Непервичная инфекция ЦМВ: естественное течение и иммунный ответ

Женщины, имеющие право на участие в программе, будут выявлены и зачислены во время беременности или во время родов. Давшие согласие матери будут проверены на наличие ДНК ЦМВИ в слюне, моче и вагинальном мазке при родах и/или во время первого планового послеродового визита (через 2–4 месяца после родов). Кроме того, матери и дети будут проверены на наличие ДНК ЦМВИ в образцах молока и слюны соответственно.

Пара мать-ребенок считается ДНК-положительной по ЦМВИ и, следовательно, подходит для продолжения исследования (т.е. в течение 12 месяцев после поступления ребенка в детский сад) всякий раз, когда вирусная ДНК обнаруживается в клинических образцах матери или ребенка. ребенок или оба. Фактически, когда вирусная ДНК не обнаруживается у матери, но присутствует в слюне 2-4-месячного ребенка, можно обоснованно предположить, что штамм имеет материнское происхождение.

Исследование не требует каких-либо изменений в нормальных отношениях между матерью и ребенком, и участвующим матерям будет предложено вести себя нормально. Тем не менее, матерям будет предложено заполнить короткую анкету об основных правилах поведения при ежедневном уходе за детьми (т. частота мытья рук, поцелуев младенца, совместного приема пищи...).

Следующие клинические образцы будут взяты у матерей и младенцев в указанное время (T):

Т0. Доставка:

• мать: слюна, моча, влагалищный мазок, периферическая кровь.

Т1. 2-4 месяца после родов:

• мать: слюна, моча, влагалищный мазок, молоко, периферическая кровь;
• младенец: мазок слюны.

Т2. Прием ребенка в детский сад:

• мать: мазок слюны, моча, мазок из влагалища, периферическая кровь;
• младенец: мазок слюны.

Т3-Т6. Каждые 3 месяца после поступления ребенка в течение одного года:

• мать: мазок слюны, моча, мазок из влагалища, периферическая кровь;
• младенец: мазок слюны.

Вирусологические анализы:

1. Обнаружение и количественная оценка ДНК ЦМВИ в образцах крови и тела;
2. анализ последовательности выбранных вариабельных вирусных генов и определение разнообразия штаммов (по возможности также будет секвенирован весь геном);
3. Выделение ЦМВК из собранных образцов (при обнаружении выделения ДНК ЦМВК).

Иммунологические анализы:

• ответ антител:

  1. IgG и IgM к целым антигенам HCMV;
  2. IgG к гликопротеиновым комплексам gHgLpUL128L, gHgLgO, gB;
  3. нейтрализующее (Nt) Ab, блокирующее инфекцию эпителиальных/эндотелиальных клеток и фибробластов.

• Т-клеточный ответ:

  1. продукция цитокинов ex vivo (IFNgamma/IL-2);
  2. пролиферация ex vivo после стимуляции антигенами HCMV;
  3. состояние дифференцировки специфичных для HCMV Т-клеток (экспрессия CCR7, CD45RA, IL7R.

Анкета:

Участвующим матерям также будет предложено заполнить анкету об их повседневных привычках в плане ухода за детьми.