Infezione non primaria da HCMV: storia naturale e risposta immunitaria

Le donne idonee saranno identificate e arruolate durante la gravidanza o al momento del parto. Le madri consenzienti verranno testate per il DNA dell'HCMV nella saliva, nelle urine e nel tampone vaginale al momento del parto e/o alla prima visita post-partum programmata (2-4 mesi dopo il parto). Inoltre, madri e bambini verranno testati per la presenza di DNA di HCMV rispettivamente nei campioni di latte e saliva.

Una coppia madre-bambino è considerata HCMV-DNA positiva e, pertanto, idonea a proseguire lo studio (ovvero il follow-up a 12 mesi dal ricovero del bambino al centro diurno) ogni volta che viene rilevato DNA virale in campioni clinici della madre o del bambino. il bambino o entrambi. Infatti, quando il DNA virale non è rilevabile nella madre ma è presente nella saliva di un bambino di 2-4 mesi si può ragionevolmente supporre che il ceppo sia di origine materna.

Lo studio non richiede alcuna modifica nella normale relazione madre-bambino e le madri partecipanti saranno incoraggiate a comportarsi normalmente. Tuttavia, alle madri verrà chiesto di compilare un breve questionario sui comportamenti di base nella cura quotidiana del bambino (es. frequenza del lavaggio delle mani, bacio del neonato, condivisione del cibo...).

I seguenti campioni clinici verranno raccolti da madri e neonati nei tempi indicati (T):

T0. Consegna:

• madre: saliva, urina, tampone vaginale, sangue periferico.

T1. 2-4 mesi dopo la consegna:

• madre: saliva, urina, tampone vaginale, latte, sangue periferico;
• neonato: tampone salivare.

T2. Ingresso del neonato al centro diurno:

• madre: tampone salivare, urina, tampone vaginale, sangue periferico;
• neonato: tampone salivare.

T3-T6. Ogni 3 mesi dopo il ricovero del neonato per un anno:

• madre: tampone salivare, urina, tampone vaginale, sangue periferico;
• neonato: tampone salivare.

Analisi virologiche:

1. Rilevazione e quantificazione del DNA dell'HCMV in campioni di sangue e corpo;
2. analisi della sequenza di geni virali variabili selezionati e determinazione della diversità del ceppo(i) (quando possibile verrà sequenziato anche l'intero genoma);
3. Isolamento dell'HCMV dai campioni raccolti (quando viene rilevata la diffusione del DNA dell'HCMV).

Analisi immunologiche:

• risposta anticorpale:

  1. IgG e IgM verso antigeni interi di HCMV;
  2. Complessi da IgG a glicoproteici gHgLpUL128L, gHgLgO, gB;
  3. Ab neutralizzante (Nt) che blocca l'infezione delle cellule epiteliali/endoteliali e dei fibroblasti.

• Risposta delle cellule T:

  1. produzione ex vivo di citochine (IFNgamma/IL-2);
  2. proliferazione ex vivo dopo stimolazione con antigeni HCMV;
  3. stato di differenziazione delle cellule T specifiche per HCMV (espressione di CCR7, CD45RA, IL7R.

Questionario:

Le mamme partecipanti saranno inoltre invitate a compilare un questionario riguardante le loro abitudini quotidiane in termini di cura dei propri figli.