Benomsetning i type 2-diabetes og ikke-diabeteskontroller (DiaMarv) (DiaMarv)

3.1 Metoder Studie 1 er en tverrsnittsstudie der 26 individer med T2D og 26 alderstilpassede individer uten T2D undersøkes. Vi tar sikte på å undersøke om a) beinomsetningsmarkører er lavere hos personer med type 2 diabetes (T2D) sammenlignet med personer uten T2D basert på sirkulerende beinomsetningsmarkører, beinomsetningsmarkører i benmargen og beinomsetning målt i benvevsbiopsier b) nivåene av avanserte glykeringssluttprodukter (AGE) i sirkulasjonen, benmargen, beinvevet og huden hos individer med og uten T2D. Vi antar at nivåene av AGE er lavere i alle tre vevsavdelingene hos individer med T2D sammenlignet med personer uten T2D.

Personene inkluderes og rekrutteres fra poliklinikker, allmennleger, brev basert på informasjon fra nasjonale registre og via medieoppslag.

Inkluderingskriterier for individer med T2D; lege diagnostisert T2D, diabetesvarighet ≥5 år, HbA1c ≥ 59 mmol/mol gjennom de siste 2 årene, mannlig kjønn, alder > 40 år og BMI < 35 kg/m2. Inkluderingskriterier for individer uten T2D; ingen diagnose T2D, mannlig kjønn, alder > 40 år og BMI < 35 kg/m2. Ekskluderingskriterier for alle deltakere; trombocyttantall < 100, behandling med antikoagulantia unntatt acetylsyrer, nedsatt nyrefunksjon (eGFR <50 ml/min), benmetabolsk sykdom, vitamin D-mangel, behandling med antiosteoporotiske midler eller systemiske glukokortikoider og tetracyklinallergi.

3.11 Metoder Fastende morgenblodprøver vil bli tatt. Deltakerne vil gjennomgå en helkropps dual energy x-ray absorptiometri (DXA) for å undersøke kroppssammensetning (mager og fettmasse) og en Jamshidi-benmargsbiopsi der to biter av beinvev samles for måling av beinomsetning og ALDER.

3.12. Benvevsbiopsi Før benvevsprøvetakingen vil benvevet merkes to ganger ved administrering av tetracyklin. Tetracyklin er inkorporert i nydannet bein som bånd som er synlige i et mikroskop. En histomorfometrisk analyse utføres på benvevsprøven for å undersøke indeksene for beinomsetning.

3.13 Måling av biomarkører Fra benmarg og plasma/serumprøver måles følgende Benresorpsjonsmarkører: CTX og TRAP5b. Bendannelsesmarkører: P1NP, Osteocalcin og Benspesifikk alkalisk fosfatase.

Bensignaleringsmarkører: Osteoprotegerin, RANKL, Sklerostin og parathyroidhormon.

3.14. Analyse av hele kroppen DXA Hele kroppen DXA måler BMD og mager og fettmasse. 3.15 Måling av AGEs Blodserum og benmargsserumnivåer av AGEs måles. For hver deltaker pulveriseres én benvevsbiopsi, og nivået av AGE i beinvevet estimeres ved Fourier Transformed Infrared Spectroscopy (FTIR) i samarbeid med Interdisciplinary Nanoscience Center, Aarhus Universitet. Hudautofluorescens vil bli brukt for å ikke-invasivt måle nivåer av AGE i huden.

3.16 Statistikk Studenters t-tester vil bli brukt til å sammenligne nivåer av beinomsetningsmarkører og AGE mellom individer med og uten T2D. Bland Altman-plott vil bli brukt til å analysere samsvar mellom måling av beinomsetningsmarkører og AGEs ved de forskjellige vevsrommene. Justering vil bli utført ved hjelp av logistisk eller lineær regresjon avhengig av datadistribusjon.

3.1.7 Kraftberegning Kraftberegningen er basert på bendannelsesmarkøren, osteokalsin. Plasma osteokalsinnivåer var i en tidligere studie 14,4 +/- 5,3 ug/l (gjennomsnitt +/-SD).

Det forventes at det vil være 30 % lavere nivå av osteokalcin hos individer med T2D sammenlignet med individer uten T2D. Basert på forutsetningene ovenfor, sannsynligheten for en type 1 feil på 0,05, sannsynligheten for en type II feil på 0,8, og at to margaspirasjoner i hver gruppe vil mislykkes, bør 26 individer inkluderes i hver gruppe for å oppdage en forskjell.

3.l.8 Godkjenning Studiet er godkjent ved Regional etisk komité, Region Midtjylland: 1-10-72-214-21.