Turnover osseo nei controlli del diabete di tipo 2 e dei non diabetici (DiaMarv) (DiaMarv)

3.1 Metodi Lo studio 1 è uno studio trasversale in cui vengono esaminati 26 individui con T2D e 26 individui di pari età senza T2D. Il nostro obiettivo è indagare se a) i marcatori del turnover osseo sono inferiori negli individui con diabete di tipo 2 (T2D) rispetto alle persone senza T2D sulla base dei marcatori del turnover osseo circolante, dei marcatori del turnover osseo nel midollo osseo e del turnover osseo misurato nelle biopsie del tessuto osseo b) i livelli di prodotti finali della glicazione avanzata (AGE) nella circolazione, nel midollo osseo, nel tessuto osseo e nella pelle in individui con e senza T2D. Ipotizziamo che i livelli di AGE siano inferiori in tutti e tre i compartimenti tissutali negli individui con T2D rispetto alle persone senza T2D.

Le persone sono incluse e reclutate da cliniche ambulatoriali, medici generici, lettere basate su informazioni dai registri nazionali e tramite annunci sui media.

Criteri di inclusione per individui con T2D; T2D diagnosticato dal medico, durata del diabete ≥5 anni, HbA1c ≥ 59 mmol/mol negli ultimi 2 anni, sesso maschile, età > 40 anni e BMI < 35 kg/m2. Criteri di inclusione per individui senza T2D; nessuna diagnosi di T2D, sesso maschile, età > 40 anni e BMI < 35 kg/m2. Criteri di esclusione per tutti i partecipanti; conta dei trombociti < 100, trattamento con anticoagulanti ad eccezione dell'acido acetilico, insufficienza renale (eGFR <50 ml/min), malattia del metabolismo osseo, insufficienza di vitamina D, trattamento con agenti antiosteoporotici o glucocorticoidi sistemici e allergia alle tetracicline.

3.11 Metodi Verranno prelevati campioni di sangue al mattino a digiuno. I partecipanti saranno sottoposti a un'assorbimetria a raggi X a doppia energia (DXA) di tutto il corpo per studiare la composizione corporea (massa magra e massa grassa) e una biopsia del midollo osseo Jamshidi in cui vengono raccolti due pezzi di tessuto osseo per la misurazione del turnover osseo e dell'età.

3.12. Biopsia del tessuto osseo Prima del prelievo del tessuto osseo, il tessuto osseo sarà marcato due volte mediante somministrazione di tetraciclina. La tetraciclina è incorporata nell'osso neoformato come bande visibili al microscopio. Sul campione di tessuto osseo viene condotta un'analisi istomorfometrica per indagare gli indici di turnover osseo.

3.13 Misurazione dei biomarcatori Dai campioni di midollo osseo e plasma/siero vengono misurati i seguenti marcatori di riassorbimento osseo: CTX e TRAP5b. Marcatori di formazione ossea: P1NP, osteocalcina e fosfatasi alcalina specifica per l'osso.

Marcatori di segnalazione ossea: osteoprotegerina, RANKL, sclerostina e ormone paratiroideo.

3.14. Analisi del DXA di tutto il corpo Il DXA di tutto il corpo misura la densità minerale ossea e la massa magra e grassa. 3.15 Misurazione degli AGE Vengono misurati i livelli sierici di AGE nel siero e nel midollo osseo. Per ogni partecipante, viene polverizzata una biopsia del tessuto osseo e il livello di AGE nel tessuto osseo stimato dalla spettroscopia infrarossa trasformata di Fourier (FTIR) in collaborazione con l'Interdisciplinary Nanoscience Center, Università di Aarhus. L'autofluorescenza cutanea verrà applicata per misurare in modo non invasivo i livelli di AGE nella pelle.

3.16 Statistiche I t-test degli studenti saranno utilizzati per confrontare i livelli dei marcatori del turnover osseo e degli AGE tra individui con e senza T2D. I grafici di Bland Altman saranno utilizzati per analizzare la concordanza tra la misurazione dei marcatori del turnover osseo e gli AGE nei diversi comparti tissutali. L'adeguamento verrà eseguito utilizzando la regressione logistica o lineare a seconda della distribuzione dei dati.

3.1.7 Calcolo della potenza Il calcolo della potenza si basa sul marker di formazione ossea, l'osteocalcina. I livelli plasmatici di osteocalcina erano in uno studio precedente 14,4 +/- 5,3 ug/l (media +/- DS).

Si prevede che ci sarà un livello di osteocalcina inferiore del 30% negli individui con T2D rispetto agli individui senza T2D. Sulla base dei presupposti di cui sopra, la probabilità di un errore di tipo 1 di 0,05, la probabilità di un errore di tipo II di 0,8 e che due aspirazioni midollari in ciascun gruppo falliranno, 26 individui dovrebbero essere inclusi in ciascun gruppo per rilevare un differenza.

3.l.8 Approvazione Lo studio è approvato dal Comitato Etico Regionale, Regione Midtjylland: 1-10-72-214-21.