Recambio óseo en controles con diabetes tipo 2 y sin diabetes (DiaMarv) (DiaMarv)

3.1 Métodos El Estudio 1 es un estudio transversal en el que se examinan 26 personas con DT2 y 26 personas de la misma edad sin DT2. Nuestro objetivo es investigar si a) los marcadores de recambio óseo son más bajos en las personas con diabetes tipo 2 (DT2) en comparación con las personas sin DT2 según los marcadores de recambio óseo circulantes, los marcadores de recambio óseo en la médula ósea y el recambio óseo medido en biopsias de tejido óseo b) los niveles de productos finales de glicación avanzada (AGE) en la circulación, la médula ósea, el tejido óseo y la piel en personas con y sin DT2. Nuestra hipótesis es que los niveles de AGE son más bajos en los tres compartimentos de tejido en personas con DT2 en comparación con personas sin DT2.

Los individuos son incluidos y reclutados de clínicas ambulatorias, médicos generales, cartas basadas en información de registros nacionales y a través de anuncios en los medios.

Criterios de inclusión para personas con DT2; DM2 diagnosticada por un médico, duración de la diabetes ≥5 años, HbA1c ≥ 59 mmol/mol durante los últimos 2 años, sexo masculino, edad > 40 años e IMC < 35 kg/m2. Criterios de inclusión para personas sin DT2; sin diagnóstico de DT2, sexo masculino, edad > 40 años e IMC < 35 kg/m2. Criterios de exclusión para todos los participantes; recuento de trombocitos < 100, tratamiento con anticoagulantes excepto ácidos acetílicos, insuficiencia renal (TFGe < 50 ml/min), enfermedad metabólica ósea, insuficiencia de vitamina D, tratamiento con agentes antiosteoporóticos o glucocorticoides sistémicos y alergia a la tetraciclina.

3.11 Métodos Se recolectarán muestras de sangre en ayunas por la mañana. Los participantes se someterán a una absorciometría de rayos X de energía dual (DXA) de todo el cuerpo para investigar la composición corporal (masa magra y grasa) y una biopsia de médula ósea de Jamshidi en la que se recolectan dos piezas de tejido óseo para medir el recambio óseo y EDAD.

3.12. Biopsia de tejido óseo Antes de la toma de muestras de tejido óseo, el tejido óseo se marcará dos veces mediante la administración de tetraciclina. La tetraciclina se incorpora al hueso recién formado en forma de bandas que son visibles al microscopio. Se realiza un análisis histomorfométrico en la muestra de tejido óseo para investigar los índices de recambio óseo.

3.13 Medición de biomarcadores A partir de muestras de médula ósea y plasma/suero se miden los siguientes marcadores de resorción ósea: CTX y TRAP5b. Marcadores de formación ósea: P1NP, Osteocalcina y Fosfatasa alcalina específica de hueso.

Marcadores de señalización ósea: Osteoprotegerina, RANKL, Esclerostina y hormona paratiroidea.

3.14. Análisis de DXA de cuerpo entero La DXA de cuerpo entero mide la DMO y la masa magra y grasa. 3.15 Medición de AGE Se miden los niveles de AGE en suero sanguíneo y en médula ósea. Para cada participante, se pulveriza una biopsia de tejido óseo y se estima el nivel de AGE en el tejido óseo mediante espectroscopia infrarroja transformada de Fourier (FTIR) en colaboración con el Centro Interdisciplinario de Nanociencia de la Universidad de Aarhus. La autofluorescencia de la piel se aplicará para medir de forma no invasiva los niveles de AGE en la piel.

3.16 Estadísticas Las pruebas t de Student se utilizarán para comparar los niveles de marcadores de recambio óseo y AGE entre personas con y sin DT2. Se utilizarán gráficos de Bland Altman para analizar la concordancia entre la medición de los marcadores de recambio óseo y los AGE en los diferentes compartimentos de tejido. El ajuste se realizará mediante regresión logística o lineal según la distribución de datos.

3.1.7 Cálculo de la potencia El cálculo de la potencia se basa en el marcador de formación ósea, la osteocalcina. Los niveles de osteocalcina en plasma fueron en un estudio previo de 14,4 +/- 5,3 ug/l (media +/- DE).

Se espera que haya un nivel de osteocalcina un 30 % más bajo en personas con DT2 en comparación con personas sin DT2. Con base en los supuestos anteriores, la probabilidad de un error de tipo 1 de 0,05, la probabilidad de un error de tipo II de 0,8 y que dos aspiraciones de médula en cada grupo fallen, se deben incluir 26 individuos en cada grupo para detectar un diferencia.

3.l.8 Aprobación El estudio está aprobado en el Comité de Ética Regional, Región Midtjylland: 1-10-72-214-21.