Neprimární HCMV infekce: Přirozená historie a imunitní odpověď

Způsobilé ženy budou identifikovány a zapsány během těhotenství nebo při porodu. Souhlasící matky budou testovány na HCMV DNA ve slinách, moči a vaginálním výtěru při porodu a/nebo při první plánované poporodní návštěvě (2-4 měsíce po porodu). Kromě toho budou matky a děti testovány na přítomnost HCMV DNA ve vzorcích mléka a slin, resp.

Pár matka-dítě je považován za HCMV-DNA pozitivní, a proto je vhodný pro pokračování ve studii (tj. 12měsíční sledování po přijetí dítěte do centra denní péče), kdykoli je virová DNA detekována v klinických vzorcích buď matky, nebo dítě nebo oba. Ve skutečnosti, když je virová DNA u matky nedetekovatelná, ale je přítomna ve slinách 2-4 měsíčního kojence, lze důvodně předpokládat, že kmen je mateřského původu.

Studie nevyžaduje žádné úpravy v normálním vztahu matka-dítě a zúčastněné matky budou vyzvány, aby se chovaly normálně. Matky však budou požádány o vyplnění krátkého dotazníku o základním chování v každodenní péči o dítě (tj. frekvence mytí rukou, líbání kojence, sdílení jídla...).

V uvedených časech (T) budou matkám a kojencům odebrány následující klinické vzorky:

T0. Dodávka:

• matka: sliny, moč, výtěr z pochvy, periferní krev.

T1. 2-4 měsíce po dodání:

• matka: sliny, moč, výtěr z pochvy, mléko, periferní krev;
• kojenec: výtěr ze slin.

T2. Přijetí kojence do denního stacionáře:

• matka: výtěr ze slin, moč, výtěr z pochvy, periferní krev;
• kojenec: výtěr ze slin.

T3-T6. Každé 3 měsíce po přijetí dítěte po dobu jednoho roku:

• matka: výtěr ze slin, moč, výtěr z pochvy, periferní krev;
• kojenec: výtěr ze slin.

Virologické analýzy:

1. detekce a kvantifikace HCMV DNA v krvi a tělních vzorcích;
2. sekvenční analýza vybraných variabilních virových genů a stanovení diverzity kmenů (pokud je to možné, bude také sekvenován celý genom);
3. Izolace HCMV z odebraných vzorků (když je detekováno uvolňování HCMV DNA).

Imunologické rozbory:

• protilátková odpověď:

  1. IgG a IgM na celé antigeny HCMV;
  2. IgG na glykoproteinové komplexy gHgLpUL128L, gHgLgO, gB;
  3. neutralizující (Nt) Ab blokující infekci epiteliálních/endoteliálních buněk a fibroblastů.

• Odpověď T buněk:

  1. ex vivo produkce cytokinů (IFNgamma/IL-2);
  2. ex vivo proliferace po stimulaci HCMV antigeny;
  3. stav diferenciace HCMV specifických T buněk (exprese CCR7, CD45RA, IL7R.

Dotazník:

Zúčastněné matky budou rovněž vyzvány k vyplnění dotazníku týkajícího se jejich každodenních návyků v oblasti péče o děti.