule fetali in coltura a livelli coerenti con ADA-SCID come determinato dal laboratorio di riferimento, o ii. Mutazioni identificate negli alleli ADA coerenti con una grave riduzione dell'attività ADA,

   Evidenza di ADA-SCID basata su:

   io. Anamnesi familiare di un parente di primo ordine con deficit di ADA ed evidenza clinica e di laboratorio di grave deficit immunologico, o ii. Evidenza di grave deficit immunologico nei soggetti prima dell'istituzione della terapia immunitaria riparativa, basata su

   1. Linfopenia (conta assoluta dei linfociti (ALC) <400 cellule/ml) O assenza o basso numero di cellule T (conta assoluta dei CD3+ < 300 cellule/ml) o
   2. Risposte blastogene dei linfociti T gravemente ridotte alla fitoemoagglutinina (o <10% del limite inferiore dei controlli normali per il laboratorio diagnostico, o <10% della risposta del controllo normale del giorno, o indice di stimolazione <10), o
   3. Identificazione di SCID mediante screening neonatale che rivela bassi livelli di cerchi di escissione del recettore delle cellule T (TREC).
4. Non idoneo per il trapianto di midollo osseo allogenico (BM) familiare compatibile, definito come l'assenza di un fratello o di un donatore di famiglia HLA-identico dal punto di vista medico, con una normale funzione immunitaria, che potrebbe fungere da donatore di midollo osseo allogenico.
5. Le donne in età fertile dovranno fornire un test di gravidanza negativo 30 giorni prima della Visita 2.
6. I soggetti e i loro genitori/tutori legali devono essere disposti e in grado di rispettare le restrizioni dello studio e di rimanere presso la clinica per la durata richiesta durante il periodo di studio e disposti a tornare alla clinica per la valutazione di follow-up come specificato nel protocollo.

Criteri di esclusione:

I soggetti non saranno idonei per lo studio se uno dei seguenti criteri è soddisfatto:

1. Non idoneo per HSCT autologo secondo i criteri del sito clinico
2. Altre condizioni che, a parere del ricercatore principale e/o dei co-ricercatori, controindicano la mobilizzazione del sangue periferico o il processo di leucaferesi, la somministrazione di busulfano e l'infusione di cellule trasdotte, o che indicano un'incapacità del soggetto o del genitore del soggetto/ tutore legale per rispettare il protocollo

3. Anomalia ematologica, definita come:

   • Anemia (Hb <8,0 g/dl).
   • Neutropenia (CAN <500/mm3). Nota: ANC <500 con assenza di sindrome mielodisplastica su aspirato e biopsia del midollo osseo e normale citogenetica del midollo sono accettabili per l'ammissibilità.
   • Trombocitopenia (conta piastrinica <50.000/mm3, a qualsiasi età).
   • Tempo di protrombina o rapporto internazionale normalizzato (INR) e tempo di tromboplastina parziale (PTT) > 2 x limite superiore della norma (ULN) (non saranno esclusi i soggetti con un deficit correggibile controllato con farmaci).
   • Anomalie citogenetiche su sangue periferico o midollo osseo o liquido amniotico (se disponibile).
   • Precedente trapianto allogenico con condizionamento citoriduttivo.

4. Anomalia polmonare, definita come:

   • Saturazione di O2 a riposo mediante pulsossimetria <90% in aria ambiente.
   • Radiografia del torace che indica malattia polmonare attiva o progressiva. Nota: la radiografia del torace che indica segni residui di polmonite trattata è accettabile per l'idoneità.

5. Anomalia cardiaca, definita come:

   • ECG anomalo che indica patologia cardiaca.
   • Malformazione cardiaca congenita non corretta con sintomi clinici.
   • Malattia cardiaca attiva, inclusa evidenza clinica di insufficienza cardiaca congestizia, cianosi, ipotensione.
   • Scarsa funzionalità cardiaca come evidenziato dalla frazione di eiezione ventricolare sinistra <40% sull'ecocardiogramma.

6. Anomalia neurologica, definita come:

   • Significativa anomalia neurologica rivelata dall'esame.
   • Disturbo convulsivo incontrollato.

7. Anomalia renale, definita come:

   • Insufficienza renale: creatinina sierica ≥1,2 mg/dl (106 µmol/L) o proteinuria ≥3+.
   • Livelli sierici anormali di sodio, potassio, calcio, magnesio o fosfato a > 2 x ULN.

8. Anomalie epatiche/intestinali, definite come:

   • Transaminasi sieriche >5 x ULN.
   • Bilirubina sierica >2 x ULN.
   • Glicemia sierica > 1,5 x ULN.

9. Malattia oncologica, definita come:

   • Evidenza di malattia maligna attiva diversa dal dermatofibrosarcoma protuberans (DFSP).
   • Evidenza di DFSP che dovrebbe richiedere una terapia antineoplastica entro i 5 anni successivi all'infusione di cellule geneticamente corrette (se la terapia antineoplastica è stata completata, può essere incluso un soggetto con una storia di DFSP).
   • Evidenza di DFSP che dovrebbe limitare la vita entro i 5 anni successivi all'infusione di cellule geneticamente corrette.
10. Sensibilità nota al Busulfan.

11. Conferma di una malattia infettiva mediante reazione a catena della polimerasi (PCR) dell'acido desossiribonucleico (DNA) positiva al momento della valutazione per quanto segue:

    • HIV-1,
    • Epatite B,
    • Parvovirus B19.
12. Il soggetto è in stato di gravidanza o presenta una grave anomalia congenita.
13. È probabile che richieda un trattamento durante lo studio con farmaci non consentiti dal protocollo dello studio.
14. Il soggetto ha precedentemente ricevuto un'altra forma di terapia genica.